毕业论文《生鲜乳中甲醛测定》

1、首都师范大学本科生毕业论文（设计）论文题目：生鲜乳中甲醛测定学生姓名：院系名称：首都师范大学化学系专业名称：应用化学学 号：指导教师：摘要甲醛是一种无色，有强烈刺激性气味的气体。易溶于水、醇和毬。甲醛在常 温下是气态，通常以水溶液形式出现，是一种重要的有机原料。木文将生鲜乳经 亚铁氧化钾溶液、硫酸锌溶液沉淀蛋白质后，其上清液与2, 4 戊二酮在弱酸性 条件下反应，采用高效液相色谱法测定了生鲜乳中甲醛的含量。通过 waters-2695-2487 液相系统，atlantis t3, 4.6 mmx250 mm, 5 |im 色谱柱分离， 在418 nm处检测。在加标量为0.5 mg/l -10

2、mg/l之间时，加标回收率为 80%-120%,本文测定生鲜牛乳中的甲醛均有较好的准确性，主耍技术特点体现 在检出限低、操作简单快捷。关键词：生鲜乳甲醛测定方法验证1. 绪论i2. 实验部分12.1实验仪器12.2实验试剂22.3生鲜乳屮甲醛测定32.4.1采样和样品制备32.4.2样品处理33实验结果33甲醛标准曲线绘制33.2甲醛的添加冋收率测定43.3方法的精密度测定74参考文献8致谢91.绪论甲醛是一种无色，有强烈刺激性气味的气体。易溶于水、醇和瞇。甲醛在 常温下是气态，通常以水溶液形式出现，是一种重要的有机原料。3540%的 甲醛水溶液叫做福尔马林。福尔马林具有杀菌和防腐能力，并可以

3、增口、改变 色泽，故有些不法商贩用它来泡发各种水产品，以增加韧性和脆感；还有些不 法商贩用它來熏蒸甚至把它直接加入到面食、蘑菇或豆制品中，达到增白、改 变色泽的目的。甲醛是细胞原生质毒物，它可直接作用于氨基、铳基、轻基和竣基，生成次 甲基衍生物，从而破坏机体蛋白质和酶，使组织细胞发生不可逆的凝固、坏死， 从而对神经系统、肺、肝脏产生损害，人口服致死量为i0g,进入人体后还能引 起免疫功能下降；甲醛已经被世界卫生组织确定为致癌和致畸物质in m食 品卫生法中明确规定禁止向食品中添加甲醛2。和关文献3中介绍采用衍生 试剂将甲醛进行衍牛后进行高效液相色谱法进行检测。2.实验部分2.1实验仪器液相色谱

4、仪为 waters-2695-2487；采用色谱柱:atlantis t3, 4.6 mmx250 mm, 5 pm；色谱分离条件为流动相：乙勝水= 20： 80 (v/v)；流速1.2 ml/min；柱温：室温；检测波长：412 nm；进样豊50 plo旋转蒸发仪：re52cs,上海亚荣生化仪器厂；调温电热套：kdm型，山东 卿城华夏电热仪器厂；超声波清洗器：kq-250b,昆山市超声仪器冇限公司；超 纯水札美国millipore;高速冷冻离心机:1-15k, sigma公司；循环水多用 真空泵：shz3(iii),河南省予华仪器有限公司；高速粉碎机：6202型，欣镇金 业有限公司；电热恒温

5、鼓风干燥箱：dhg-9023a,上海精宏实验设备有限公司。2.2实验试剂实验所用试剂如硫酸锌（znsothzo）,亚铁氧化钾iqfe （cn）6-3h2o, zqr （ch3cn）,乙酸鞍（ch3coonh4）,儼 （ch3cooh）,2,4-戊二酮（c5h8o2）, 碘化钾（ki）,碘（i2）,氢氧化钠（naoh）,硫酸（h2so4）和甲醛溶s （36%38%） 均为分析纯，其屮乙睛为色谱级。甲醛标准储备溶液1 000 |ig/ml的配制：取2.8 ml含量为36%38%甲醛溶 液，放入1l容量瓶中，加水稀释至刻度，为甲醛储备液，4°c保存两周。甲醛储备液的标定：精确吸取甲醛标准储

