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文档简介

1、精选学习资料 - - - 欢迎下载分子生物学1 dna的一级结构:指dna分子中核苷酸的排列次序;2 dna的二级结构: 指两条 dna单链形成的双螺旋结构.三股螺旋结构以及四股螺旋结构;3 dna的三级结构:双链dna进一步扭曲回旋形成的超螺旋结构;4 dna的甲基化: dna的一级结构中,有一些碱基可以通过加上一个甲基而被修饰,称为dna的甲基化;甲基化修饰在原核生物dna中多为对一些酶切位点的修饰,其作用为对 自身 dna产生爱护作用;真核生物中的dna甲基化就在基因表达调控中有重要作用;真 核生物dna 中,几乎全部的甲基化都发生于二核苷酸序列5 -cg-3 的c 上,即 5 -mcg

2、-3 .5 cg岛:基因组 dna中大部分 cg二核苷酸为高度甲基化的 、 但有些成簇的. 稳固的非甲基化的 cg小片段 、 称为 cg岛、 存在于整个基因组中; “ cg”岛特点为 g+c含量高以及大部分 cg二核苷酸缺乏甲基化;6 dna双螺旋结构模型要点:( 1)dna为反向平行的互补双链结构;( 2)dna双链为右手螺旋结构;螺旋每旋转一周包含了10 对碱基,螺距为3.4nm. dna双链说形成的螺旋直径为2 nm;每个碱基旋转角度为36 度; dna双螺旋分子表面存在一个大沟和一个小沟,目前认为这些沟状结构与蛋白质和dna间的识别有关;( 3)疏水力和氢键维系dna双螺旋结构的稳固;

3、dna双链结构的稳固横向依靠两条链 互补碱基间的氢键维系,纵向就靠碱基平面间的疏水性积累力维护;7 核小体的组成:染色质的基本组成单位被称为核小体,由dna和 5 种组蛋白h1、h2a、h2b、h3 和 h4 共同构成;各两分子的h2a、h2b、h3 和 h4 共同构成八聚体的核心组蛋白,dna双螺旋缠绕在这一核心上形成核小体的核心颗粒;核小体的核心颗粒之间再由dna和组蛋白h1 构成的连接区连接起来形成串珠样结构;8 顺反子( cistron):由结构基因转录生成的rna序列亦称为顺反子;9 单顺反子( monocistron):真核生物的一个结构基因与相应的调控区组成一个完整的基 因,即一

4、个表达单位,转录物为一个单顺反子;从一条mrna只能翻译出一条多肽链;10多顺反子 polycistron:原核生物具有操纵子结构,几个结构基因转录在一条mrna链上,因而转录物为多顺反子;每个顺反子分别翻译出各自的蛋白质;11原核生物mrna结构的特点 :(1) 原核生物mrna往往为多顺反子的,即每分子mrna带有几种蛋白质的遗传信息;( 2) mrna 5端无帽子结构,3端无多聚a 尾;( 3) mrna一般没有修饰碱基; 12真核生物mrna结构的特点:7( 1) 5端有帽子结构;即7甲基鸟嘌呤三磷酸鸟苷mgpppn;( 2) 3端大多数带有多聚腺苷酸尾巴;( 3)分子中可能有修饰碱基

5、,主要有甲基化;( 4)分子中有编码区和非编码区; 14 trna的结构特点( 1) trna为单链小分子;( 2) trna含有很多稀有碱基;( 3) trna的 5端总为磷酸化,5末端核苷酸往往为pg.( 4) trna的 3端为 cca oh序列;为氨基酸的结合部位;( 5)trna 的二级结构外形类似于三叶草,含二氢尿嘧啶环 ( d环).t 环和反密码子环;精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载( 6) trna的三级结构为倒l 型; d环和 t 环在 l 的拐角上;15 rrna( 1) rrna 为细胞内含量最丰富的rna,它们与核糖体蛋白共同构成核糖体,后者为蛋白质合成的

6、场所;( 2)核糖体和rrna 一般都用沉降系数s 表示大小;原核生物核糖体的沉降系数为70s, 由 50s 和 30s 两个大小亚基组成,30s 小亚基含有16srrna和 21 种蛋白质; 50s大亚基含有23s 和 5srrna以及 34 种蛋白质;真核生物沉降系数为80s,由大小亚基组成; 40s 小亚基含有18srrna 和 30 多种蛋白质;60srrna 含有 5s.5.8s和 28srrna 以及大约45 种蛋白质;16核酶( ribozyme ):某些 rna分子能催化自身或其他rna分子进行化学反应,即具有酶样的催化活性, 这类具有催化活力的rna称为核酶; 核酶分为3 类

7、: 1异体催化的剪切型;( 2)自体催化的剪切型( 3)内含子的自我剪切型;17核内不均一 rna(hnrna):真核生物转录生成的 mrna前体即为 hnrna;这类 mrna前体必需经过一系列的加工处理才能变成成熟的 mrn;a 加工过程的主要环节包括: ( 1)5端加帽 (2)3端加尾 ( 3)内含子的切除和外显子的连接 ( 4)分子内部的甲基化修饰( 5)核苷酸序列的编辑作用;18 mirna: 为一种单链小分子rna,广泛存在于真核生物中,为一组不编码蛋白质的短序列 rna,其特点就为高度的保守性.时序性和组织特异性;讨论说明 mirna可能打算组织和细胞的功能特异性,也可能参与了复

