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文档简介
遗传病的分析遗传病的分析3培育细胞的染色体制备培育细胞的染色体制备定定 义义n在细胞的生长周期中,中期染色体的长短、大小、恒定性正适宜我们对其进展分析、研讨。n因此利用人工的方法,使大部分分裂细胞处于中期而不向后期转化,并获得之,经处置,制片后察看分析。器器 材材n细胞株n普通光学显微镜n冰载玻片n酒精灯试试 剂剂n0.25%胰旦白酶液n0.075M KCLn秋水仙素n固定液冰醋酸/甲醇 1:3nGiemsa染液操操 作作1. 搜集细胞前6h,培育细胞中加5ug/ml秋水仙素2滴,混匀后继续培育2. 0.25%胰旦白酶液消化细胞,并搜集细胞于离心管中3. 离心1800转/min10min,弃上清,取沉淀4. 加0.075M KCL低渗液4ml,充分打匀细胞,室温静置20min5. 再参与固定液1ml,并与原有的低渗液充分混匀,室温静置5min6. 离心,弃上清,取沉淀操操 作作7. 加固定液5ml,悄然打匀,室温静置30min8. 离心,弃上清,取沉淀9. 加少量固定液,制成染色体悬液10. 取1-2滴染色体悬液,滴加在冰玻片上,迅速吹片,酒精灯下烤干玻片11. Giemsa染色5min,自来水冲洗,待干 后,显微镜下察看光镜100倍下人染色体G带照片注注 意意n浓度与时间 秋水仙素、低
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