6、备溶液10.00 ml,爵 250 ml碘量瓶中。加入25.00 ml 0.1mol/l碘溶液和7.5 ml 1 mol/l氢氧化钠溶液,放置15 min；加入10 ml10% 硫酸溶液，再放置15 min；用浓度为0.1000 mol/l硫代硫酸钠溶液滴定，至溶液 呈现淡黄色吋，加入1.00 ml 5%淀粉指示剂，继续滴定至恰使蓝色褪去为止， 记录所用硫代硫酸钠溶液体积（匕），ml。同时用水作试剂空白滴定，记录空片 滴定所用硫代硫酸钠标准溶液的体积（）, mlo（vo-vi）xcxl5xlooqp 10式中：甲醛标准储备溶液中甲醛的浓度，单位为毫克每升（mg/l）； vo-空 白滴定消耗硫代

7、硫酸钠标准溶液的体积数，单位为毫升（ml）；力一滴定甲醛 消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积数，单位为毫升（ml）； c-硫代硫酸钠溶液准 确的摩尔浓度，单位为摩尔每升（mol/l）； 15 lmll mol/l碘相当甲醛的量, 单位为毫克（mg）； 10所用甲醛标准储备溶液的体积，单位为毫升（ml）。甲醛标准屮间溶液：准确吸取1.00 ml的甲醛标准储备液，用超纯水稀释 至100 ml,得到浓度为10 ng/mlo 4°c保存一周。甲醛标准工作溶液：准确吸取0.50、1.00、2.00、3.00、4.00 ml的甲醛标准 屮间液，用超纯水稀释至10 ml,得到浓度分别为0.5、1.0、2

8、.0、3.0、4.0 gg/ml 的标准工作曲线，现配现用。2.3生鲜乳中甲醛测定2.4.1采样和样品制备采样前，样品耍通过合适的方式混合均匀。混匀后应立即取样，取样量应不 少于100 ml,并将样品迅速冷藏或冷冻保存，作为实验室样品。将实验室样品恢复至室温，并摇匀，作为待测试样。2.4.2样品处理准确移取5.00 ml的均匀奶样，于25.00 ml容量瓶中，依次加入1.0 ml亚 铁氧化钾溶液、1.0 ml硫酸锌溶液。每加入一种溶液后，充分振荡均匀。全部 溶液加完后，静置10 min,用水定容到25.00 ml,过滤，弃去最初的12 ml 滤液，收集滤液。同时做空口。准确移取上述滤液0.80

9、0 ml,加入0.200 ml衍 生试剂，并放置在51 °c±0.5 °c水浴，衍生反应12 min。迅速冷却到室温，涡旋 震荡2030s,待测定。同时做空白和标准工作溶液的衍生。取衍生好的试液过 膜，进行液相色谱检测。3实验结果3.1甲醛标准曲线绘制按照色谱条件甲醛能够较好的分离，甲醛的分离色谱图见图1。取甲醛的 标准浓度梯度为0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 gg/ml的标准溶液,按照色谱检测条件 进行高效液相色谱测量峰而积值，各浓度标准溶液进样，平行进样3次，测得峰 面积并取平均值。以峰而积y对被分析化合物浓度（x, pg/ml）求得线性回归 方程为y

10、二483165. 73646 x + 14591. 13337,线性相关系数为0.995以上，说明 在0.5pg/ml4.0yg/ml浓度范围内，甲醛与之对应的峰面积之间存在较好的线性 关系。在对实际样品的检测中，可用上述方程通过峰面积计算甲醛的浓度。图1. 0.864 pg/ml甲醛标准工作溶液谱图3.2甲醛的添加回收率测定选择牛鲜牛奶，先测定甲醛含量，结果见表1.在样品中分別添加不同 量的甲醛标准物质，按己确定的提取方法和色谱条件测定添加冋收量（扣 除样品本底值，以甲醛含量计）。实验数据见表2表7 （以上测量值均无需 减去试剂空白）。样品中甲醛含量以°表示，单位为mg/lo按卞述