8、杂的基因调控,对组织的发育起重要作用;19 sirna:小干扰 rna;为人工合成的短的双链rna,它可抑制细胞内特定基因的表达,导致转录后基因失活;sirna 为 rnai 的重要工具;20反义 rna:碱基序列正好和有意义 mrna互补的 rna称为反义 rna;这类 rna也为单链 rna,可与 mrna配对形成双链, 最终抑制 mrna作为模板进行翻译, 这为反义 rna主要的调控功能;21顺式作用元件(cis-acting element):真核生物基因中的调控序列被称为顺式作用元件、 包括:启动子和上游启动子元件,增强子,反应元件,polya 加尾信号;22增强子( enhance

9、r ):为一段短的dna序列,其中含有多个作用元件,可以特异性与转录因子结合,增强基因的转录活性;增强子可以位于基因的任何位置,增强子的功能与其位置和方向无关;23基因:为核酸分子中贮存遗传信息的遗传单位,为指贮存有功能的蛋白质多肽链或rna序列信息及表达这些信息所必需的全部核苷酸序列;一个基因不仅仅包括编码蛋白质肽链或 rna的核酸序列,仍包括保证转录所必需的调控序列及位于编码区5端上游的非编码序列,内含子和位于编码区3端下游的非编码序列;24基因组:泛指一个细胞或病毒的全部遗传信息;在真核生物体中,基因组为指一套完整单倍体 dna和线粒体dna的全部序列,既包括编码序列,也包括非编码序列;

10、25病毒基因组包括:单链正股rna,单链负股rna,双链 rna,双链 dna和单链正股dna;26 sars冠状病毒属于:单链正股rna病毒; 逆转录病毒属于:单链正股rna病毒;27逆转录病毒基因组包括三个结构基因:gag.pol 和 env ;分别编码: 核心蛋白.逆转录酶和膜蛋白 ;28操纵子( operon ): 为指数个功能上相关联的结构基因串联在一起,构成信息区,连同其上游的调控区(包括启动子和操纵序列)和下游的转录终止信号所构成的基因表达单 位,所转录的rna为多顺反子;29质粒:为存在于细菌染色体之外的.具有自主复制才能的环状双链dna分子;30质粒的不相容性:具有相同复制起

11、始位点和安排区的两种质粒不能共存于一个宿主菌,精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载这种现象称为质粒的不相容性;31转座因子: 既可移动的基因成分,为指能在一个dna分子内部或两个dna分子之间移动的 dna片段;原核生物的转座因子包括:插入序列.转座子和mu噬菌体 ;32插入序列 :为一类较小的没有表型效应的转座因子,由一个转位酶基因及两侧的反向重复序列组成;33转座子:为一类较大的可移动成分,除有关转座的基因外,至少带有一个与转座作用无关的并打算宿主菌遗传性状的基因;34断裂基因: 真核生物的结构基因,由如干个编码区和非编码区相互间隔而又连续镶嵌而成,去除编码区再连接后,可翻译出由

12、连续氨基酸组成的完整蛋白质这些基因称为断裂 基因;35 snrna:核内小 rna,分子中尿嘧啶含量最丰富;snrna和核内蛋白质组成小分子核糖核 蛋白体,作为rna剪接的场所;36启动子:能够被rna 聚合酶识别并结合并起始转录的核苷酸序列;典型的启动子包括tata 盒 , caat 盒 和 gc 盒 ;37反应元件:一些信息分子的受体被细胞外信息分子激活后,能与特异的dna 序列结合,调控基因的表达;这些特异的dna序列实际上也为顺式元件,由于能介导基因对细胞外的某种信号产生反应,被称为反应元件;38基因家族:指核苷酸序列或编码产物的结构具有肯定程度同源性的一组基因;39端粒 dna重复序

13、列: ttagg;g 微卫星 dna常见重复单位 ac 和( tg);40卫星 dna:为显现在非编码区的串联重复序列;其特点为具有固定的重复序列,该重复单位首尾相连形成重复序列片段,通常存在于间隔dna和内含子中;卫星dna可分为大卫星 dna.小卫星dna和微卫星dna;41端粒: 以线性染色体形式存在的真核基因组dna的末端都有一种特殊的结构,端粒;该结构为一段dna序列和蛋白质形成的一种复合体,仅在真核细胞染色体末端存在;端粒的功能主要有:爱护线性dna的完整复制,爱护染色体末端及打算细胞的寿命等;42alu 家族:序列中有限制性内切酶alu 的酶切位点; 重复单位为300bp. 属短

14、散在核元件,为灵长类基因组所特有;43假基因:为指与某些有功能的基因结构相像,但不能表达基因产物的基因;44人类基因组的四张图谱:遗传图.物理图.序列图和转录图;遗传图指基因或dna标记在染色体上以遗传距离表示的相对位置;物理图指基因或dna标记间的实际距离;序列 图指人类基因组的全部核苷酸序列,也为最详尽的物理图;转录图指基因图谱;45端粒酶:由三部分组成,端粒rna,端粒酶逆转录酶,端粒酶协同蛋白;端粒酶兼有供应 rna模版和催化逆转录酶的功能;端粒酶通过一种爬行模型的机制维护染色体的完整;46. 半保留复制:子代细胞的dna,一股单链从亲代完整的接受过来,另一股单链就完全重 新合成, 两

