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1、- 13 -第 - 13 - 页 共 13 页第三章 细胞生物学研究方法 名词解释:原位杂交、单克隆抗体、细胞株、流式细胞术、原代培养、传代培养、 细胞融合、细胞拆合、分辨率,细胞系. 名词解释:1.原位杂交在不破坏细胞或细胞器的情况下,用核酸探针检测特定核苷酸序列在染色体上的精确位置的技术。染色体在高pH值条件下,DNA解链,带标记的核酸探针即刻与染色体一定部位杂交。既可检测DNA序列,也可检测RNA序列。2.单克隆抗体来自单个细胞克隆所分泌的抗体分子。通过克隆单个分泌抗体的B淋巴细胞,获得的只针对某一抗原决定簇的抗体,具有专一性强、能大规模生产的特点。3.细胞株通过选择从原代培养物或者细胞

2、系中获得的具有特殊性质或者标志的细胞。细胞株:在体外一般可以顺利地传4050代,并且仍能保持原来二倍体数量及接触抑制行为的传代细胞。4.原代培养直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。因此,较为严格地说是指成功传代之前的培养,此时的细胞保持原有细胞的基本性质。原代细胞培养:直接从有机体取出组织,通过组织块长出单层细胞,或者用酶消化或机械方法将组织分散成单个细胞,在体外进行培养,在首次传代前的培养称为原代培养。5.传代培养将培养细胞从培养器中取出,把一部分移至新的培养器中再进行培养,这种培养方式称为传代培养,亦称为继代培养或连续培养。传代细胞培养:原代培养形成的单层培养细胞汇合以后,需要进

3、行分离培养(即将细胞从一个培养器皿中以一定的比率移植至另一些培养器皿中的培养),否则细胞会因生存空间不足或由于细胞密度过大引起营养枯竭,将影响细胞的生长,这一分离培养称为传代细胞培养。 6.细胞融合真核细胞通过介导和培养,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程称为细胞融合(cell fusion)或细胞杂交(cell hybridization)。细胞融合:两个或多个细胞融合成一个双核细胞或多核细胞的现象。一般通过灭活的病毒或化学物质介导,也可通过电刺激融合。 细胞融合 cell fussion两个细胞通过质膜的接触并相互融合形成一个细胞的过程。融合后的细胞只有一个连续的细胞质膜。7细胞

4、拆合把细胞核与细胞质分离开,再把不同来源的胞质体和核体相互组合,形成核质杂交细胞。物理方法:机械或短波光去核,微吸管移核化学方法:细胞松弛素B促细胞排核8分辨率能将物体相近两点分辨清楚的距离极限(显微镜最重要的性能参数)D= 0.61l / N.A.l代表光波波长;N.A.为镜口率,也称数值孔径。N. A. =n · Sin (a /2) n:物镜与标本间介质的折射率;(1或1.515) a:镜口角(聚光焦点对物镜镜 口的张角,<180º)结论: 通过公式可知光学显微镜最大分辨率0.2um 减小分辨率需减小l 分辨率:区分开两个质点间的最小距离。9.细胞系:原代培养经

5、首次传代成功后即为细胞系。细胞系 cell line来源于动物或植物细胞,能够在体外培养过程中无限增殖的细胞群体。细胞系:在体外培养的条件下,有的细胞发生了遗传突变,而且带有癌细胞特点,失去接触抑制,有可能无限制地传下去的传代细胞。 10.流式细胞术流式细胞术是对单个细胞进行快速定量分析与分选的一门技术,使用仪器为流式细胞仪。主要应用:用于定量测定细胞中的DNA、RNA或某一特异蛋白的含量;测定细胞群体中不同时相细胞的数量;从细胞群体中分离某些特异染色的细胞。第四章 细胞质膜名词解释:生物膜 单位膜 流动镶嵌模型 脂质体1.生物膜质膜、细胞内膜、线粒体、叶绿体的膜等统称为生物膜细胞内的膜系统与