11、公式计 算：（c -c（）x 25 x 1000vxlooop样品中甲醛的含量，单位为毫克每升（mg/l）； c-上机样品中甲隔的浓度，单位为微克每毫升（|ig/nil）； co-空白样品中甲醛的浓度，单位为微克每毫升（pig/ml）； v-样品的体积，单位为毫升（ml）；25 -样品最终定容体积为25毫升（ml）o两次平行测定结果用算术平均值表示，结果保留至小数点后两位。表1.本底样品的检测结果牛奶木底样品编号峰面积334863400333953检出浓度（mg/l）0.1960.2010.2000.199平均值（mg/l）相对标准偏差（）1.38甲醛上机浓度均小于10 |imol/l （30

12、0 ng/ml ）表2甲醛添加水平1.08 mg/l的检测结果编号123加标浓度（|ig/ml）10.8加标体积（ml）0.5添加水平（mg/l）1.08峰面积131977131626132159检出浓度（mg/l）1.2151.2121 217本底浓度（mg/l）0.199冋收率（）94.0793.7594.26平均值（）94.03相对标准偏差（）0.27表3.甲醛添加水平0.43mg/l的检测结果编号123加标浓度（yg/ml）10.8加标体积（ml）0.2添加水平（mg/l）0.43峰面积749807365772399检出浓度（mg/l）0.6250.6110.598本底浓度（mg/l）

13、0.199回收率（）99.0595.8792.84平均值（）95.92相对标准偏差（）3.2甲醛上机浓度 10 |imol/l (0.3 |ig/ml)至 250 |imol/l (7.5 |ig/ml)表4.甲醛添加水平2.16mg/l的检测结果编号123加标浓度(pg/ml)10.8加标体积(ml)1添加水平(mg/l)26峰面积233358232960234097检出浓度(mg/l)2.2642.2602.272本底浓度(mg/l)0.199回收率()95.6095.4295.97平均值()95.66相对标准偏差()0.30表5.甲醛添加水平4.32mg/l的检测结果编号123加标浓度(

14、|ig/ml)10.8加标体积(ml)2添加水平(mg/l)4.32峰面积425572426346421782检出浓度(mg/l)4.2534.2614.214本底浓度(mg/l)0.199冋收率()93.8494.0392.94平均值()93.60相对标准偏差(%)0.62表6甲醛添加水平8.64 mg/l的检测结果编号123加标浓度(|ig/ml)10.8加标休积(ml)4添加水平(mg/l)8.64峰面积803353808795807248检出浓度(mg/l)1.63251.64371.6405本底浓度(mg/l)0.199回收率()92.1692.8292.63平均值（）92.54相对

15、标准偏差（）0.36表7甲醛添加水平10.8mg/l的检测结果编号123加标浓度（|ig/ml）10.8加标休积（ml）5添加水平（mg/l）10.8峰而积100974110150471016381检出浓度（mg/l）10.29810.35310.367本底浓度（mg/l）0.199回收率（）93.5194.0194.15平均值（）93.89相对标准偏差（）0.36实验数据表明本方法测定甲醛，冋收率为80%120%,所得数据与标准值相 比，其标准偏差在允许范围以内，说明该方法对甲醛不同含量的甲醛均有较好的 准确度。3.3方法的精密度测定选择生鲜牛奶，按本方法确定的条件进行重复性试验，其相对标准偏差三10%, 试验结果见表38。（以上测量值均无需减去试剂空白）。说明用木方法测定甲醛的 含量冇较好的精密度、重复性。表8甲醛检测精密度测定（重复性实验）生鲜牛乳样品编号峰面积检出浓度（|ig/ml）平均值（|ig/ml）相对标准偏差（）1 232444334550.0370 0.03903433940329840.04000.03810.03893.215633567340450.0393 0.04034参考文献tn程春梅，朱军辉.食品屮甲醛的来源及其检测方法研究进