15、个子细胞的dna都和亲代 dna碱基序列一样, 这种复制方式称为半保留复制;47. 半不连续复制:顺着解链方向生成的子链,复制为连续进行的,这股链称为领头链;另一股链由于复制方向与解链方向相反,不能顺着解链方向连续延长,必需等模板链解开 至足够长度,然后从5 -3 生成引物并复制子链;延长过程中,又要等待下一段有足够长度的模板再次生成引物而延长;这股不连续复制的链称为随从链;领头链连续复制 而随从链不连续复制,这就为复制的半不连续复制;48. 冈崎片段: 随从链的复制由于与解链方向相反,必需待母链解开足够长度后才开头生成引物接着延长;复制中形成的不连续复制片断就为冈崎片段;49. 滚环复制:

16、为某些低等生物或染色体外的dna的复制形式; 环状 dna外环打开, 伸出环外作母链复制,内环不打开一边滚动一边复制;最终,一个双链环就滚动复制成两个双精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载链环;50. tt 二聚体:在紫外线照耀下,相邻的两个dna分子上的嘧啶碱基之间共价结合而成的;51. 着色性干皮病: 为由于 dna损耗修复有缺陷而造成的一种遗传性疾病,患者有较高的皮 肤癌发病倾向; 对该病的讨论, 发觉了一些与切除损耗部位有关的蛋白质,称为 xp蛋白;52. 切除修复: dna损耗修复的一种方式;通过切除损耗部位,剩下的间隙由dna-pol i 催化 dntp聚合而填补,最终由

17、dna连接酶结合裂隙;切除损耗在原核生物需uvr 蛋白类,真核生物需xp 蛋白类;53. 光修复: 生物体内有一种光修复酶,被光激活后能利用光所供应的能量使紫外线照耀引起的嘧啶二聚体分开,复原原先的非聚合状态,称为光修复;54. dna 损耗的修复类型:光修复.切除修复.重组修复和sos修复 ;55. 重组修复时,reca 蛋白被激活,使得lexa 蛋白被水解;56. 突变的分子转变类型:( 1) 错配 :dna 分子上的碱基配对又称点突变;(2) 缺失, 插入和框移 :缺失和插入都可以导致框移突变;框移突变 为指三联体密码的阅读方式转变,造成蛋白质氨基酸排列次序发生转变,其后果为翻译出的蛋白

18、质可能完全不同;( 3) 重排 : dna分子中较大片断的交换,称为重组或重排;57. 点突变分为: 转换 和颠换 ;转换为指由一种嘧啶变成另一种嘧啶,或一种嘌呤变成另一种嘌呤;颠换为指由嘧啶变成嘌呤,或由嘌呤换为嘧啶;58. 突变的意义:(1) 突变为进化.分化的分子基础;(2) 只有基因型转变的突变;(3) 致死性的突变;(4) 突变为某些疾病的发病基础;59. d 环复制:为线粒体dna的复制形式;复制时需合成引物;mtdna为双链,第一个引 物以内环为模板延长;至其次个复制起始点时,又合成另一个反向引物,以外环为模板进行反向的延长,最终完成两个双链环状dna的复制;60. 逆转录酶有三

19、种活性:(1) rna 指导的 dna聚合酶活性;(2) dna 指导的 dna聚合酶活性;(3) rna 酶 h( rnaseh)活性;61. rna 复制:为指某些病毒在宿主细胞中以自身rna为模板,以宿主细胞中的4 种 dntp为原料,按5 - 3方向催化合成互补的rna链,此过程称为rna复制;62. 逆转录:为指以rna为模板,利用宿主细胞中4 种 dntp为原料,按5 - 3方向催化合成与 rna互补的 dna链的过程;63. 逆转录病毒复制过程:( 1)逆转录酶以rna为模板,催化dntp聚合生成dna互补链,产物为rna/dna杂化双 链;( 2)杂化双链中的rna被逆转录酶中

20、有rna酶活性的组分如rnaseh水解 .(3) 利用单链dna为模板,由逆转录病毒催化合成第2 条 dna互补链;64. klenow片断具有: dna聚合酶活性 和 3 - 5核酸外切酶活性;65. dna pol i的功能:对复制中的错误进行较读,对复制和修复中显现的间隙进行填补;66. dna复制的保真性依靠的机制:( 1)遵守严格的碱基配对规律;精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载( 2)聚合酶在复制延长中对碱基的挑选功能;( 3)复制出错时有即时的较读功能;67. 引发体:解螺旋酶,dnac蛋白,引物酶和dna起始复制区域组成;68. 拓扑异构酶作用:( 1)拓扑酶i切断

