遗传学实验果蝇唾腺染色体

1、遗传学实验果蝇唾腺染色体制备与观察一、实验目的o 1.练习取出果蝇等幼虫唾腺的技术和制作唾腺染色体标本的方法。o 2.观察多线染色体的特征： a.巨大；巨大； b.体细胞配对，所以染色体只有半数（体细胞配对，所以染色体只有半数（n）；）； c.各染色体的异染色质多的着丝粒部分互相靠拢形成染色各染色体的异染色质多的着丝粒部分互相靠拢形成染色 中心（中心（chromocenter）；）； d.横纹有深浅、疏密的不同，各自对应排列，这意味着基横纹有深浅、疏密的不同，各自对应排列，这意味着基 因的排列。因的排列。o 3.把观察到的好图像画下来。二、实验原理o 双翅类昆虫（摇蚊、果蝇等）幼虫期的唾腺细胞

2、很大，其中的染色体称为唾腺染色体唾腺染色体（salivary chromosome）。o 这种染色体比普通染色体大得多，宽约5m，长约400m，相当于普通染色体的100150倍，因而又称为巨大染色体巨大染色体。o 唾腺染色体经过多次复制而并不分开，大约有1000至4000根染色体丝的拷贝，所以又称多线染色体多线染色体（polytene chromosome）。o 多线染色体经染色后，出现深浅不同、密疏各别的横纹，这些横纹的数目和位置往往是恒定的，代表着果蝇等昆虫的种的特征。如染色体有缺失、重复、倒位、易位等，很容易在唾腺染色体上识别出来。三、实验材料o黑腹果蝇的三龄幼虫。黑腹果蝇的三龄幼虫。这

3、种材料既易饲养，又易取得唾腺，但为了得到更好的染色体标本，需要在2025和营养良好的条件下饲养幼虫。选择行动迟缓、肥大，爬上管壁的三龄幼虫（就要化蛹了）做标本最佳。 三龄幼虫照片三龄幼虫照片四、实验仪器与试剂 1. 材料：材料： 普通果蝇的三龄幼虫。普通果蝇的三龄幼虫。 2. 器具：器具： 双筒体视解剖镜、显微镜、镊子、解剖双筒体视解剖镜、显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、培养皿、吸水纸等。针、载玻片、盖玻片、培养皿、吸水纸等。 3. 药品：药品： 改良苯酚品红溶液、生理盐水、改良苯酚品红溶液、生理盐水、1N盐盐酸。酸。五、实验步骤o 实验前知识准备：实验前知识准备： 果蝇三龄幼虫的唾腺位

4、于幼虫的头部附近，可以看看显微照片中的位置（点击图片观察放大图）o 实验开始实验开始1.唾腺剖取 把载玻片置于双筒镜下。载玻片上滴加生理盐水一滴，取三龄幼虫放在其中，操作者两手各握一枚解剖针，左手的解剖针压住幼虫后端1/3处，固定幼虫。右手的解剖针按住幼虫头部，用力向右拉，把头部从身体拉开，唾腺随之而出，唾腺是一对透明的棒状腺体 。如图示如图示2. 2. 解离：用吸水纸吸去生理盐水，然后加解离：用吸水纸吸去生理盐水，然后加1 1滴滴1N HCl1N HCl溶液于腺体上，作用溶液于腺体上，作用101015min15min。3. 3. 冲洗：用吸水纸吸去冲洗：用吸水纸吸去HCl HCl ，滴加蒸馏

5、水于，滴加蒸馏水于腺体上进行冲洗（两次）。腺体上进行冲洗（两次）。4. 4. 染色：吸去蒸馏水，加染色：吸去蒸馏水，加2 23 3滴改良苯酚品滴改良苯酚品红溶液，染色红溶液，染色30min30min以上。用镊子加盖玻片。以上。用镊子加盖玻片。5. 5. 观察：观察： 镜检。镜检。六、实验结果1.先用低倍物镜观察片子，找到好的染色体图像后，放到视野中心，再用高倍镜观察。 2.黑腹果蝇染色体是2n=24=8（图一），但因体细胞配对，又因短小的第4染色体和X染色体的着丝粒在端部，所以染色体的一端在染色中心上，看上去，各自只形成一条线状和点状染色体。只有第2和第3染色体的着丝粒在中央，它们从染色中心以

6、V字形向外伸出（2L，2R，3L，3R），因此共有6条（图二）。 在显微镜下，短小的第4染色体有时不易观察到，所以最容易识别的是第5条（图三）。 雄果蝇的Y染色体几乎包含在染色中心里，因为是异染色质，看起来染色可能淡些。有经验的人可以发现雄果蝇的X染色体比雌果蝇X染色体要细些，因为雄性只有一条X染色体。 3.唾腺染色体上的横纹宽窄、浓淡是一定的，但在果蝇的特定发育时期，它们会出现不连续的膨胀，这称为疏松区（puff），目前人们认为这是这部分基因被激活的标志。 七、实验分析与讨论八、思考题1、根据实验的观察可以确定果蝇的染色体数目吗？2、制备果蝇唾腺染色体需注意那几个关键步骤？3、利用果蝇唾腺染

7、色体可以进行哪些遗传学研究？九、参考文献o 张贵友，普通遗传学实验指导， 北京：清华大学出版社，2003o 卢龙斗、常重杰，遗传学实验技术， 合肥：中国科学技术大学出版社，1996o 刘祖洞、江绍慧，遗传学实验， 北京：高等教育出版社，1987果蝇三龄幼虫下一张果蝇三龄幼虫下一张果蝇三龄幼虫返 回果蝇唾腺位于头部附近果蝇唾腺位于头部附近返 回果蝇唾腺位于头部附近（放大图）果蝇唾腺位于头部附近（放大图）返 回1、两手各握一枚解剖针，左手解剖针压住幼虫后端1/3处，固定幼虫；右手的解剖针按住幼虫的头部用力向后拉，把头部从身体拉开唾腺随之而出。2、已剥离出的唾腺染色体一对透明的棒状腺体下一张返 回得到完整的果蝇唾腺得到完整的果蝇唾腺图三图三 果蝇的唾腺染色体显微照片（一）果蝇的唾腺染色体显微照片（一）下一张果蝇唾腺染色体显微照片（二）果蝇唾腺染色体显微照片（二）返 回图一、黑腹果蝇染色体核型返 回2L43L2RX3R图二、黑腹果蝇染色体模式核型返 回人有了知识，就会具备各种分析能力，明辨是非的能力。所以我们要勤恳读书，广泛阅读，古人说“书中自