6、细胞质膜统称为生物膜。(细胞质膜曾称细胞膜,是指围绕在细胞最外层,由脂质、蛋白质、糖类组成的生物膜。)2.单位膜 JD. Robertson 1957用超薄切片技术电镜观察,提出单位膜模型,所有的生物膜都是由蛋白质脂质蛋白质的单位膜构成。暗明暗三条带。厚约7.5nm。3.流动镶嵌模型 Singer 和Nicolson 1972 根据免疫荧光、冰冻蚀刻的研究结果,提出了“流动镶嵌模型”1. 脂类分子构成膜的基质;2. 蛋白有两种,插入膜中(整合蛋白),或附着于细胞表面(周边蛋白),表现出分布的不对称性;3. 膜是流动的,膜分子在膜平面内可行各种运动4.脂质体脂质体是根据磷脂分子可在水相中形成稳定

7、的脂双层膜的趋势而制备的人工膜(artificial membrane)。单层脂分子铺展在水面上时,其极性端插入水相而非极性尾部面向空气界面,搅动后形成乳浊液,即形成极性端向外而非极性端在内部的脂分子团或形成双层脂分子的球形脂质体。第五章 物质的跨膜运输名词解释:主动运输 通道蛋白 载体蛋白 膜泡运输 笼形蛋白 跨细胞运输 转胞吞作用1.主动运输 在膜运输蛋白的帮助下,使被运送物质逆浓度梯度或电化学梯度消耗能量跨越膜的运输方式,介导此运输方式的蛋白全为载体蛋白。主动运输:一种需要消耗能量的物质跨膜运输过程。被运输底物与跨膜载体蛋白结合,通过载体蛋白构象改变,从而将底物逆着电化学梯度转运到膜的另

8、一侧。主动运输:物质逆浓度梯度或电化学梯度,由低浓度向高浓度一侧进行跨膜转运的方式,需要细胞提供能量,需要载体蛋白的参与。2.通道蛋白:能形成贯穿膜脂双分子层的充水的通道,使某些物质通过而运输到膜的另一侧。通道蛋白只介导被动运输。一般认为它是横跨质膜形成的亲水的通道,能使适宜大小的分子及带电荷的溶质通过。通道蛋白:由几个蛋白亚基在膜上形成的孔道,能使适宜大小的分子及带电荷的溶质通过简单的自由扩散运动从膜的一侧到另一侧。3.载体蛋白 能与特异性分子结合,通过构象改变将物质运输到膜的另一侧。介导被动运输和主动运输。载体蛋白:是一类膜内在蛋白,几乎所有类型的生物膜上存在的多次跨膜的蛋白质分子。通过与

9、特定溶质分子的结合,引起一系列构象改变以介导溶质分子的跨膜转运。4.膜泡运输 真核细胞通过内吞作用(胞吞作用)和外排作用(胞吐作用)完成大分子与颗粒性物质的跨膜运输。因货物包被在囊泡中,又称膜泡运输。 5.笼形蛋白 (网格蛋白)又称笼形蛋白,是一类包被蛋白,由3条重链和3条轻链成,组装形成多面体笼形结构,介导高尔基体到溶酶体以及胞吞泡形成等过程。(由3个二聚体组成,可重复利用)6.跨细胞运输 【跨细胞转运】穿胞运输在细的一侧形成胞饮小泡穿越细胞质,另一侧使小泡中的物质释放出去。如:母鼠血液中的抗体经穿胞运输进入乳汁。在具有极性的上皮细胞中,这是一种将胞吞作用和胞吐作用结合的物质跨细胞转运方式,

10、即物质通过胞吞作用从上皮细胞的一侧被摄入细胞,再通过胞吐作用从细胞的另一侧释放出去。跨细胞转运以胞吞作用从细胞的一侧摄取物质,形成膜泡在细胞内运输,并以胞吐作用从细胞的另一侧释放出去的膜泡转运方式。7.转胞吞作用转胞吞作用 (transcytosis)受体被转运到细胞质膜的不同区域 第六章 叶绿体及线粒体n 电子传递与氧化磷酸化n 半自主性细胞器1.呼吸链按一定顺序排列在线粒体内膜上的递氢和递电子的酶体系称电子传递链。由于电子传递链以氧作电子接受体,与细胞摄取氧有关,又称呼吸链。2.电子传递与氧化磷酸化电子传递链(electron transport chain) : 按一定顺序排列在线粒体内

