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文档简介

1、第四章 RNA的结构1957年由Crick提出NHNHOOOHHO HHO HO HHH O C H2H O C H2OHHO HHHO HHD-核糖 D-2-脱氧核糖NHNHOO调节蛋白与乳糖操纵子的结合模型 5端有甲基化的“帽子”结构动物细胞核糖体rRNA有四类：5SrRNA，5.8SrRNA，18SrRNA，28SrRNA。许多rRNA的一级结构及由一级结构推导出来的二级结构都已阐明，但是对许多rRNA的功能迄今仍不十分清楚。T. Cech S. Altman 先是GTP进入G结合位点，左边外显子的3端通过和引导序列的互补配对进入底物位点。GTP的3-OH作用左边外显子和内含子交界处的磷

2、酸二酯键，本身结合到内含子的5末端，被切下的5外显子仍保持在底物位点上，并未游离。第二步内含子的G414（即3交界序列上的G）又进入了G-结合位点，切下的外显子的3-OH又对G-结合位点上的G与3外显子之间的磷酸二酯键发动亲核进攻，切开磷酸二酯键，而其3-OH和3外显子的P重新形成磷酸二酯键而连接起来，这样就完成内含子的剪接。内含子成为线形的413nt的RNA分子。第三步，内含子5端和引导序列相邻的序列通过引导序列互补配对，进入底物位点。仍然留在G结合位点上的G414其3-OH再作用底物位点上的序列，切下19nt的内含子5端，并和余下内含子的5-P形成二酯键，形成414nt的环状内含子。II型

3、内含子的结构特点 NoImageII型内含子的剪切机制 核mRNA剪切过程 图13-31 U1和内含子5的互补对剪切是重要的 Ribozyme有两种合成途径，即体外合成和体内合成，相应的，Ribozyme进入细胞的方式也有两种：2.1 体外合成Ribozyme然后导入细胞体外合成Ribozyme有两种方法：一是用DNA/RNA合成仪直接合成；二是先合成双链或单链模版，然后用T7RNA聚合酶合成Ribozyme。合成的Ribozyme如何被有效的导入细胞是一个一直探讨的问题。由于天然存在的受体只能运输小于20个核苷酸的片段，而通常的Ribozyme分子约为50个核苷酸，所以这个途径只适用于将催化分子分成两段合成，每段都小于20个核苷酸，导入细胞后，再分别与底物结合形成所需要的二级结构，显然，这种途径有很大的局限性。（1）HIV2021/8/26123NoImage 刚才的发言，如刚才的发言，如有不当之处

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