紫外+液相维护

1、岛津UV日常维护及故障分析2008年9月18日 华威2 23 34 45 56 67 78 89 9UV日常维护v 注意环境；防潮防尘及强电磁干扰。注意环境；防潮防尘及强电磁干扰。v 硅胶的干燥及更换。硅胶的干燥及更换。v 仪器外壳及样品室的清洁。仪器外壳及样品室的清洁。v 比色皿的清洗。比色皿的清洗。1010UV常见故障分析v 加电不启动。加电不启动。 电源没接通，滤波器内保险丝熔断。电源没接通，滤波器内保险丝熔断。v 工作站与主机无法通讯联机。工作站与主机无法通讯联机。 RS232通讯电缆没插好，通讯端口配置错误。通讯电缆没插好，通讯端口配置错误。 计算机问题。计算机问题。v 基线噪音大。

2、基线噪音大。 比色皿问题，氘灯使用寿命到期。比色皿问题，氘灯使用寿命到期。v 扫描波长发生偏移。扫描波长发生偏移。 比色皿脏，光路原件老化，光路偏移。比色皿脏，光路原件老化，光路偏移。1111UV常见故障分析v 扫描曲线或吸光度值不正常扫描曲线或吸光度值不正常 样品浓度过高或过稀。样品浓度过高或过稀。v 氘灯或钨灯能量检查失败氘灯或钨灯能量检查失败 氘灯或钨灯点不亮，更换。氘灯或钨灯点不亮，更换。v 自检多个项目失败自检多个项目失败 样品室内有阻挡光路的异物。样品室内有阻挡光路的异物。1212UV光源的更换液相色谱常见问题与故障判断2008年9月18日 华威1414液相维护流程图液相维护流程图

3、吸滤头单向阀柱塞密封圈线路过滤器检测器色谱柱1515输液泵输液泵送液方式：v 恒流控制v 恒压控制VP系列：LC-10ADvp泵和LC-10ATvp泵Prominence：LC-20AD 、LC-20AT、 LC-20AB泵v D泵：并联微体积往复式泵v T泵：串联式往复泵v B泵：并联微体积往复式泵（2组）1616LC-20AD/20AT/20ABLC-20AD/20AT/20AB的的概要概要单向阀单向阀泵头泵头 (并联方式并联方式)排液阀排液阀压力信号压力信号LC-20AD泵头泵头 (串联方式串联方式)排液阀排液阀压力信号压力信号 单向阀单向阀LC-20AT泵泵B的泵头的泵头 (并联方式并

4、联方式)排液阀排液阀压力信号压力信号泵泵B单向阀单向阀泵泵A的泵头的泵头 (并联方式并联方式)泵泵A单向阀单向阀LC-20AB安置在泵内的低压梯度阀安置在泵内的低压梯度阀1717高压梯度泵系统高压梯度泵系统1818四元低压梯度泵系统四元低压梯度泵系统1919工作原理工作原理在线脱气机在线脱气机2020进样器进样器 2121SIL-20A/20AC概要概要SIL-20AC样品架样品架控制架控制架进样针驱动马达进样针驱动马达计量泵计量泵制冷部件制冷部件进样口进样口2222 装填状态装填状态样品注入样品注入六通阀六通阀2323CTO-20A/20ACCTO-20A/20AC的的概要概要CTO-20A

5、CCMD混合室混合室阀阀进样器进样器柱柱Max. 300 mm长长CMD (柱管理系统柱管理系统)2424SPD-20A/20AV/M20ASPD-20A/20AV/M20A的的概要概要紫外紫外- -可见检测器可见检测器SPD-20ASPD-M20A温控池温控池2525 液相色谱常见问题及其对策v 液相色谱常见问题类型液相色谱常见问题类型v A. 压力异常（偏高、波动）压力异常（偏高、波动）v B. 漏液漏液 v C. 保留时间漂移保留时间漂移v D. 基线问题（漂移、噪声）基线问题（漂移、噪声） v E. 峰形异常峰形异常2626现象：无压力，流动相不流动现象：无压力，流动相不流动可能原因可

6、能原因 1、保险丝断或电源问题、保险丝断或电源问题 2、柱塞杆折断、柱塞杆折断 3、泵头内有空气或流动相不足、泵头内有空气或流动相不足 4、单向阀损坏、单向阀损坏 5、漏液、漏液 6、压力传感器损坏、压力传感器损坏(流动相流动正常，但无压力流动相流动正常，但无压力)液相色谱常见问题及其对策压力异常压力异常2727现象：压力持续偏高或不断上升现象：压力持续偏高或不断上升 1、流速设定过高、流速设定过高 2、保护柱或柱子筛板堵塞、保护柱或柱子筛板堵塞 3、流动相使用不当或有缓冲盐析出、流动相使用不当或有缓冲盐析出 4、色谱柱选择不当、色谱柱选择不当 5、进样阀损坏、进样阀损坏 6、线路过滤器堵塞、

