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文档简介
1、 基础生物化学实验论文题目:黄瓜中蛋白质、维生素C、还原糖的测定1.摘要:22.前言:33.论文正文74.感谢:105.参考文献:101.摘要:黄瓜中有许多的营养素。【营养成分】每100克含蛋白质0.60.8克,脂肪0.2克,碳水化合物1.62.0克,灰分O.40.5克,钙1519毫克,磷2933毫克,铁0.2一1.1毫克,胡萝卜素0.20.3毫克,硫胺素0.020.04毫克,核黄素0.040.4毫克,尼克酸0.20.3毫克,抗坏血酸411毫克。此外,还含有葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、甘露糖、木米糖、果糖、咖啡酸、绿原酸、多种游离氨基酸以及挥发油、葫芦素、黄瓜酶等。 关键词:蛋白质 抗坏
2、血酸(维生素C) 葡萄糖,半乳糖,果糖(还原糖)2.前言:蛋白质(protein)是生活细胞内含量最丰富,功能最复杂的生物大分子,并参与了几乎所有的生命活动和生命过程。因此,研究蛋白质的结构与功能始终是生命科学最基本的命题。生命体是主要的的特征是生命活动,而蛋白质是生命活动党的体现者:(1) 生物催化剂(2) 结构组分(3) 激素(4) 运动蛋白(5) 防御功能(6) 运输功能(7) 信号传递与识别(8) 调节基因表达和细胞周期控制(9) 储存作用(10) 糖蛋白维生素C(Vitamin C),又称抗坏血酸。这是一种己糖酸内脂,有L型和D型两种异构体,自有L型有生理作用。其分子中2位3为碳原子
3、的两个烯醇式羟基易解离,释放出H+,故有酸性。抗坏血酸是一种强还原剂,其氧化形式脱氧抗坏血酸可被多种还原剂如谷胱甘肽(GSH)还原。所以两种类型的抗坏血酸课组成一个可逆的氧化还原系统。在植物中,抗坏血酸,谷胱甘肽和NADP+的氧化还原反应相偶联。在动物中,在胶原形成时抗坏血酸起着外源还原剂的作用,使脯氨酸转化成羟脯氨酸,而与动物中的羟基化作用有关,促使胶原蛋白的合成。已知许多含琉基的酶,在体内需要自由SH才能发挥羟基化活性,而抗坏血酸能使这些酶分子中的琉基处于还原状态。 (抗坏血酸)还原糖(reducing sugar ):羰基碳(异头碳)没有参与形成糖苷键,能够还原斐林(H.von Fehl
4、ing)试剂或托伦斯(B.Tollens)试剂(银氨溶液)的糖称为还原糖,所有的单糖,不论醛糖、酮糖都是还原糖。大部分双糖也是还原糖,蔗糖例外。斐林试剂是含Cu2+络合物的溶液,被还原后得到砖红色Cu2O的沉淀。托伦斯试剂被还原后(银镜反应)能生成单质银,在试管壁上可看到“银镜”。包扩葡萄糖,果糖,麦芽糖,乳糖等。 D-()果糖 D()果糖 D()果糖 麦芽糖分子结构式 乳糖分子结构式3.论文正文本学期基础生物化学实验,前三个实验主题是:考马斯亮蓝G250法测定蛋白质含量;维生素C的含量测定;植物组织中还原糖含量的测定_3.5二硝基水杨酸比色法。在此三个实验中,我组选择的实验材料是黄瓜。 考马
5、斯亮蓝G250法测定蛋白质含量考马斯亮蓝G250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的最大吸收峰的位置由465nm变为595nm,溶液的颜色也由红褐色变为青色,在一定蛋白质溶液范围内(01000ug/mol),蛋白质色素结合物在595nm波长下的光吸收与蛋白质浓度成正比,故可用于蛋白质含量的测定。第一次第二次平均值蛋白质浓度A=280比色0.244 0.241 0.242计算公式: 样品蛋白质含量(ug/g鲜重)=A*离心后浓度/样品重(g) = 280*100/2.03(mg/g) =1.44*104 (104表示10的4次方)维生素C的含量测定 天然的维生素C分还原型和脱氧型两种,还愿型
6、抗坏血酸在中性和微酸性的条件下能把蓝色染料2.6一二氯酚淀粉(2.6D),还原成无色化合物,而本身氧化成脱氢抗坏血酸,2.6D钠盐溶于水,其碱性或中性水溶液成蓝色,在酸性溶液中呈现桃红色,这个变化为滴定终点。空白组第一组第二组第三组用量(ml)0.08(v1)0.260.290.30平均值(v) 0.28计算公式: W=((v-v1)*A/B)*(b/a)*100 =(0.28-0.08)*0.147/10)*(50/2.0)*100 =7.35mg/100gA=0.147mg/ml v=实验组平均值 v1=空白组用量a样品克数 b样品稀释总毫升数 B滴定时吸取样品溶液毫升数结果与讨论:(1)
7、 数值太小可能是没有摇匀就过滤(2) 数值太小可能是取得黄瓜萎蔫了 植物组织中还原糖含量的测定 3.5一二硝基水杨酸比色法 糖是多羟醛(或多羟酮)化合物,多糖和寡糖等就可以经酸或酶水解生成还原糖。还原糖是指糖分子中有自由的醛基半缩醛基或半缩醛羟基或酮基的糖。它们具有还原的性质,在碱性条件下还原糖与3.5一二水杨酸共热,3.5一二水杨酸被还原为棕红色的3氨基5硝基水杨酸,还原糖则是被氧化成糖酸及其他产物,在一定范围内(4001600ug)。生成还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系。利用分光光度计,在540nm波长下测定光密度值,查对标准曲线并计算,便可以求出样品中的所含的还原糖的含量。第一次第二次第三次平均值数据0.1730.1810.1790.177计算公式: 还原糖(%)=(查曲线所得葡萄糖毫克数*(提取液总体积/测定时取用体积)/样品毫克数)*100 =(0.177*(25/1)/510)*100 =0.55讨论:(1) 离心时间和恒温水浴加热必须达到,要不影响实验(2) 黄瓜研磨时的研磨充分(3) 取上清液是的竟可能别混合有混合液4.感谢:首先谢谢您,上课这六周以来,您用您幽默诙谐的话语,让我们的基础生物化学实验课变得生动有趣,本来乏味的实验也变得让人期待。 每堂课,您都会很认真的给我们讲解实验步骤,还有实验中要注意的事项,不时的提几个问题,
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