全血胆碱脂酶测定(精)_第1页
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文档简介

1、有机磷农药的简单回顾全血胆碱酯酶活性测定槪述三氯化铁比色法三氯化铁比色法有机磷农药organophosphorous pesticide生产使体内乙酰胆碱大量积聚，引发神经系统功能紊乱误服、自抑制体内胆碱酯酶（ChE）活性职业急性有机磷杀虫剂中毒诊断标准(GBZ-2002)*职业史右现场职业卫生调査*临床症状体征爼实验室检査全血胆碱酯酶( (ChE)活性全血ChE活性范围&急性轻度中毒50% 70%右 急性中度中毒30% 50%急性重度中毒30%以下实验目的巻加深对有机磷农药中毒机制的认识右掌握全血ChE活性测定的意义U辿掌握全血ChE活性测定原理、方法衣有机磷农药中毒的重要诊断指标&

2、amp;中毒者治疗后的效果观察指标巻接触有机磷农药人员健康状况的动态观察指标Asch-DTNB比色法(GBZ52)巻三氯化铁比色法 右漠麝香草酚蓝(B-T-B)比色法 衣纸片法 巻Biocheck法(便携式分析仪)原理乙酰胆碱胆碱酯酶胆碱 + 乙酸碱性径胺乙酰轻胺FeCl3轻酸铁(棕红色络合物)HC1器材右刺针巻一次性自控式微量吸管(20pl)占分光光度计*恒温水浴箱( (37C0 5 C )试剂右磷酸盐缓冲液( (PH=7.20)*碱性轻胺溶液占1 : 2盐酸溶液* 10%三氯化铁溶液右乙酰胆碱标准应用液(伽I含4pmol)分析步骤1.乙酰胆碱标准曲线的绘制2样品测定1乙酰胆碱标准曲线的绘制

3、(1)取六只具塞试管，配制乙酰胆碱标准色列管号123456乙酰胆碱标准应 用液(ml)00.20.40.60.81.0水( (ml)111111磷酸盐缓冲液(ml)10.80.60.40.20乙酰胆碱含量(pmol)00.81.62.43.24.0(2)各管加碱性轻胺4ml,立即振摇3min(3)各管加4：2盐酸溶液2ml,振摇1min(4)各管加10%三氯化铁溶液2ml,摇匀，过滤(5)测吸光度：A20nm,参比管第1管(6)绘制标准曲线2样品测定0.98ml磷缓20ul血0 98ml磷缓20ul血A管(样品管)B管(对照管)37C水浴5min379水浴30min碱性径胺4mh振3min1

4、: 2盐酸溶液2ml,摇lniin10%三氯化铁溶液2ml乙酰胆碱标准应用液lml碱性轻胺4mh振3min乙酰胆碱标准应用液lml摇匀、过滤、比色1.被水解的乙酰胆碱吸光度二对照管吸光度（B管）一样品管吸光度（A管）2.査标准曲线，得出被水解乙酰胆碱（pmol）一即0.02ml血经37 C, 30min反应条件下的 胆碱酯酶活性绝对值C3.胆碱酯酶活性相对值（）样品胆碱酯酚活性绝刘直inn_ x 1UU健康人碱酯酚活性绝对直浙江地区健康人胆碱酯酶活性绝对值男：3. 22土0. 336 pmol女：3. 19 0. 398 pmol注意事项巻采血前先准备好试管，加入磷缓&采血时严格消毒，用过的棉球、刺 针集中放置&准确控制水浴温度和放置时间&

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