生物化学实验理论考试题答案

1、生物化学实验理论考试题答案1. 醋酸纤维薄膜电泳时点样端应靠近电极的哪一端，为什么？答；电泳时点样端应靠近负极，因为血清中各种蛋白质在PH为8.6的环境中均带负电，根据同性相吸，异性相斥原理，点样端在负极时蛋白质向正极泳动从而实现蛋白质分离。2. 用分光光度计测定物质含量时，设置空白对照管的作用,为什么？答；空白对照是为了排除溶剂对吸光度的影响。溶液的吸光度表示物质对光的吸收程度，但是作为溶剂也能吸收，反射和透射一部分的光，因此必须以相同的溶剂设置对照，排除溶剂对吸光度的影响。3. 简述血清蛋白的醋酸纤维薄膜的电泳原理？答；血清蛋白中各种蛋白质离子在电场力的作用下向着与自身电荷相反的方向涌动，

2、而各种蛋白质等电点不同，且在PH为8.6时所带电荷不同，分子大小不等，形状各有差异，所以在同一电泳下永动速度不同从而实现分离。4. 何谓Rf值？影响Rf值的因素？答;Rf是原点到层析中心的距离与原点到溶剂前沿的距离之比。Rf的大小与物质的结构，性质，溶剂系统，层析滤纸的质量和层析温度有关，对同一种物质来讲Rf是一个常量。5. 什么是盐析？盐析会引起蛋白质的变性吗？一般用什么试剂? 答;盐析是指当溶液中的中性盐持续增加时，蛋白质的溶解度下降，当中性盐的浓度达到一定程度的时候，蛋白质从溶液中析出的现象。盐析不会引起蛋白质的变性，因为蛋白质的结构并未发生改变，去掉引起盐析的因素蛋白质仍能溶解；一般用

3、饱和硫酸铵溶液进行盐析6. 简述DNS法测定还原糖浓度的实验原理？ 答;还原糖与DNS在碱性条件下加热被氧化成糖酸，而DNS被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内还原糖的量与3-氨基-5硝基水杨酸颜色的深浅成正比，用分光光度计 测出溶液的吸光度，通过查对标准曲线可计算出3-氨基-5硝基水杨酸的浓度，从而得出还原糖的浓度。7. 影响蛋白质沉淀的因素是什么？沉淀和变性有什么联系？答;水溶液中的蛋白质分子由于表面形成水化层和双电层从而形成稳定的亲水胶体颗粒，在一定的理化因素影响下蛋白质颗粒因失去电荷和脱水而沉淀。这些因素包括溶液的酸碱度、盐溶液的浓度、温度、重金属离子以及有机溶剂等。

4、变性蛋白质不一定沉淀，沉淀的蛋白质不一定变性。沉淀时蛋白质可能仍然保持天然构像，而变性是蛋白质的高级结构被破坏失去活性。8. 简述薄层层析法分离糖类的原理/? 答;薄层层析的实质就是吸附层析，也就是在铺有吸附剂的薄层上，经过反复地被吸附剂吸附以及被扩展剂扩展的过程。而吸附剂对不同的物质的吸附力不同，从而使糖在薄层上的涌动速度不同达到分离的目的9. 等电点的定义？蛋白质在等电点时有哪些特点？答;当溶液的PH为一定数值时，其中的蛋白质正负电荷相等，即净电荷为零，此时的PH值就是该蛋白质等电点。蛋白质在等电点时的溶解度最小。10. 蛋白质显色黄色反应的原理是什么?反应结果为什么深浅不一？答;含有苯环

5、的氨基酸如酪氨酸和色氨酸，能被硝酸硝化成黄色的物质，而且不同蛋白质中所含的苯环数量不同，造成与试剂反应的程度不同，因此呈现颜色深浅不一 。11. RNA水解后的三大组分是什么？怎样各自验证的？答;核糖，磷酸，嘌呤碱。核糖+苔黒酚Fe（浓HCI）绿色物质；磷酸+钼酸铵蓝色；嘌呤碱+硝酸银白色12. 等电点时为什么蛋白质溶解度最低？答;蛋白质形成胶体二等条件是带电荷，从而在外表面形成水化膜，导致各胶体颗粒不结合，当PH等于PI时，静电荷为零，蛋白质分子之间不存在排斥，则聚集沉淀，所以在等电点时溶解度最小。13. 鸡蛋清可以用作铅汞中毒的解毒剂是为什么? 答;由于重金属离子能与蛋白质中带负电基团如C

6、OOH等作用，生成难溶重金属的蛋白质盐，减少机体对重金属的吸收。14. 血清醋酸纤维薄膜电泳可将血清蛋白依次分为哪几条带？哪带电泳最快？影响电泳速度有哪些？答;有血清蛋白、a1-球蛋白、a2-球蛋白、b-球蛋白、r-球蛋白；其中血清蛋白点用最快。影响因素蛋白质所带电荷数，分子大小与形状以及缓冲液浓度。15. 什么是抑制剂？什么是变性剂？区别是什么？答;凡是能使酶活性降低而不使酶失活变性的物质成为抑制剂；凡是能引起蛋白质变性失活的物质叫变性剂。抑制剂只是抑制蛋白质的特性而变性剂则破环蛋白质的结构。16 简述橘皮中提取果胶原理？答；果胶不溶于乙醇的原来将其沉淀得到果胶。17 离心管如何在天平上平衡？操作离心时应注意什么?答;把放在小烧杯中的离心管（包括盖子）和管套放在平衡的天平上，用胶头滴管取离心液调平。注