霉菌、放线菌形态观察及微生物

1、实验三实验三 霉菌、放线菌形态观霉菌、放线菌形态观察及微生物菌落观察察及微生物菌落观察 2006.03.13一、实验目的一、实验目的了解放线菌、霉菌、酵母菌和大型真菌的特点并观察其形态特征学习掌握霉菌染色的基本方法二、实验原理二、实验原理原核微生物原核微生物放线菌：放线菌： 由不同长短的纤细的菌丝所形成的单细由不同长短的纤细的菌丝所形成的单细胞菌丝体。菌丝体分为两部分，即潜入胞菌丝体。菌丝体分为两部分，即潜入培养基中的营养菌丝（或称基内菌丝）培养基中的营养菌丝（或称基内菌丝）和生长在培养基表面的气生菌丝。有些和生长在培养基表面的气生菌丝。有些气生菌丝分化成孢子丝，呈螺旋形、波气生菌丝分化成孢子

2、丝，呈螺旋形、波浪形或分枝状等。孢子常呈圆形、椭圆浪形或分枝状等。孢子常呈圆形、椭圆形或杆状。气生菌丝及孢子的形状和颜形或杆状。气生菌丝及孢子的形状和颜色常作为分类的重要依据。色常作为分类的重要依据。真核微生物真核微生物酵母菌：酵母菌：酵母菌细胞一般呈卵圆形、圆形、圆柱形或柠檬形。酵母细胞核与细胞质有明显的分化，个体直径比细菌大几倍到十几倍。繁殖方式也较复杂，无性繁殖主要是出芽生殖，有些酵母能形成假菌丝。有性繁殖是通过接合形成子囊及子囊孢子。 霉菌：霉菌：凡在营养基质上形成绒毛状、棉絮状或蜘蛛网形丝状菌体的真菌，统称为霉菌。霉菌包括分类学上许多不同纲或类的真菌，它们分别属于藻状菌纲、子囊菌纲、

3、担子菌纲和半知菌类。常见大型真菌：常见大型真菌：在分类上属于子囊菌纲和担子菌纲， 均为丝状真菌。 三、实验材料三、实验材料放线菌和真菌培养物放线菌和真菌培养物1. 放线菌培养物：青色链霉菌四天插片培养物。放线菌培养物：青色链霉菌四天插片培养物。2. 啤酒酵母啤酒酵母24至至28h液体培养物。液体培养物。3. 黑曲霉和根霉黑曲霉和根霉4d搭片培养物。搭片培养物。4. 各种真菌示范片。各种真菌示范片。5. 市售平菇市售平菇显微镜、载玻片、接种环、解剖针、解剖刀、显微镜、载玻片、接种环、解剖针、解剖刀、酒精灯、镊子等。酒精灯、镊子等。乳酸石炭酸棉兰染液、碘液、酒精、蒸馏水乳酸石炭酸棉兰染液、碘液、酒

4、精、蒸馏水等等搭片和插片培养插片法培养放线菌搭片法培养霉菌四、实验步骤四、实验步骤观察放线菌气生菌丝和基内菌丝的区别取插片一片，直接在显微镜下进行观察，注意分界面两侧菌丝形态的差异观察酵母菌形态和无性繁殖：用高倍镜观察啤酒酵母的形态和出芽繁殖。酵母肝糖染色法：在洁净的载玻片上滴一小滴路哥氏碘液（Lugol），取一环酵母菌液与碘液混匀，盖上盖玻片，镜检，菌体呈淡黄色，肝糖粒呈红褐色。在高倍镜下观察菌体形态、出芽、芽簇、肝糖粒，并绘图。 观察黑根霉菌丝情况和子囊孢子情况（着重辨认孢子囊、包囊梗、假根）：观察黑曲霉菌丝分隔情况和分生孢子着生情况（着重辨认分生孢子梗、足细胞和分生孢子）：观察青霉菌丝和分生孢子着生情况： 1.单轮生青霉群；单轮生青霉群；2.对称二轮对称二轮生青霉群；生青霉群；3.多轮生青霉群；多轮生青霉群；4.不对称生青霉群不对称生青霉群 担子菌担孢子的观察切片标本的制作：现场演示切片标本的制作：现场演示下次实验准备下次实验准备实验室环境中微生物的检查用棉签取实验室环境条件下的微生物进行涂板。人体表面微生物的检查用棉签取人体表面的微生物进行涂板。每组两个平板，分别是马铃薯培养基（培养真菌），另一个高氏培养基（培养放线菌）五、实验结果记录所观察到的放线菌基内菌丝和气生菌丝的差别绘图表示黑曲霉、根霉、青霉、酵母和担孢子的形态特征六、问题与讨论1.为何要用乳酸石炭酸棉