7、线路过滤器堵塞液相色谱常见问题及其对策压力异常压力异常2828现象：压力持续偏低现象：压力持续偏低 1、流速设定过低、流速设定过低 2、色谱柱选择不当、色谱柱选择不当 3、柱温过高、柱温过高 4、系统漏液、系统漏液液相色谱常见问题及其对策压力异常压力异常2929现象：压力波动现象：压力波动可能原因可能原因 1、泵头中有气泡、泵头中有气泡 2、单向阀损坏、单向阀损坏 3、柱塞密封圈损坏、柱塞密封圈损坏 4、脱气不充分、脱气不充分 5、系统漏液、系统漏液 6、使用了梯度洗脱、使用了梯度洗脱液相色谱常见问题及其对策压力异常压力异常3030接头处漏液接头处漏液 1、接头处松动、接头处松动 2、接头磨损

8、、接头磨损 3、接头被污染、接头被污染 4、部件不匹配、部件不匹配 液相色谱常见问题及其对策漏液漏液3131泵漏液泵漏液 1、单向阀松动、单向阀松动 2、泵密封损坏、泵密封损坏 3、放空阀损坏、放空阀损坏 4、接头松动（不要拧的太紧）、接头松动（不要拧的太紧）液相色谱常见问题及其对策漏液漏液3232进样阀漏液进样阀漏液 可能原因可能原因 1、转子密封损坏、转子密封损坏 2、定量环堵塞、定量环堵塞 3、进样口密封松动、进样口密封松动 4、进样针尺寸不合适、进样针尺寸不合适 5、废液管产生虹吸、废液管产生虹吸 6、废液管堵塞、废液管堵塞液相色谱常见问题及其对策漏液漏液3333检测器漏液检测器漏液

9、可能原因可能原因 1、流通池垫片损坏、流通池垫片损坏 2、流通池透镜破碎、流通池透镜破碎 3、手紧接头处漏液、手紧接头处漏液 4、废液管堵塞、废液管堵塞 5、流通池堵塞、流通池堵塞液相色谱常见问题及其对策漏液漏液3434保留时间漂移 可能原因可能原因 1、柱温变化、柱温变化 2、流动相组分变化、流动相组分变化 3、色谱柱没有平衡、色谱柱没有平衡 4、流速变化、流速变化 5、泵中有气泡、泵中有气泡 6、流动相选择不当、流动相选择不当 7、键合相流失、键合相流失 8、缓冲容量不够、缓冲容量不够液相色谱常见问题及其对策保留时间漂移保留时间漂移3535基线漂移 可能原因可能原因 1、温度波动、温度波动

10、 2、流动相不均匀、流动相不均匀(脱气，使用纯度更高的溶剂脱气，使用纯度更高的溶剂) 3、流通池被污染或有气泡、流通池被污染或有气泡 4、流通池窗口破裂、流通池窗口破裂 5、流动相配比不当或流速变化、流动相配比不当或流速变化 6、柱子平衡（约、柱子平衡（约3060min）液相色谱常见问题及其对策基线问题基线问题3636基线漂移 可能原因可能原因 7、流动相污染，变质或由低品质溶剂配、流动相污染，变质或由低品质溶剂配成成 8、样品中有强保留的物质以馒头样峰被、样品中有强保留的物质以馒头样峰被洗出洗出 9、检测器没有设定在最大吸收波长处、检测器没有设定在最大吸收波长处液相色谱常见问题及其对策基线问

11、题基线问题3737基线噪声（规则的） 可能原因可能原因 1、流动相、泵、检测器中有气泡、流动相、泵、检测器中有气泡 2、有地方漏液、有地方漏液 3、流动相混和不均匀、流动相混和不均匀 4、温度影响（检测器和柱温差别太大）、温度影响（检测器和柱温差别太大） 5、其他电子设备的影响、其他电子设备的影响 液相色谱常见问题及其对策基线问题基线问题3838基线噪声（不规则的） 可能原因可能原因 1、流动相污染、变质或由低质溶剂配成、流动相污染、变质或由低质溶剂配成 2、有地方漏液、有地方漏液 3、流动相各溶剂不相溶或混和不均匀、流动相各溶剂不相溶或混和不均匀 4、流通池污染、流通池污染 5、检测池能量不

