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1、专题2 细胞工程(3)意义:(一)植物细胞工程杭新(w*A横粉如胪.R1 .理论基础(原理):全能性表达的难易程度:2 .植物组织培养技术(1)过程:离体的植物器官、组织或细胞一-愈伤组织一-试管苗一-植物体(2)用途:。(3)地位:是培育、培育植物新品种的最后一道工序。3 .植物体细胞杂交技术(1)过程:辨就(二)动物细胞工程1.动物细胞培养(1)概念:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的 ,将它分散成 , 然后放在适宜的 中,让这些细胞 。(2)动物细胞培养的流程:取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织 )一剪碎一用处理分散成 _制成_转入培养瓶中进行 培养一贴满瓶壁的细胞重新用胰
2、蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续 培养。(3)细胞贴壁和接触抑制:悬液中分散的细胞很快就 ,称为。细胞数目不 断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面 时,细胞就会,这种 现象称为。(4)动物细胞培养需要满足以下条件:培养液应进行 处理。通常还要在培养液中添加一 定量的,以防培养过程中的污染。此外,应定期更换培养液,防止。:合成培养基成分:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入_等天然成分。:适宜温度:哺乳动物多是 ; pH: 。: 95%+ 5%。 O是所必需的,CO的主要作用(2)诱导融合的方法:物理法包括 等。化学法一般是用 (5)动物细胞培养技术的应用: 作为诱导剂。2
3、.动物体细胞核移植技术和克隆动物(1)哺乳动物核移植可以分为 核移植(比较容易)和 核移植(比较难)。(2)选用去核卵(母)细胞的原因:卵(母)细胞卵(母)细胞。的重要手段。(4)动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较:(3)体细胞核移植的大致过程是:(下图)逸拜 限体母牛 受体缚牛4,*闽朝友情处理-* -*1如饿持既康的公牛一国科l题橙姿.增舞f 胚胎移位狂蜷地35I分便(福造再烟的密牛】比较项目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用法植物体细胞杂交细胞膜的流动性去除细胞壁后诱导原生质体融合离心、电刺激、振动,聚乙二醇等试剂诱导克服了远缘杂交的小亲和性,获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性使
4、细胞分散后诱导细胞融合除应用植物细胞杂交手段外,再加灭活的病毒诱导制备单克隆抗体的技术之一4.单克隆抗体(1)抗体:一个 B淋巴细胞只分泌一种 。从血清中分离出的抗体 (4)体细胞核移植技术的应用:(2)单克隆抗体的制备过程:克隆动物存在着 问题、表现出 缺陷等。融合的方法类似,常用的诱导因素有 等。(5)体细胞核移植技术存在的问题:3.动物细胞融合(1)动物细胞融合也称 ,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。合后形成的具有原来 细胞遗传信息的单核细胞,称为 (2)动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同,诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体(3)动物细胞融合的意义:克服了,成为
5、研究(3)杂交瘤细胞的特点:既能大量 ,又能产生 。(4)单克隆抗体的优点: 。(5)单克隆抗体的作用::准确识别各种 物质的细微差异,并跟 发生特 异性结合,具有 的优点。:主要用于治疗 ,可制成,也有少量用于 治疗其它疾病。受精卵 生殖细胞干细胞体细胞;植物细胞动物细胞2 . (2)微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产 (3)转基因植物、植物体细胞亲jT3 .离心、振动、电刺聚乙二醇(PEG克服了远缘杂交不亲和的障碍。(二)动物细胞工程1. W单个细胞培养基生长和繁殖。(2 丁11蛋白酶或胶原蛋白酶一单个印而15而悬液原代 传代(3)贴附在瓶壁上细胞贴壁相互抑
6、制停止分裂增殖细胞的接触抑制(4)无菌、无毒的环境11c1抗生素代谢产物积累对细胞自身造成危害营养:血清、血浆温度:36.5 C+ 0.5 C ; pH : 7.2 7.4。石森环境:空气 CO 2。细胞代谢维持培养液的pH(5)制备病毒疫苗、制Ql克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞。2. (1)胚胎细胞体细胞比较大,容易操作细胞质多,营养丰富(4)加速家畜遗传改良进程,促进良畜群繁育;保护濒危物种,增大存活数量;生产珍贵的医用蛋白;作为异种移植的供体;用于组织器官的移植等。(5)遗传和生理3. (1)细胞杂交 两个或多个 杂交细胞(2)聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激(3)远缘杂交的不亲和性细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育4.(1)特异性抗体产量低、纯度低、特异性差(3) X
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