21、 dna双链中的一股,使dna解链旋转中不致打结,适当时候又把切 口封闭,使dna变为放松状态;反应不需atp;( 2)拓扑酶 ii 在无 atp时,切断处于正超螺旋的 dna分子双链某一部位,断端通过切口使超螺旋放松;在利用 atp功能的情形下,放松状态的 dna又进入负超螺旋状态,断端在同一酶催化下连接复原;69复制和转录的异同: 相像之处:( 1)都为酶促的核苷酸聚合反应;( 2)都以 dna为模板;( 3)都需依靠 dna的聚合酶;( 4)聚合过程中都为核苷酸之间形成磷酸二酯键;( 5)都从 5 -3 方向延长聚核苷酸链;( 6)都遵从碱基配对规律;区分:(1)模板;复制:两股链均复制

22、;转录:不对称转录;(2)原料;复制: dntp;转录: ntp;(3)酶; 复制: dna聚合酶;转录: rna聚合酶;(4)产物;复制:子代双链 dna(半保留复制) ;转录: mrna、 rrna、 trna.(5)碱基配对;复制: a-t ,c-g;转录: a-u,g-c, t-a;.70真核生物rna聚合酶转录产物和对鹅膏蕈碱的反应;(1) rna-pol i:转录产物:45s-rrna 对鹅膏蕈碱的反应:耐受;(2) rna-pol ii: 转录产物: hnrna对鹅膏蕈碱的反应:极敏锐;(3) rna-pol iii: 转录产物: 5s-rna、 trna , snrna. 对鹅

23、膏蕈碱的反应:中度敏锐;71. 转录: 以 dna一条链为模板,以四种ntp为原料,在dna指导的聚合酶作用下,依据碱基互补原就(a-u、t-a、g-c )合成 rna链的过程;72. 不对称转录:转录时由于(1) dna 分子双链一股链用作模板指引转录,另一股链不转录;( 2) 模板链并非总为在同一条链上;故称为不对称转录;73. 原核生物聚合酶组成:由四种亚基组成 2 五聚体的蛋白质;其中 2 亚基称为核心酶; 因子辨认起始点; 打算哪些基因被转录; 起催化作用; 起结合 dna模板(开链)作用;74操纵子:转录为不连续.分区段进行的;每一转录区段可视为一个转录单位,称为操纵子;操纵子包括

24、如干个结构基因及其上游的调控序列;调控序列中的启动子为rna聚合酶结合模板dna的部位,也为掌握转录的关键部位;75电子显微镜下观看到的羽毛状的图形说明:在同一 dna模板上, 有多个转录同时在进行;在 rna链上观看到的小黑点为多聚核蛋白体 ;转录和翻译都在高效率的进行;76转录空泡:由酶 -dna-rna形成的转录复合物;77 依靠 因子的转录终止:因子为由相同亚基组成的六聚体,它为原核生物转录终止因子;可结合转录产物rna 3端的多聚c 特殊序列,仍有atp 酶和解螺旋酶活性;因子与转录产物rna 3端精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载的多聚 c 结合后, 因子和 rna聚合

25、酶都发生构象转变,从而使rna聚合酶停顿,解螺旋酶活性使dna和 rna杂化双链拆离,转录产物从转录复合物中释放;78 非依靠 因子的转录终止:rna 链延长至终止区时,转录出的碱基序列立即形成茎环结构 ;这种二级结构为阻挡转录连续向下游推动的关键;其机制有两方面:一为茎环结构在rna分子形成可能转变rna聚合酶的构象;由于酶构象的转变导致酶模板结合方式的转变,可使酶不再向下游移动,于为转录停顿;其二,转录复合物(酶dna-rna)上有局部的rna/dna杂化双链; rna分子和 dna分子都要形成自己的双链,杂化链形成的机会不大,原来不稳固的杂化链更不稳固,转录复合物趋于解体;接着 一串寡聚

26、u 为使 rna链从模板脱落的促进因素,由于全部的碱基配对中以u和 a 的配对最不稳固;79 tfii的功能:tfiid: tbp( tata结合蛋白)结合tata盒; taf( tbp帮助因子)帮助tbp-dna结合; tfiia:稳固 iid-dna 复合物;tfiib:促进 rna-pol ii结合及作为其他因子结合的桥梁;tfiif:解螺旋酶tfiie: atpasetfiih:蛋白激酶活性;80转录起始前复合物(pic):为真核生物转录因子之间先相互辨认结合,然后以复合体的 形式与 rna聚合酶一同结合于转录起始前的dna区域而成;81真核生物mrna转录终止及加尾修饰真核生物 mr

27、na转录终止后, 紧接着发生加尾修饰;过程如下 : 在模板链上转录终止点上 游约百个或上千个核苷酸处常有一组共同的序列aataaa;此序列后接着相当多的gt序列;这些序列称为转录终止的修饰点;转录越过修饰点后,mrna在修饰点被切断,随 即加入 poly a尾及帽子结构;下游的rna虽然连续转录,但很快被rna酶降解;因此有理由信任, 帽子结构为爱护rna免受降解的, 由于修饰点以后的转录产物无帽子结构;82外显子:在断裂基因及其初级转录产物上显现,并表达为成熟rna的核酸序列;83内含子:隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列;84人类最巨大的一个基因为:抗肌萎缩蛋白基因;85剪接