11、膜上的递氢和递电子的酶体系称电子传递链。 由于电子传递链以氧作电子接受体,与细胞摄取氧有关,又称呼吸链。电子传递链 electron transport chain 膜上一系列由电子载体组成的电子传递途径。这些电子载体接受高能电子,并在传递过程中逐步降低电子的能量,最终将释放的能量用于合成ATP或以其他能量形式储存。氧化磷酸化(oxidative phosphorylation):经糖酵解和三羧酸循环产生的还原性电子载体(NADH、FADH2)所携带的电子在呼吸链电子传递过程中释放能量,在FoF1ATP合酶催化下使ADP磷酸化生成ATP,这种伴随电子传递链的氧化过程所发生的能量转换和ATP的形

12、成称为氧化磷酸化。氧化磷酸化底物在氧化过程中产生高能电子,通过线粒体内膜电子传递链,将高能电子的能量释放出来转换成质子动力势进而合成ATP的过程。氧化磷酸化与电子传递分别进行实验证据:线粒体内膜重组实验“亚线粒体小泡”(超声破碎后,内膜自然形成的小膜泡)完整:具氧化磷酸化与电子传递作用去掉基粒:只能电子传递,不能合成ATP结论:电子传递链内膜上;氧化磷酸化基粒3.半自主性细胞器半自主性细胞器:线粒体和叶绿体的生长和增殖是受核基因组及其自身的基因组两套遗传系统的控制,所以称为半自主性细胞器。 第七章 细胞质基质与内膜系统概念:内膜系统、分子伴侣、蛋白酶体、微粒体、信号斑概念:1.内膜系统细胞内膜

13、系统是指在结构、功能或发生上相关的、由膜围绕的细胞器或细胞结构。主要包括:内质网、高尔基体、溶酶体、胞内体、分泌胞以及植物细胞的液泡。内膜系统:细胞内在结构、功能乃至发生上相关的、由膜围绕的细胞器或细胞结构的统称,主要包括内质网、高尔基体、溶酶体、胞内体、分泌泡等。 为什么要将内质网等称为“细胞内膜系统”? 为什么线粒体等不属于“细胞内膜系统”生物发生 结构上:相互流动 功能上:蛋白质分选途径2.分子伴侣分子伴侣 chaperone,molecular chaperon一种与其他多肽或蛋白质结合的蛋白质,以防止蛋白质错误折叠、变性或聚集沉淀,对蛋白质的正确折叠、组装以及跨膜转运有意义。分子伴侣

14、:又称分子“伴娘”,细胞中,这类蛋白能识别正在合成的多肽或部分折叠的多肽,并与多肽的一定部位相结合,帮助这些多肽的转移、折叠或组装,但其本身并不参与最终产物的形成。跨膜运送的蛋白质在解折叠与重折叠的过程中都需要某些被称为“分子伴侣”的分子参与。分子伴侣具有解折叠酶的功能,并能识别蛋白质解折叠后暴露出来的疏水面并与之结合,防止互相作用产生凝聚或错误折叠,同时还参与蛋白质跨膜运送后分子的重折叠以及装配过程。(P237)3.蛋白酶体 P115蛋白酶体 在细胞质基质中降解被泛素标记蛋白质的大分子蛋白复合体。细胞中降解大分子复合体,富含依赖的蛋白酶活性,其功能然若细胞内蛋白质破碎机。4.微粒体微粒体(m

