浅议HE染色方法在临床病理诊断中作用

1、浅议he染色方法在临床病理诊断中作用【摘要】目的：观察he染色技术在临床病理诊断 中的价值。方法：选择本院2012年1-12月各个科室送检的 968例石蜡病理切片作为研究对象，进行快速的组织病理染 色，其中的510例细胞学染色的切片，经过仪器的检测、分 析病理he染色在临床病理诊断中准确率。结果：其中石蜡 切片、快速冰冻切片、脱落细胞学等在he染色的质量均受 到一定因素的影响，通过技术的逐步改进，可以提高he染 色的质量，从而提高临床病理的诊断率。结论：he染色方法 是临床病理诊断中一种经济适用、检测结果可靠的方法，采 用不同的方式，提高了切片的质量及病理诊断的准确率，为 临床上提供了准确度较

2、高的病理资料，具有重要的临床应用 价值。【关键词】he染色；病理诊断；石蜡切片；冰冻切 片中图分类号r36文献标识码b文章编号1674-6805 (2013) 29-0147-02目前，病理诊断室现代医学界中的一种最为具有权威性 的临床病理诊断方法，其诊断结果的准确性，不仅仅只取决 于病理医生的技术水平，而且还与组织病理片的处理和染色 效果密切相关1。随着人们法律意识和自我保护意识的不 断提升，病理诊断的风险也有逐年上升的趋势，在现实社会 中，病理技术由于种种原因往往得不到足够的重视，为了提 高临床病理诊断的准确性，一方面病理医生必须加强检测的 责任心，提高诊断水平，另一方面更应该提供优质的组

3、织病 理切片，以保证诊断的准确性2。病理工作目前普遍存在 标本固定时间欠缺、组织脱水进行的不彻底、试剂使用过程 中浓度变化，影响了切片的质量，无法提高病理的诊断正确 率。因此，本院选择自2012年1-12月的968例石蜡切片、 快速冰冻、510例脱落细胞学检查，整理收集检测过程中出 现的问题，改进不足，调整病理组织的选材、固定、脱水、 切片、he染色等，以达到较高的诊断准确率，现将改进效果 报道如下。1资料与方法1. 1 一般材料选择本院2012年1-12月各个科室送检的968例石蜡病 理切片作为研究对象，其中活检组织349例、子宫内膜300 例、脂肪组织187例，骨组织98例、快速冰冻80例

4、观察， 510例进行细胞学制片结果进行对照、观察。所有的病理切 片在环境温度适宜以及试剂浓度相对标准的情况下进行he 染色，均可以获得较为满意的效果。1. 2方法1.2. 1采用he染色，即为苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin stainiing),是石蜡切片技术中最为 常用的染色方法。其中苏木精是一种自然的染料3,但是 本身没有染色的能力，鼻血经过化学氧化后变成苏木红，可 以作为染料。苏木精对细胞核亲和力较弱，在助染剂的协同 下达到染色的效果，在碱性环境中，苏木红显色呈蓝色；伊 红属于酸性染料范围，主要可以使细胞质及细胞外基质中的 成为着色显示为红色。一般的病理切片组织变

5、化及组织的产 物均可以通过he染色法显示，在质量好的he染色板中，组 织或者细胞的一般形态均可以通过显微镜观察出。1.2.2染色方法病理科室在选择材料进行病理切片制 作中，应该该局不同组织采用不同的固定、脱水时间、不同 的制片染色方式。手术室中切除的全部或者部分器官或者采 用大块的组织切除标本，各种各样细胞学的标本，特出检查 的体液或者血液标本，病理科室医生取材过程中要做到准 确、迅速、完整以及具有代表性。he染色操作的流程主要包 括：细胞涂片均潮干后固定在浓度为95%的乙醇中4浸泡 15 min,显微镜观察后，在之前固定的切片中选定进行免疫 染色的区域，在区域的背面载玻片中用签字笔进行标记，