28、体: 为由 snrnp与 hnrna结合, 使内含子形成套索并拉近上下游外显子距离的复合体;剪接体为mrna剪接的场所;剪接过程的化学反应称为二次转酯反应 ;86 mrna编辑:通过对mrna中的加工,使遗传信息在mrna水平上发生转变;87 trna的转录后加工:( 1) trna 前体的剪接;先由核酸内切酶进行催化进行剪切反应,再由连接酶将外显子连接起来;( 2)加上 3端 cca-oh;( 3)化学修饰;包括:甲基化反应 ,使某些嘌呤变成甲基嘌呤;仍原反应 ,使某些尿嘧啶仍原成双氢尿嘧啶(dhu); 转位反应 ,尿嘧啶核苷转变为假尿嘧啶核苷( ); 脱氨反应 ,某些腺苷酸脱氨成为次黄嘌呤

29、核苷酸(i ) ;88 rrna的转录后加工( 1)rrna 前体的剪接 ;45s-rrna 经剪接后,分出属于小亚基的18s rrna,余下的部分再剪接成5.8s、28s rrna ;rrna 成熟后,就在核仁上装配,与核蛋白体蛋白质 一起形成核蛋白体,输出胞浆;精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载( 2)化学修饰 . 主要为甲基化反应;89. 开放阅读框架(orf):从 mrna5端起始密码子aug到 3端终止密码子之间的核苷酸序列,各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链,称为开放阅读框架;90遗传密码的特点:( 1) 连续性 ;编码蛋白质氨基酸序列的各个三联体密码连续阅读;

30、( 2) 简并性 ;除甲硫氨酸和色氨酸外,其他氨基酸都有2 个或多个密码子为之编码,密码子中第三位碱基为可以不同的,这称为密码子的简并性;( 3) 通用性 ;蛋白质生物合成的整套密码,从原核生物到人类都通用;( 4) 摇摆性 ;反密码与密码之间不严格遵守常见的碱基配对规律,特殊为密码子的第三位碱基对反密码子的第一位碱基,即使不严格配对也能辨认配对,这种现象称为摇摆配对;91原核生物翻译起始复合物形成:( 1)核蛋白体亚基分别;核蛋白体大小亚基分别;if-1、if-3与小亚基结合,促进大小亚基分别;( 2)mrna在小亚基定位结合;原核生物mrna在小亚基定位涉及两种机制;其一 ,在各种原核 m

31、rna起始 aug上游约 8 13 核苷酸部位, 存在 4 9 个核苷酸的一样序列,富含嘌呤碱基如aggag,g称为 s-d 序列;而原核小亚基16s rrna 的 3端有一段富含嘧啶的段序列如uccuc,c通过与 s-d 序列碱基配对使mrna与小亚基结合; s-d 序列又称核蛋白体结合位点(rbs);其二 , mrna上紧接 s-d 序列后的小核苷酸序列可被核蛋白体小亚基蛋白rps-1识别结合;fmet( 3)起始氨基酰 trna 的结合; 起始 fmet-trna i和 gtp结合的 if-2一起, 识别结合对应小亚基p 位的 mrna起始密码 aug,起始时a 位被 if-1占据,不与

32、任何氨基 酰 trna结合;fmet( 4)核蛋白体大亚基结合;上述结合mrna.fmet-trna i的小亚基再与核蛋白体大亚 基结合, 同时 if 2 结合的 gtp水说明能, 促使 3 种 if 释放, 形成由完整核蛋白fmet体. mrn.a 起始氨基酰trna 组成的翻译起始复合物;此时,结合起始密码aug 的 fmet-trna i占据 p 位,而 a 位空留,对应mrna上 aug后的下一组三联体密 码,预备相应氨基酰trna的进入;92肽链的延长;( 1)进位;核糖体a 位上 mrna密码子所规定的氨酰trna 进入核糖体a 位上称为进位;这一过程需延长因子ef t 的参与;

33、延长因子有三种:1 ef-tu.功能:帮助氨基酰trna 进入核糖体;与氨基酰trna 以及 gtp结合形成 ef-tu-gtp- 氨基酰 -trna、 将氨基酰 -trna 转运到核糖体的a 位;2 ef-ts.功能:促进ef-tu-gtp 的再生; ef-tu-gtp 在参与一轮核糖体循环后转变为 ef-tu-gdp, ef-ts 使 ef-tu-gdp再转变成ef-tu-gtp,后者可被再利用;精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载3 ef-g. 功能:促进肽酰-trna 移位;促进mrna肽-进 trna 的释放;酰 -trna 由 a 位移到 p 位,促精品学习资料精选学习资

34、料 - - - 欢迎下载2成肽; 在转肽酶的催化下,p 位上的肽酰基与a 位上的氨基酰基成肽,成肽反应在a位进行,卸载的trna仍在 p 位;( 3)转位;在转位酶的催化下, 新生肽链 -trna 连同 mrna从 a 位移到 p 位,而卸载的trna移入 e 位; a 位空留并对应下一组三联体密码;93终止因子:又称释放因子(rf);其功能为识别mrna上的终止密码子,终止肽链的合成 并释放出肽链;原核生物中释放因子为rf-1、rf-2、rf-3. rf-1识别密码子uaa 及 uag, rf-2 能识别 uaa及 uga;rf-3 结合 gtp,并能促进rf-1、rf-2与核糖体精品学习资