12、足、检测池能量不足 6、系统内有气泡、系统内有气泡液相色谱常见问题及其对策基线问题基线问题3939前沿峰、拖尾峰 可能原因可能原因 1、柱塞板堵塞、柱塞板堵塞 2、色谱柱塌陷、色谱柱塌陷 3、柱外效应、柱外效应 4、干扰峰、干扰峰 5、缓冲不足或不合适、缓冲不足或不合适 6、化学或次级保留（硅羟基效应）、化学或次级保留（硅羟基效应）液相色谱常见问题及其对策峰形异常峰形异常4040前沿峰、拖尾峰 可能原因可能原因 7、重金属污染、重金属污染 8、样品溶剂选择不当、样品溶剂选择不当 9、样品过载、样品过载 10、柱温过低、柱温过低液相色谱常见问题及其对策峰形异常峰形异常4141分叉峰 可能原因可能

13、原因 1、保护柱或分析柱污染、保护柱或分析柱污染 2、样品溶剂不溶于流动相、样品溶剂不溶于流动相液相色谱常见问题及其对策峰形异常峰形异常4242峰展峰展宽宽1.进样体积过大进样体积过大2. 流动相粘度过高流动相粘度过高3. 检测池体积过大检测池体积过大4. 保留时间过长保留时间过长5. 柱外体积过大柱外体积过大6. 样品过载样品过载液相色谱常见问题及其对策峰形异常峰形异常4343峰变形 可能原因可能原因 1、样品过载、样品过载 2、样品溶剂选择不当、样品溶剂选择不当液相色谱常见问题及其对策峰形异常峰形异常4444鬼峰1、进样阀残余峰、进样阀残余峰2、样品中未知物、样品中未知物3、柱未平衡、柱未

14、平衡4、水污染、水污染5、三氟乙酸氧化、三氟乙酸氧化液相色谱常见问题及其对策峰形异常峰形异常4545材料：不锈钢烧结，孔径10um故障：堵塞表现：管路中不断有气泡生成措施：用520的稀硝酸，超声波清洗， 再用蒸馏水清洗注意点：吸滤头拆下时不必将塑料管剪断吸滤头吸滤头液相色谱容易出问题的部件4646LC-10ATvp泵：串联 式往复泵LC-10ADvp泵：并联式 往复泵液相色谱容易出问题的部件4747液相色谱容易出问题的部件单向阀结构单向阀结构抛光面透明塑料垫片宝石球吸液冲程排液冲程出口单向阀进口单向阀泵头流动相单向阀原理单向阀原理吸液冲程排液冲程出口单向阀进口单向阀泵头4848液相色谱容易出问

15、题的部件故障故障1：宝石球粘附于垫片：宝石球粘附于垫片表现：泵无法吸液或排液，流路不通表现：泵无法吸液或排液，流路不通措施：措施：1）用针筒抽出口单向阀以产生负压，）用针筒抽出口单向阀以产生负压， 使宝石球与垫片分开使宝石球与垫片分开 2）拆下单向阀，放入异丙醇或水中，）拆下单向阀，放入异丙醇或水中， 用超声波清洗用超声波清洗单向阀单向阀4949液相色谱容易出问题的部件故障故障2：宝石球或塑料垫片受污导致密封不好：宝石球或塑料垫片受污导致密封不好表现：系统压力波动大表现：系统压力波动大措施：拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用超措施：拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用超 声波清洗声波清洗单向阀单向阀

16、5050故障：密封圈磨损而导致故障：密封圈磨损而导致 密封不良密封不良现象：系统压力波动大或现象：系统压力波动大或 漏夜措施：更换密封圈漏夜措施：更换密封圈注意点：注意点： 更换密封圈更换密封圈 拆卸泵头前，柱塞杆拆卸泵头前，柱塞杆 复位复位 （PSET）柱塞密封圈柱塞密封圈流动相泵头清洗管路柱塞杆密封圈液相色谱容易出问题的部件5151故障：堵塞故障：堵塞现象：系统压力波动大或压现象：系统压力波动大或压 力偏高力偏高措施：措施：5稀硝酸，超声波清稀硝酸，超声波清 洗洗判断依据：关闭排液阀，断开出判断依据：关闭排液阀，断开出口管路，设定流速口管路，设定流速1mL/min，如压力如压力3kgf/c

17、m2，则可能堵则可能堵塞。塞。线路过滤器线路过滤器排液阀压力传感器线路过滤器流动相液相色谱容易出问题的部件5252手动进样阀手动进样阀 故障：转子密封损坏故障：转子密封损坏 现象：漏液现象：漏液 原因：原因：a 拧的太紧拧的太紧 b 样品太脏样品太脏 c 针头损坏或不使用液相专用针针头损坏或不使用液相专用针 解决措施：更换转子密封，并在使用解决措施：更换转子密封，并在使用 时注意保养时注意保养液相色谱容易出问题的部件5353液相色谱容易出问题的部件手动进样阀手动进样阀 故障：载样困难故障：载样困难 原因：原因：a 定量环堵塞定量环堵塞 b 进样器污染进样器污染 解决措施：清洗或更换定量环、进样