6、标 记号需要进行染色的抗体。后将细胞涂片按照顺序经过二甲 苯、梯度的乙醇溶液和水，将涂片上的盖玻片及树胶洗脱完 全；后加入0.5%盐酸-乙醇中将苏木红的颜色进行清洗，后 采用水进行冲洗，加入稀释后的氨水将伊红的颜色脱掉；将载玻片单独拿出后浸泡于水中，多次进行洗涤，釆用树胶或 者dpx以盖片封片，帖标签；根据镜下观察到的细胞形式进 行适当的调整，染色各个步骤所需要的时间，会受到温度、 切片厚度等的影响；各种染料试剂一般均以化学纯为主。染 色完毕后采用显微镜检查染色的结果，核对标本的种类、号 码以及数量，保证切片的质量。2结果病理科室通过将大小标本进行分开固定、脱水、染色等, 苏木精将细胞核染成鲜

7、明的蓝色，骨组织呈现深蓝色，骨组 织中的黏液质呈灰蓝色。呈现的结果表明，各种组织切片在 显微镜下观察，he染色结果基本达到病理所规定的标准，结 果见表lo3讨论资料中表明，病理科室对于组织细胞的取材、脱水、切 片的质量对于he染色的结果具有较大的影响，组织切片染色的质量直接影响着病理切片的诊断结果，对于诊断不明确 的结果也会延伸到临床中对疾病的治疗5,因此，不同的标本要有不同的取材方式，包括了取材标本的范本的取材方法。he染色过程中关系染色成败的最关键的因素取决于对细胞核的着色，由物理及化学共同的作用进行这项工作，一 方面主要是因为组织内部有许多微小的细孔，染料渗透后与 组织进行牢固的结合，组

8、织吸收染料后逐渐扩散、溶解，进 而牢牢的固定6-7；另一方面在于组织细胞内部含有酸性 及碱性的物质，含有的酸性物质可以与染液中的部分阳离子 进行结合，生成固定的分子，含有碱性物质的与染液中的阴 离子结合，共同起到牢固性的作用。固定的主要目的在于使组织及细胞保持与活体时相似 的成分以及形态，防止制片过程中组织的自溶，组织原有的 构造消失或者被破坏而影响了诊断的结果。固定后应该及时 的送检，防止组织固定时间过长后导致变脆、变硬而影响了 切片的效果8,影响诊断结果，导致错误的治疗。he染色 过程中应该注意采用的试剂的浓度变化，控制适当的温度及 湿度，保证切片的质量，提高诊断结果的准确率9。综上所述，

9、通过不断提高的he染色技术，采用不同的 固定、脱水、切片，提高了切片的质量，显著性的提高了病 理诊断的准确率，由于结果的准确，也大大提高了临床上对 针对性疾病的治愈率，为临床上提供了准确率更高的病理资 料。因此，he染色技术是病理诊断、临床治疗过程中不可或 缺的重要检测手段，通过诊断结果的准确性，为临床的治疗 提供参考依据，具有明显的临床价值。参考文献1陈宣世，刘俊才，李霞斌，等.he染色两次分化法在 病理制片技术中的应用与探索j.重庆医学杂志，2010, 39(22)： 3109-31112 粟娜，黄虎改良he染色液配制提高细胞核着色质 量的观察j重庆医学杂志,2008, 37 (24)：

10、2507-2509.3 袁艳华，方静宜，孙淑清，等.改良冰冻切片he染 色方法在神经病理诊断工作中的应用j.中华神经外科杂 志，2009, 20 (3)： 261-264.4 张曦，杜艾蛟，陈浩冰冻切片he染色对肾脏疾病 的快速诊断j中国基层医药，2008, 12 (4)： 506-507.5 王兴波，陈怀敏，王秀珍，等.he染色褪色后免疫染 色的病理观察j中国医药导报，2009, 4 (22)： 124-126.6 袁永辉，吴人亮，张韵风.冰冻切片在临床病理诊断 与研究中的应用j.实用医技杂志，2008, 10 ( 11 )： 1240-1241.7 yuan yong-hui, che dong-yuan, xiong mi. effectsof ddph onheccm-inducedproliferation andimmunophenotypes of the pulmonary vascular pericytesj. journal of tongji medical university,