35、料精选学习资料 - - - 欢迎下载结合;94原核肽链终止过程:肽链延长到mrna终止密码在核蛋白体a 位显现,终止密码子不能被任何氨基酰-trna 识别进位; rf-1、rf-2进入 a 位,识别结合终止密码;rf-1 或 rf-2 任一释放因子结合终止密码后都可触发核蛋白体构象转变,诱导转肽酶转变为酯酶活性; 使新生肽链与结合在p 位的 trna 间酯键水解, 将合成的肽链释出;再促使 mrn.a 卸载 trna 及 rf从核蛋白体脱离;rf-3 有 gtp酶活性,能介导 rf-1、rf-2与核蛋白体的相互作用;95分子伴侣: 分子伴侣为细胞中的一类保守蛋白质,可识别肽链的非自然构象,促进

36、各功能域和整体蛋白质的正确折叠;细胞中至少有两类分子伴侣家族:热休克蛋白和伴侣素;96蛋白质合成后的加工:( 1) 新生肽链的折叠;( 2)一级结构的修饰;包括: 肽链 n 端的修饰 ,个别氨基酸的修饰,多肽链的水解修饰;( 3) 空间结构的修饰;包括: 亚基聚合 ,辅基连接 , 疏水脂链的共价连接;97起始因子 :(1) if-1.能促进 if-2 .if-3的活化;(2) if-2.促进 fmet-trna i fmet 与 30s 小亚基结合的作用,并具有gtp酶活性;(3) if-3.功能为使30s 亚基从不具活性的核糖体释放,帮助mrna与小亚基结合,并阻挡大小亚基重新聚合;98信号

37、假说机制:这一假说认为,分泌性蛋白初级产物的n-端有信号肽结构;在分泌性蛋白合成中,信 号肽一显现, 就被信号肽识别粒子与其受体对接蛋白结合,促使膜通道开放,信号肽带动合成中的蛋白质沿通道穿过膜,信号肽在沿通道折回膜内时,被位于膜外侧的信号肽酶切断,使成熟的蛋白质释放到细胞外;99抗生素类作用位点:四环素类:作用于核蛋白体小亚基,抑制氨基酰-trna 与小亚基结合;链霉素.卡那霉素:作用与核蛋白体小亚基,转变构象引起读码错误;氯霉素:作用与核蛋白体大亚基;抑制转肽酶,阻断延长;红霉素:作用与核蛋白体大亚基;抑制转肽酶,阻碍转位;放线菌酮:作用与真核核蛋白体大亚基;抑制转肽酶,阻断延长;嘌呤霉素

38、:作用与真核.原核核蛋白体;属氨基酰-trna 类似物,进位后引起未成熟肽链脱落;100 白喉毒素作用机制:可使真核生物延长因子eef-2 发生 adp糖基化而失活;干扰素作用机理:(1)诱导特异蛋白激酶活化,该活化的激酶使真核主要的起始因子eif2 磷酸化失活,从而抑制病毒蛋白质的合成;(2)干扰素与双链rna共同活化 2 - 5a合成酶,2 - 5a可活化核酸内切酶rnasel,后者使病毒mrna降解,阻断病毒蛋白质合成;101. 管家基因:有些基因产物对生命全过程都为必不行少的;这类基因在一个生物个体的几乎全部细胞中连续表达,通常称为管家基因;管家基因的表达水平受环境因素影响很小,而为在

39、个体各个生长阶段的大多数.或几乎全部组织中连续表达,或变化很小;这类基因表达称为 基本(或组成性)基因表达 ;102诱导:可诱导基因在肯定环境中表达增强的过程称为诱导;精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载阻遏:可阻遏基因表达产物水平降低的过程称为阻遏;103基因表达调控的生物学意义:( 1)适应环境.维护生长和增殖;( 2)维护个体发育与分化; 104原核生物转录的影响因素:( 1)启动子;启动子打算转录的效率和方向;( 2) 因子;( 3)阻遏蛋白具有负调控作用;( 4)正调控蛋白促进基因的转录;( 5)倒位蛋白通过dna重组倒位而调剂基因表达;倒位蛋白 为一种位点特异性的重组酶;

40、( 6) rna聚合酶抑制物可与rna结合并抑制转录;( 7)衰减子;105衰减子( attenuator): 细菌中 mrna转录和翻译为偶联在一起的;这一特点使细菌中 的一些操纵子的特殊序列可以在转录过程中掌握转录水平;这些特殊序列称为衰减子;106乳糖操纵子( 1)乳糖操纵子的结构:含有 z. y.a 三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶.透酶和乙酰基转移酶;此外,含有一个操纵基因o,一个启动序列p,一个 cap结合位点和一个基因i ;i 基因编码一种阻遏蛋白,与操纵基因o结合;启动序列p.操纵序列o和 cap结合位点组成乳糖操纵子的调控区;( 2)阻遏蛋白的负性调控作用:1当有乳糖存在时,