18、器解决措施：清洗或更换定量环、进样器5454柱子柱子 故障故障：系统高压、峰型变差（拖尾峰、前沿峰、分叉系统高压、峰型变差（拖尾峰、前沿峰、分叉峰），保留时间的改变峰），保留时间的改变 解决措施：清洗解决措施：清洗 正相柱，正庚烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇正相柱，正庚烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇 反相柱，甲醇、乙腈、氯仿、异丙醇、反相柱，甲醇、乙腈、氯仿、异丙醇、0.05M稀硫酸稀硫酸液相色谱容易出问题的部件5555液相色谱容易出问题的部件峰产生有肩或分叉的原因峰产生有肩或分叉的原因1. 柱子劣化 （进口处产生不均匀的空隙）2. 样品劣化 （生成氧化物、分解物等）判断标准判断标准 所有的峰

19、都产生有肩峰或分叉时则为柱子劣化所有的峰都产生有肩峰或分叉时则为柱子劣化5656延长柱寿命方法： 倒冲柱 换过滤片 修补柱头 液相色谱容易出问题的部件5757液相色谱容易出问题的部件柱的补修柱的补修5858恢复例恢复例液相色谱容易出问题的部件5959分 析 柱 的 维 护1、在使用新柱之前，最好用强溶剂在低流量下 (0.2-0.3 ml/min)冲洗 30 mins，长时间未用的分析柱也要同样 处理2、定期使用强溶剂冲洗柱子3、使用缓冲盐时，要先用水冲洗，再用有机溶剂冲洗4、净化样品5、分离条件6、不使用时，要盖上盖子，避免固定相干枯7、使用预柱8、避免流动相组成及极性的剧烈变化9、避免压力脉

20、冲的剧烈变化液相色谱容易出问题的部件6060更换氘灯更换氘灯（紫外检测器） 判断氘灯能量： 设定220nm波长，检查参比池能量，如 能量低于800，需更换氘灯。 操作注意点： 不要用手直接接触氘灯表面液相色谱容易出问题的部件6161液相色谱容易出问题的部件故障：样品池受污故障：样品池受污表现：样品池和参比池能量相差较大表现：样品池和参比池能量相差较大检查方法：设定检查方法：设定250nm250nm波长，通甲醇或水，查看波长，通甲醇或水，查看SMPL ENSMPL EN和和 REF ENREF EN，如两者相差较大，则样品池受污。如两者相差较大，则样品池受污。措施：用针筒注入异丙醇，清洗样品池；

21、如污染严重，措施：用针筒注入异丙醇，清洗样品池；如污染严重， 拆开样品池，拆开样品池，将透镜等放入异丙醇中超声波清洗。将透镜等放入异丙醇中超声波清洗。紫外检测器紫外检测器6262其他问题溶剂的过滤 滤膜类型：滤膜类型： 聚四氟乙烯滤膜聚四氟乙烯滤膜： 适用于所有溶剂，酸和盐。适用于所有溶剂，酸和盐。 醋酸纤维滤膜：醋酸纤维滤膜： 不适用于有机溶剂，特别适用于水基溶剂。不适用于有机溶剂，特别适用于水基溶剂。 尼龙尼龙66滤膜：滤膜： 适用于绝大多数有机溶剂和水溶液，可以用于强酸，不适适用于绝大多数有机溶剂和水溶液，可以用于强酸，不适 用于二甲基甲酰胺。用于二甲基甲酰胺。 再生纤维素滤膜：再生纤维

22、素滤膜： 蛋白吸收低，同样适用于水溶性样品和有机溶剂蛋白吸收低，同样适用于水溶性样品和有机溶剂6363脱气：脱气： 除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡 气泡对测定的影响：气泡对测定的影响： 1 1）泵中气泡使液流波动，改变保留时间和峰面积）泵中气泡使液流波动，改变保留时间和峰面积 2 2）柱中气泡使流动相绕流，峰变形）柱中气泡使流动相绕流，峰变形 3 3）检测器中的气泡产生基线波动）检测器中的气泡产生基线波动其他问题6464脱气的目的脱气的目的 1. 防止由气泡的产生引起的故障防止由气泡的产生引起的故障 2. 防止由溶解（在液体中的）气体量防止由溶解（在液体中的）气体量 的变动引起的检测不稳定程度的变动引起的检测不稳定程度 1）示差折射率检测器）示差折射率检测器 *使折射率变化使折射率变化 2）UV检测器（检测器（200nm以下）以下） *溶解氧气有吸收溶解氧气有吸收 3）荧光检测器）荧光检测器 *溶解氧气有消光作用溶解氧气有消光作用其他问题6565其他问题脱气的方法1. 超声波脱气法2. He清除法3. 使用氟树脂膜的减压脱气法6666其他问题He清除法清除法调压阀调压阀排气阀排气阀往送液泵往送液泵流动相流动相过滤器过滤器6767其他问题氟树脂膜氟树脂膜真