放射免疫分析

1、.1.2Ag + Ab AgAb + Ag + * Ag * AgAb + * Ag * Ag和和 Ab量恒定量恒定竞争结合竞争结合.3+68X100=75%X100=50%X100=25%X100=12.5%848281.4n* AgAb复合物的量取决于复合物的量取决于Ag的量的量nAg量越大，量越大， * AgAb量越少量越少nAg量越小，量越小， * AgAb量越大量越大n测量测量* AgAb量或测量多余量或测量多余* Ag量可推算出量可推算出Ag量量.5n恒量的恒量的* Ag、Ab加入反应管中加入反应管中n加入待测样品、或标准品（已知浓度）加入待测样品、或标准品（已知浓度）n37或或4

2、 温育温育n加入分离剂分离结合及游离部分加入分离剂分离结合及游离部分n测定以总放射性为分母，测定测定以总放射性为分母，测定* AgAb 为分为分子，计算结合子，计算结合%，以结合率为纵坐标，浓度，以结合率为纵坐标，浓度为坐标，制作标准曲线为坐标，制作标准曲线n待测样品的结合率从标准曲线上求出浓度待测样品的结合率从标准曲线上求出浓度.60 2 4 8 16 32 64 12880 70 60 50 40 30 20 10结结 合合%浓浓 度度.7n标准品标准品n标记抗原标记抗原n特异抗体特异抗体n分离剂分离剂分离结合与游离部分分离结合与游离部分.8n快速而完全分离快速而完全分离n操作简便、来源容

3、易、价格便宜操作简便、来源容易、价格便宜n不受血清、外界条件及其它试剂的干扰不受血清、外界条件及其它试剂的干扰n适用于任何容积的反应液适用于任何容积的反应液n非特异结合率小非特异结合率小.9n双抗体法双抗体法特点：特点： 分离完全，非特异结合小，环境影响小，效价分离完全，非特异结合小，环境影响小，效价高，但成本高高，但成本高n沉淀法沉淀法 聚乙二醇（聚乙二醇（w=6000）特点：特点： 快速，价廉，来源方便，受环境影响大快速，价廉，来源方便，受环境影响大.10n吸附法吸附法 吸附游离部分，适用于分离小分子吸附游离部分，适用于分离小分子游离抗原。活性炭、纤维素粉末游离抗原。活性炭、纤维素粉末特点

4、特点 快速、简便、准确性差快速、简便、准确性差n盐析法盐析法 饱和硫酸胺、硫酸钠饱和硫酸胺、硫酸钠n固相分离技术，按材料不同，可分为试管固相分离技术，按材料不同，可分为试管法、颗粒法、小盘法、纸片法法、颗粒法、小盘法、纸片法.11n灵敏度高灵敏度高n特异性强特异性强n精确度高精确度高n用血量少用血量少n体外测量体外测量.12n1 g=1000mgn1mg=1000gn1g=1000ngn1ng=1000pg.13.14n灵敏度灵敏度n结合特性结合特性n均一性均一性n稳定性稳定性n环境因素的不敏感性环境因素的不敏感性n临床应用临床应用n安全性安全性n应用性应用性.15n酶免疫分析酶免疫分析n发光免疫分析发光免疫分析化学发光免疫分析化学发光免疫分析酶放大化学发光免疫分析酶放大化学发光免疫分析电化学放光免疫分析电化学放光免疫分析n荧光免疫分析荧光免疫分析时间分辨荧光免疫分析或解离增强镧系荧光免疫分析时间分辨荧光免疫分析或解离增强镧系荧光免疫分析BCPDA强荧光螯合物的时间分辨荧光免疫分析强荧光螯合物的时间分辨荧光免疫分析