41、 乳糖通过 半乳糖苷酶变为半乳糖,再经透酶进入细胞内;真正的诱导剂为半乳糖而不为乳糖;乳糖可与阻遏蛋白结合,导致阻遏蛋白与操纵序列 o解离,启动基因转录;2当没有乳糖存在时,没有诱导剂与阻遏蛋白结合,阻遏蛋白与操纵序列o结合,发挥负性调控作用,基因不转录;( 3) cap的正性调控作用:1当没有葡萄糖及camp浓度较高时, camp和 cap结合紧密, 此时 cap结合在 cap结合位点,刺激rna转录活性;2当有葡萄糖存在及camp浓度较低时, camp和 cap结合受阻,因此lac操纵子表达下降;( 4)和谐调剂:1 当葡萄糖存在,乳糖存在时:尽管乳糖作为诱导剂和阻遏蛋白结合,使阻遏蛋白与

42、操纵序列o解离;但由于camp浓度较低, camp和 cap结合受阻,基因处于关闭状态;2 当葡萄糖存在,乳糖不存在时:此时无诱导剂存在,阻遏蛋白与dna结合;而且由于葡萄糖的存在,cap也不能发挥正性调控作用,基因处于关闭状态;3 当葡萄糖和乳糖都不存在时:cap可以发挥正性调控作用,但由于没有诱导剂,阻遏蛋白的负调控作用使基因仍处于关闭状态;4当葡萄糖不存在,乳糖存在时:此时cap可以发挥正性调控作用,阻遏蛋白由于诱导剂的存在而失去复调控作用,基因被打开,启动转录;107色氨酸操纵子调控机制:(1) 当细胞内色氨酸增多时,结构基因转录受到抑制;衰减子转录物有4 段特殊序精品学习资料精选学习

43、资料 - - - 欢迎下载列;片段1 和 2, 2 和 3, 3 和 4 能配对形成发夹结构,形成发夹才能的强弱依次为片段 1/2> 片段 2/3> 片段 3/4 ;片段 3/4 所形成的发夹结构之后紧接着寡尿嘧啶,为不依靠 因子的转录终止信号;(2) 当细胞内有色氨酸存在时,形成色氨酰trna,核糖体编译可通过片段1 并通过片段 2,核糖体在到达片段3 之前就从mrna脱落;在这种情形下,片段1/2 和片段2/3都不能形成发夹结构,只有片段3/4形成发夹结构,即形成转录终止信号,从而导致 rna聚合酶作用停止;(3) 当细胞内没有色氨酸存在时,色氨酰trna 缺乏,核糖体停留在两

44、个相邻的色 氨酸密码子的位置上,片段 1/2 不能形成发夹结构,片段 2/3 之间形成形成发夹结构,就片段 3/4 之间就不能形成转录终止信号,后面的基因得以转录;108 sd序列: mrna起始密码子前的一段富含嘌呤核苷酸的核糖体结合位点;109原核翻译水平的调控:( 1) sd序列为影响翻译的重要因素;( 2) mrna的稳固性为调控翻译的方式之一;( 3)翻译产物也可以对相应mrna的翻译进行调控;( 4)小分子rna可以抑制特定mrna的翻译; 110真核生物基因表达在dna水平的调控主要通过以下几种方式:( 1)染色质丢失;( 2)基因扩增;( 3)基因重排;( 4) dna甲基化;

45、( 5)染色质结构可影响基因表达;111反式作用因子:真核细胞内有大量的序列特异的dna结合蛋白,其中一些蛋白的主要功能为使基因开放或关闭,称为反式作用因子;112转录起始复合物形成的步骤:( 1) tfiid 结合 tata盒;( 2) rna pol 识别并结合tfiid dna复合物;( 3)其他转录因子与rnapol 结合,转录起始部位的dna解链,形成转录起始复合物; 113反式作用因子的特点:( 1)一般具有三个功能结构域:dna结构域.转录活性域和结合其他蛋白的结合域;( 2)能识别并结合基因调控区中的顺式作用元件;( 3)对基因表达有正性和负性调控作用,即激活和阻遏基因的表达;

46、114锌指结构: 为指在结合dna结构域中含有较多的半胱氨酸cys 和组氨酸 his的区域,借肽链的弯曲使2 个 cys 和 2 个 his 或 4 个 cys 与一个锌离子络合成的指状结构; 115同源结构域:很多反式作用因子结合dna的结构域中有一段相同的保守序列;为由60个左右的氨基酸组成的螺旋回折螺旋结构的区域,称为同源结构域;116亮氨酸拉链: 有些反式作用因子结合dna结构域中有一段约30 个氨基酸组成的核心序列,每隔 6 个氨基酸有规律的显现1 个亮氨酸残基, 能形成两性 - 螺旋; 在螺旋的一侧为排列成行的亮氨酸,具有疏水性,称为亮氨酸拉链区;两个亮氨酸拉链区的单体以疏水作用形

47、成亮氨酸拉链;117反式作用因子dna结合域的结构模式:( 1)锌指结构;( 2)同源结构域;( 3)亮氨酸拉链;精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载( 4)螺旋环螺旋结构;( 5)碱性 螺旋;118转录活化结构域结构模型:( 1)酸性 螺旋结构域( 2)富含谷氨酰胺结构域( 3)富含脯氨酸结构域;119 mrna的挑选性剪接方式( 1)外显子挑选方式可保留或部分保留外显子;( 2)内含子挑选方式可删除或部分删除内含子;( 3)互斥外显子为指两个外显子不能同时被保留;( 4)内部剪切位点造成内含子或外显子的部分序列被切除或保留; 120翻译起始的调控( 1)阻遏蛋白的调控作用;( 2