15、icrosome):应用蔗糖密度梯度离心法从组织匀浆中分离出的由内质网膜等膜性碎片断裂形成的封闭小泡,有糙面微粒体和滑面微粒体。微粒体:为了研究ER的功能,常需要分离ER膜,用离心分离的方法将组织或细胞匀浆,经低速离心去除核及线粒体后,再经超速离心,破碎ER的片段又封合为许多小囊泡(直径约为100nm),这就是微粒体5.信号斑信号斑(signal patch) :是由几段信号肽形成的一个三维结构的表面, 这几段信号肽聚集在一起形成一个斑点被磷酸转移酶识别。信号斑是溶酶体酶的特征性信号。信号斑:在蛋白质折叠起来时其表面的一些原子特异的三维排列构成信号斑,构成信号斑的氨基酸残基在线性氨基酸序列中彼

16、此相距较远,它们一般是保留在已完成的蛋白中,折叠在一起构成蛋白质分选的信号。第八章 膜泡运输概念:信号肽、信号识别颗粒信号肽位于蛋白质端,包括疏水核心区,信号肽的端和端,原原核生物某些分泌蛋白的端也有信号序列,目前研究表明信号肽似乎没有严格的专一性。信号肽:分泌蛋白的N端序列,指导分泌性蛋白到内质网膜上合成,在蛋白合成结束前信号肽被切除。分泌蛋白在N端含有一信号序列,称信号肽,由它指导在细胞质基质开始合成的多肽和核糖体转移到ER膜信号肽酶 signal peptidase蛋白水解酶,负责切除在糙面内质网合成的新生多肽的N端信号肽序列。 信号序列 signal sequence蛋白质中由特定氨基

17、酸组成的连续序列,决定蛋白质在细胞中的最终定位。信号识别颗粒信号识别颗粒(SRP)是一种核糖核蛋白复合体,位于细胞质基质中,可以与信号肽及核糖体大亚基结合,同时又可以与内质网膜的SRP受体结合。信号识别颗粒 signal recognition particle,SRP由6条不同多肽和一个小RNA分子构成的RNP颗粒。识别并结合从核糖体中合成出来的内质网信号序列,指导新生多肽及核糖体和mRNA附着到内质网膜上。第九章 细胞信号转导G蛋白、第二信使、分子开关、PKA(蛋白激酶A)、PKC、MAPKKK细胞内膜系统、 微粒体 、分子开关蛋白 、信号识别颗粒 G蛋白G蛋白三体GTP结合调节蛋白G蛋白

18、:由GTP控制活性的蛋白,当与GTP结合时具有活性,当与GDP结合时没有活性。既有单体形式(ras蛋白),也有三聚体形式(Gs蛋白)。在信号转导过程中起着分子开关的作用。第二信使第二信使(secondary messenger)主要有:cAMP、cGMP、IP3、DG、Ca2+。作用:信号转换、信号放大。第二信使:在胞内产生的非蛋白类小分子,通过其浓度变化(增加或减少)应答胞外信号与细胞表面受体的结合,调节细胞内酶和非酶蛋白的活性,从而在细胞信号转导中行使携带和放大信号的功能。目前公认的第二信使有cAMP、DAG、IP3、Ca2+和cGMP第二信使 second messenger第一信使分子

19、(激素或其他配体)与细胞表面受体结合后,在细胞内产生或释放到细胞内的小分子物质,如cAMP, IP3, Ca2+等,有助于信号向胞内进行传递。第二信使学说:胞外信号(第一信使)不能进入细胞,作用于表面受体,产生胞内信号(第二信使),从而引发靶细胞内一系列反应。分子开关 p161分子开关 molecular switch细胞信号转导过程中,通过结合GTP与水解GTP,或者通过蛋白质磷酸化与去磷酸化而开启或关闭蛋白质的活性。分子开关机制:通过蛋白激酶使靶蛋白磷酸化,通过蛋白水解酶使靶蛋白去磷酸化从而调节靶蛋白活性。蛋白质磷酸化和去磷酸化作为一种生物学调节机制,可以改变蛋白质电荷和构象变化,从而导致