48、)翻译起始因子的功能调控;( 3) 5 aug对翻译的调控作用;( 4) mrna非编码区长度对翻译的影响; 121翻译后水平的调控( 1)新生肽链的水解;( 2)肽链中氨基酸的共价修饰;( 3)通过信号肽分拣.运输.定位;122. 同源重组:为指发生在同源序列间的重组,它通过链的断裂和再连接,在两个dna分 子同源序列之间进行单链或双链片段的交换;又称基本重组;123 holliday模型:(1) 两个同源染色体dna排列整齐(2) 一个 dna的一条链断裂,并与另一个dna对应的链连接,形成holliday中间体;(3) 通过分支移动产生异源双链dna;(4) holliday中间体切开并

49、修复,形成两个双链重组dna;即片段重组体和拼接重组体;124细菌的基因转移:细菌中,可以通过接合.转化.转导和细胞融合四种方式,在不同dna分子间发生共价连接,即基因转移; 125接合作用:当细胞或细菌通过菌毛相互接触时,质粒dna可以从一个细胞(细菌)转移导另一个细胞(细菌),这种类型的dna转移称为接合作用; 126转化作用:通过自动猎取或人为的供应外源dna,使细胞或培育的受体细胞获得新的遗传表型,这就为转化作用;127转导作用:当病毒从被感染的细胞(供体)释放出来,再次感染另一细胞(受体)时, 发生在供体细胞和受体细胞之间的dna转移及基因重组即为转导作用;自然界常见的例子就为噬菌体

50、感染宿主时相伴发生的基因转移;当噬菌体感染宿主时会有两种结局,一为溶菌生长途径,二为溶源菌生长途径;128特异位点重组:由整合酶催化,在两个dna序列的特异位点之间发生的整合称为位点特异的重组;129重组 dna常用的工具酶1限制性核酸内切酶:识别特异序列,切割dna;2 dna连接酶3 dna聚合酶 i ;具有完整的5 - 3聚合, 3 - 5外切活性, 以及5- 3外切活性;用枯草杆菌蛋白酶可将dna聚合酶 i 裂解成两个片段, 大片段称为klenow 片段;具有精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载5 - 3聚合, 3 - 5外切活性,无5 - 3外切活性;klenow 片段用途

51、:( 1)在 cdna克隆中,其次股链的合成;( 2) dna序列分析;( 3)补齐双链dna的 3端;( 4)通过补齐3端,使3端标记;4 逆转录酶;5 碱性磷酸酶;能去除末端磷酸基;6 末端转移酶;在3羟基末端进行同聚物加尾;7 多聚核苷酸激酶;催化多聚核苷酸5羟基磷酸化,或标记探针; 130限制性核酸内切酶:就为识别dna的特异序列,并在识别位点或其四周切割双链dna的一类内切酶;131回文结构:大部分 ii类限制性核酸内切酶识别dna位点的核苷酸序列呈二元旋转对称,通常称这种特殊结构次序为回文结构;132 c 值 :基因组的大小常以其dna含量表示;单倍体基因组中的全部dna量称为 c

52、值;133作为克隆载体的质粒应具备:( 1)分子量相对较小,能在细菌中稳固存在,有较高的拷贝数;( 2)具有一个以上的遗传标志;( 3)具有多个限制性内切酶的单一切点,便于外源基因的插入;134常用作克隆的载体:质粒.噬菌体. m13 噬菌体.粘性质粒.病毒载体.酵母人工染色体和细菌人工染色体;135 dna 克隆:应用酶学的方法,在体外将各种来源的遗传物质与载体结合成一具有自我复制才能的dna分子复制子,继而通过转化或转染宿主细胞,挑选出含有目的基因的转化子细胞,再进行扩增.提取获得大量同一dna分子,即dna克隆;又称基因克隆;实现基因克隆所采纳的方法及相关工作称为基因工程或重组dna技术

53、;136基因克隆的步骤:( 1)目的基因的猎取;1 化学合成法;2 基因组dna文库;3 cdna文库;4 pcr;( 2)克隆载体的挑选和构建;( 3)外源基因和载体的连接;1 粘性末端连接;2 平端连接;3 同聚物加尾连接;4 人工街头连接;( 4)重组 dna导入受体细胞;1 转化 :为指将质粒或其他外源dna导入处于感受态的宿主菌,并使其获得新的表型的过程;2 感染 : 噬菌体. 粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组dna分子, 在体外包装成具有感染才能的病毒或噬菌体颗粒,然后才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增;3转染 :转染为转化和感染两个词构成的新词,指真核细胞主动摄取或被动导入外源dna 片段而获得新的遗传表型的过程;常用方法有:电穿孔法.磷酸钙共沉淀法和脂精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载质体融入法等;( 5)重组体的挑选;1 遗传学方法2 免疫学方法3 核酸杂交法4 pcr技术5 酶切鉴定( 6)克隆基因的表达137真核细胞转染的方法:( 1)磷酸钙共沉淀法2电穿孔法( 3) deae葡聚糖法( 4)脂质体介导基因转染( 5)显微注射法138重组 dna技术应用( 1)疾病基因的发觉和克隆( 2)生物制药( 3)基因诊断( 4)基因治疗( 5)遗

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