20、蛋白质活性的增强或降低。分子开关:在细胞内一系列信号传递的级联反应中,必须有正、负两种相辅相成的反馈机制精确调控,也即对每一步反应既要求有激活机制,又必然要求有相应的失活机制,使细胞内一系列信号传递的级联反应能在正、负反馈两个方面得到精确控制的蛋白质分子称为分子开关。3.5分子开关蛋白信号传递中的开关蛋白:指细胞内信号传递时作为分子开关的蛋白质,含有正、负两种相辅相成的反馈机制,可分两类:开关蛋白的活性,由蛋白激酶使之磷酸化而开启,由蛋白磷酸E使之去磷酸化而关闭,许多开关蛋白即为蛋白激酶本身。开关蛋白由GTP结合蛋白组成,结合GTP活化,结合GTP而失活。第二信使和分子开关第二信使学说:胞外信

21、号(第一信使)不能进入细胞,作用于表面受体,产生胞内信号(第二信使),从而引发靶细胞内一系列反应。第二信使:在胞内产生的非蛋白类小分子,通过其浓度变化(增加或减少)应答胞外信号与细胞表面受体的结合,调节细胞内酶和非酶蛋白的活性,从而在细胞信号转导中行使携带和放大信号的功能。目前公认的第二信使有cAMP、DAG、IP3、Ca2+和cGMPPKC蛋白激酶C protein kinase C一类多功能的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族,可磷酸化多种不同的蛋白质底物。有两个功能区,一个是亲水的催化活性中心,一个是疏水的膜结合区。是钙离子和磷脂酰丝氨酸依赖的丝氨酸苏氨酸蛋白酶,具有广泛的作用底物,参与众多的生

22、理过程,同时的活化可以增强特殊基因的转录。PKA protein kinase蛋白激酶:将磷酸基团转移到其他蛋白质上的酶,通常对其他蛋白质的活性具有调节作用。蛋白激酶A:称为依赖于cAMP的蛋白激酶A,是由四个亚基组成的复合物,其中两个是调节亚基,两个是催化亚基;PKA的功能是将ATP上的磷酸基团转移到特定蛋白质的丝氨酸或苏氨酸残基上,使蛋白质被磷酸化,被磷酸化的蛋白质可以调节下游靶蛋白的活性。MAPKKK P178Raf 是苏氨酸/丝氨酸(Ser /Thr)蛋白激酶(又称MAPKKK),它使靶蛋白上的苏氨酸/丝氨酸残基磷酸化,可延长Ras-GTP信号事件的寿命自身活化后可结合并磷酸化MAPK

23、K(一种蛋白激酶),引起级联反应。第十章 细胞骨架微管组织中心、驱动蛋白、胞质动力蛋白1.微管组织中心 microtubule organizing centers,MTOC微管组织中心在细胞中微管起始组装的地方,如中心体、基体等部位。-微管蛋白对微管的起始组装有重要作用。微管组织中心(MTOC):微管在生理状态及实验处理解聚后重新装配的发生处称为微管组织中心。动物细胞的MTOC为中心体。MTOC决定了细胞中微管的极性,微管的(-)极指向MTOC,(+)极背向MTOC。微管组织中心(Microtubule Orgnanizing Center, MTOC)正常生理条件下的体内组装: 微管的装配

24、总是先由一定区域开始的,该区域为MTOC。微管的负端附在微管组织中心-TuRC上受到保护,微管的延长和缩短变化发生在正端。所有动物细胞中,中心体(centrosome)是主要的微管组织中心。真正起MTOC作用的可能是位于中心粒周围的一些蛋白质成分。2.驱动蛋白 kinesin驱动蛋白能利用ATP水解所释放的能量驱动自身及所携带的货物分子沿微管运动的一类马达蛋白,与细胞内物质运输相关。驱动蛋白kinesin80nm的杆状结构,一端为两个马达结构域(含ATP结合位点和微管结合位点),另一端为重链和轻链组成的扇形尾端。3.胞质动力蛋白 cytoplasmic dynein胞质动力蛋白由多条肽链组成的

25、巨型马达蛋白,利用ATP水解释放的能量将膜泡或膜性细胞器等沿微管朝负极转运。在细胞内参与物质运输的马达蛋白有3类:沿微丝运动的肌球蛋白沿微管运动的驱动蛋白和动力蛋白第十一章 细胞核与染色质常染色质、异染色质、着丝粒、灯刷染色体、多线染色体、核仁组织区、核纤层概念1.常染色质 p241 euchromatin常染色质间期核中处于分散状态、压缩程度相对较低、着色较浅的染色质。是指间期细胞和内染色质纤维折叠压缩程度低,相对处于伸展状态,用碱性染料染色时着色较浅的那些染色质2.异染色质 constitutive heterchromatin是指间期细胞核中染色质纤维折叠压缩程度高,处于聚缩状态,用碱性

26、染料染色时着色深的那些染色质。异染色质在细胞间期保持高度凝聚状态、染色较深、不具有转录活性的染色质。异染色质的特点:凝缩状态,无转录活性、是遗传惰性区。在细胞周期中表现为晚复制、早凝缩。分为两类:结构异染色质、兼性异染色质常染色质:伸展开的呈电子透亮状态异染色质:卷曲凝缩。(Giemsa染,常浅异深)3.着丝粒(centromere)着丝粒 位于每条染色体的两条姊妹染色单体相连处主缢痕的中心部位,由高度重复序列的DNA组成,将染色体分为两臂。着丝粒 将姐妹染色单体连接在一起形成有丝分裂染色体的主缢痕部位,着丝粒也是动粒形成及微管与动粒结合的区域。4.灯刷染色体 lampbrush chromo

27、some普遍存在于动物界的卵母细胞中。是卵母细胞进行第一次减数分裂时停留在双线期的染色体。它是一个二价体, 含4条染色单体, 由轴和侧丝组成, 形似灯刷灯刷染色体较普遍存在于鱼类、两栖类等动物的卵母细胞减数分裂双线期,由具有转录活性的染色质环形成类似灯刷的特殊巨大染色体。5.多线染色体polytene chromosome多线染色体染色体DNA经多次复制而不分开、呈规则并排的巨大染色体,昆虫中的巨大染色体形态特征最为典型。特点:体积巨大,染色体多次复制而不分离。 多线性 ,每条多线染色体由500-4000条解旋的染色体合并在一起形成。 体细胞中同源染色体紧密配对。 横带纹,染色后呈现出明暗相间

28、的带纹 。 胀泡和环,在幼虫发育的某个阶段,多线染色体的某些带区疏松膨大,形成胀泡(puff)或巴氏环(Balbiani ring)。6.核仁组织区核仁组织区(nucleolar organizing region, NORs ) 核仁组织区位于染色体的次缢痕区,但并非所有的次缢痕都是NORs。 是rRNA基因所在的区域,其精细结构呈灯刷状,可伸出DNA环(核糖体DNA)。能够合成核糖体的28S、18S和5.8S rRNA。核仁组织区:位于染色体的次缢痕部位,是rRNA基因所在部位,与间期细胞核仁形成有关。但并非所有的次缢痕都是NOR。7.核纤层 nuclear lamina紧贴内核膜内侧厚度

29、10-20nm的由核纤层蛋白构成的纤维网。在核内与核骨架相连,在核外与中间纤维连接,形成贯穿细胞核细胞质的网架结构。核纤层 位于核膜内侧,由核纤层蛋白组成的纤维状网络结构。核纤层:是位于细胞核内膜与染色质之间的纤维蛋白片层或纤维网络,与核内膜紧密结合。它普遍存在于高等真核细胞间期细胞核中。 核纤层功能:(1)维持核孔位置和核被膜的形态;(2)为间期染色质提供附着位点;(3)有丝分裂中,与核被膜的解体和重建有关。第十二章 核糖体 polyribosome, polysome1.多聚核糖体核糖体常几个或几十个串联在一条mRNA分子上高效地进行肽链合成,形成多聚核糖体。核糖体的数目与mRNA的长度正

30、相关。多聚核糖体由多个甚至几十个核糖体串联在一条mRNA分子上进行肽链合成的核糖体与mRNA的聚合体。第十三章 细胞周期与细胞分裂 概念:细胞周期、有丝分裂器、联会复合体、G0期细胞、细胞同步化、1.细胞周期 cell cycle,cell division cycle 我们将从一次细胞分裂结束开始,经过物质准备,知道下一次细胞分裂结束为止,称为一个细胞周期。细胞周期 一次细胞分裂结束到下一次分裂完成之间的有序过程。细胞周期:连续分裂的细胞,从上一次有丝分裂结束开始到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程。在这个过程中,细胞遗传物质复制,各组分加倍,平均分配到两个子细胞中。2.有丝分裂器有丝分裂器

31、:有丝分裂器是一种微管组织,其主要构成成分为纺锤体、中心体和星体,这一结构系统与姊妹染色单体精确定位到2个子细胞中有关。有丝分裂器:有丝分裂时,由微管及其结合蛋白所组成的纺锤体和中心复合体。3.联会复合体 (synaptonemal complex,SC)同源染色体配对联会,形成联会复合体(synaptonemal complex,SC)由两条同源染色体沿纵轴形成,包括边侧成分、中央区、中央成分和横丝组成。SC形成于偶线期,成熟于粗线期,消失于双线期。联会复合体-同源染色体配对联会形成的一种梯状结构,在电镜下可见其由三个平行的部分组成 。 联会复合体  synaptonemal co

32、mplex,SC减数分裂前期染色体配对时,同源染色体之间形成的一种复合结构,既有利于同源染色体间的基因重组,也有利于同源染色体的分离。4.细胞同步化:在自然过程中发生的或因研究工作的需要,为得到具有分裂能力且细胞时相一致的细胞群体的方法。5.G0期细胞: 细胞被R点限制,暂时退出细胞周期而处于拘留状态的细胞称为G0期细胞。当受到合适刺激后又能进入细胞周期,分裂增殖。如肝细胞、淋巴细胞、成纤维细胞。也称静止期细胞,这类细胞会暂时脱离细胞周期,停止细胞分裂,G0期细胞只是暂时脱离细胞周期,一旦得到信号指使,会很快返回细胞周期增值分裂。静止期细胞:又称G0期细胞或静止期细胞,是指暂时脱离细胞周期不进

33、行增殖,但在适当的刺激下,可重新进入细胞周期的细胞。6.中心体 centrosome由一对相互垂直的柱状中心粒及周围无定形的电子致密的基质组成,是微管组织中心。第十四章 细胞增殖调控及癌细胞概念:染色体超前凝集、细胞周期蛋白、检验点、原癌基因、抑癌基因、接触抑制1.染色体超前凝集将处于分裂期的细胞(M期)与处于细胞周期其他时期(G1期、S期、G2期)的细胞融合, M期的细胞质总是能够诱导非有丝分裂的细胞中的染色质凝集, 将这种现象称为染色体超前凝集 ,凝聚的染色体称为超前凝聚染色体。染色体的早期凝集:将细胞同步化在细胞周期的不同时期,通过细胞融合,将M期细胞与其他间期细胞融合后培养一段时间,与

34、M期细胞融合的间期细胞发生了形态各异的染色体凝集现象。2.细胞周期蛋白细胞周期蛋白(Cyclin):在真核细胞分裂周期中浓度有规律地升高和降低的蛋白,可激活周期蛋白依赖激酶,启动细胞周期的进程。不同的周期蛋白在细胞周期中表达的时期不同,并与不同的CDK 结合,调节不同的CDK细胞周期蛋白:与细胞周期调控有关的、其含量随细胞周期进程变化而变化的特殊蛋白质。最初在海胆卵中发现,一般在细胞间期内积累,在细胞分裂期内消失,在下一个细胞周期又重复这一消长现象,即在每一轮间期合成,G2/M时达到高峰,M期结束时被水解,下一轮周期又重新合成积累。已经证明周期蛋白广泛存在于各种真核生物中,是诱导细胞进入M期必

35、需的,说明周期蛋白是细胞周期的调控者,可能参与了MPF功能的调节,是MPF的一部分。 3.检验点 checkpoint细胞内存在一系列监控机制,这些特异的监控机制可以鉴别细胞周期进程中的错误,并诱导产生特异的抑制因子,阻止细胞周期进一步运行,这些监控机制称为检验点。检验点细胞周期的调控点,检验细胞从一个周期时相进入下一个时相的条件是否适合。细胞周期检验点:在细胞内存在一系列的监控机制,可以鉴别细胞周期进程中的错误,并诱导产生特异的抑制因子,阻止细胞周期的进行,这些监控机制称为检验点。不仅存在于G1期,也存在于细胞周期的其他时期。4.原癌基因 proto oncogene 细胞基因组中控制细胞生

36、长和分裂的正常基因,与病毒癌基因同源性很高,该基因一旦发生突变,可使细胞转化为异常增殖状态,引起正常细胞癌变,故在突变前称作原癌基因,突变后成为癌基因(oncogenes)。原癌基因 可促进细胞增殖的正常基因,其功能获得性突变形式为癌基因,具有促使细胞发生癌变的能力。5.抑癌基因 (suppressor gene) 是正常细胞增殖过程中的负调控因子,其产物可以抑制细胞的生长和分裂,当基因发生变异或丢失,解除了对细胞增殖的抑制作用,导致细胞周期失控而过度增殖抑癌基因:是正常细胞增殖过程中的负调控因子。抑癌基因编码的蛋白抑制细胞增殖,使细胞停留于检验点上阻止周期进程。6.接触抑制接触抑制:培养中的

37、正常细胞表现有单层生长的属性,当分散生长的分裂细胞达到相互融合接触后,即停止分裂和生长。接触抑制:正常细胞在体外培养时表现为贴壁生长和汇合成单层后停止生长的特点,即接触抑制现象。MPF(细胞促分裂因子):又称促成熟因子或M期促进因子,是指存在于成熟卵细胞的细胞质中,可以诱导卵细胞成熟的一种活性物质。已经证明,MPF是一种蛋白激酶,包括两个亚基即Cdc2蛋白和周期蛋白,当二者结合后表现出蛋白激酶活性,可以使多种蛋白质底物磷酸化;MPF是一种普遍存在的、进化上较保守的G2/M转换调控者。第十五章 细胞分化与胚胎发育第 十六章 细胞死亡与衰老概念:细胞分化、持家基因、奢侈基因、细胞全能性、诱导多能干

38、细胞、胚胎诱导、细胞凋亡 、黏着带、细胞质决定子、胚胎干细胞 、多能干细胞、Hayflick界限 。1.细胞分化 cell differentiation细胞分化细胞在形态、结构和功能上产生稳定性差异的过程。细胞分化(cell differentiation) 在个体发育中,由一种相同的细胞类型经细胞分裂后,逐渐在形态、结构和功能上形成稳定差异,产生不同的细胞类群的过程。2.奢侈基因 (P415)组织特异性基因(奢侈基因):指不同的细胞类型进行特异性表达的基因,其产物赋予各种类型细胞特异的形态结构特征与特异的功能。组织专一性基因(tissue-specific gene)(luxury gene奢侈基因):在各种细胞中专一选择表达的基因。细胞分化的本质是细胞选择性表达了奢侈基因3.持家基因 (house-keeping gene) 指在所有细胞中均表达的一类基因,其产物是维系生命活动所必须的。管家基因:所有细胞中均要表达的一类基因,其产物是对维持细胞基本生命活动所必需的。持家基因:维持细胞生存所必需的,在各种细胞中都处于活动状态。4.细胞全能性 (totipotency):单个细胞在一定条件下分化发育成为完整个体的能力

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