红细胞疾病的实验诊断(2008级7年制)

1、红细胞疾病的实验诊断红细胞疾病的实验诊断第一节概述第一节概述一、贫血定义一、贫血定义二、贫血程度二、贫血程度三、贫血分类三、贫血分类（一）按照红细胞大小分类（一）按照红细胞大小分类。o 贫血形态学分类：贫血形态学分类： 依据依据MCV、MCH、MCHC及外周血红细胞形态分类及外周血红细胞形态分类贫血的形态学分类MCV80- 94 flMCH26-32pgMCHC31-35%病 因正细胞性贫血80-9426-3231-35再障、急性失血、大多溶贫 白血病大细胞性贫血大于100大于3231-35巨细胞性贫血、营养性贫血恶性贫血小细胞性贫血单纯小性贫血小于80小于80小于26小于26小于30 31-

2、35缺铁性贫血、珠蛋白生成障 碍性贫血慢性感染、炎症、肝病、尿 毒症、恶性肿瘤等（二）按照骨髓增生程度（二）按照骨髓增生程度1 1、增生性贫血、增生性贫血2 2、增生不良性贫血、增生不良性贫血（三）病因和发病机制分类（三）病因和发病机制分类1 1、红细胞生成减少、破坏增多、红细胞丢失过、红细胞生成减少、破坏增多、红细胞丢失过量；量；2 2、缺铁性贫血；、缺铁性贫血；3 3、溶血性贫血。、溶血性贫血。第二节第二节 红细胞生成减少性贫血的实验室红细胞生成减少性贫血的实验室检测检测一、再生障碍性贫血一、再生障碍性贫血1 1、血象、血象2 2、骨髓象、骨髓象二、缺铁性贫血二、缺铁性贫血（一）血清铁（一

3、）血清铁(serum iron,SI(serum iron,SI) )测定与血清总铁结测定与血清总铁结合力合力(total iron binding capacity test,TIBC(total iron binding capacity test,TIBC) )测定测定（二）血清转铁蛋白（二）血清转铁蛋白(serum transferritin(serum transferritin) )和转和转铁蛋白饱和度铁蛋白饱和度(transferritin saturation,TS(transferritin saturation,TS) )测定测定（三）血清铁蛋白测定（三）血清铁蛋白测定(s

4、erum ferritin test,SF(serum ferritin test,SF) )成年男性成年女性体内铁总量5055mg/kg3540mg/kg分布：血红蛋白6670%6670% 肌红蛋白15%15% 细胞酶类1%1%贮存铁（以铁蛋白形式）7001000mg200400mg三、巨幼细胞性贫血三、巨幼细胞性贫血1 1、血清叶酸测定、血清叶酸测定2 2、血清维生素、血清维生素B12B12测定测定溶血性贫血溶血性贫血: :各种原因使红细胞生存时间缩短，破坏各种原因使红细胞生存时间缩短，破坏增多或加速，而骨髓代偿造血功能不足以补偿其损耗增多或加速，而骨髓代偿造血功能不足以补偿其损耗时所发生

5、的一类贫血。时所发生的一类贫血。正常正常RBCRBC生存时间为生存时间为120120天天, ,体内体内RBCRBC每天有每天有1/1201/120衰老衰老破坏。当破坏。当RBCRBC生存时间缩短生存时间缩短, ,破坏增加破坏增加, ,骨髓将代偿增骨髓将代偿增生以维持其平衡。正常人骨髓具有生以维持其平衡。正常人骨髓具有6-86-8倍代偿造血能倍代偿造血能力力, ,当溶血程度较轻当溶血程度较轻, ,骨髓造血代偿足以补偿红细胞的骨髓造血代偿足以补偿红细胞的损耗时损耗时, ,不出现贫血不出现贫血, ,为代偿性溶血病。如红细胞生存为代偿性溶血病。如红细胞生存时间短至时间短至15-2015-20天以下天以

6、下, ,破坏速度超过骨髓代偿能力破坏速度超过骨髓代偿能力, ,才才出现贫血出现贫血, ,称为溶血性贫血。称为溶血性贫血。溶血性疾病溶血性疾病溶血性贫血溶血性贫血溶血性贫血分类（病因分类）溶血性贫血分类（病因分类）RBCRBC内在缺陷内在缺陷: :膜结构与功能缺陷：遗传性球形膜结构与功能缺陷：遗传性球形RBCRBC增多症、增多症、椭圆形椭圆形RBCRBC增多症、阵发性睡眠性增多症、阵发性睡眠性HbHb尿等尿等;Hb;Hb珠蛋白肽链合珠蛋白肽链合成异常成异常: :量量- -海洋性贫血海洋性贫血, ,质质- -异常异常HbHb综合症综合症; ;代谢酶缺陷：代谢酶缺陷：ATPATP生成障碍至生成障碍至

7、RBCRBC寿命缩短、先天性非球型寿命缩短、先天性非球型RBCRBC贫血贫血. .RBCRBC外在环境异常外在环境异常: :自免疫性溶血病自免疫性溶血病; ;新生儿溶血病新生儿溶血病; ;溶血性病溶血性病原体：金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、疟疾等原体：金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、疟疾等; ;物理化因物理化因素和机械性破坏：脾亢、瓣膜移植、化学药物、蛇毒等素和机械性破坏：脾亢、瓣膜移植、化学药物、蛇毒等; ;异异型输血型输血血浆游离血浆游离HbHb检测检测RBCRBC内内HbHb游离至浆游离至浆游离游离HbHb主要见于血管内溶血主要见于血管内溶血血清结合珠蛋白检测血清结合珠蛋白检测游离游离Hb

8、Hb结合珠蛋白结合珠蛋白血红素血红素各种溶血时血清血清结合珠蛋白均有减低；各种溶血时血清血清结合珠蛋白均有减低；血管内溶血减低最显著；血管内溶血减低最显著；血浆高铁血红素清蛋白检测血浆高铁血红素清蛋白检测血浆游离血浆游离HbHb转变为高铁转变为高铁HbHb：高铁血红素清蛋白：高铁血红素清蛋白阳性表示为严重血管内溶血。阳性表示为严重血管内溶血。含铁血黄素尿试验（含铁血黄素尿试验（ROUSROUS试验）试验）HbHb经肾小管上皮细胞吸收后分解血红素为原卟啉经肾小管上皮细胞吸收后分解血红素为原卟啉+ +铁，铁，铁升高以含铁血红素形式沉积在上皮细胞内或游离在铁升高以含铁血红素形式沉积在上皮细胞内或游离

9、在细胞外排出，经普鲁士蓝反应染深蓝色，显微镜检查细胞外排出，经普鲁士蓝反应染深蓝色，显微镜检查可见。可见。慢性血管内溶血可呈持续阳性；慢性血管内溶血可呈持续阳性；常见于阵发性睡眠性血红蛋白尿。常见于阵发性睡眠性血红蛋白尿。RBCRBC寿命缩短寿命缩短正常红细胞半衰期为正常红细胞半衰期为25-3225-32天；天；溶血性贫血时常溶血性贫血时常150.50%,0.50%,完全溶血完全溶血0.38%; 0.38%; 见于遗传性球见于遗传性球形红细胞增多症。形红细胞增多症。脆性减低：海洋性贫血脆性减低：海洋性贫血温育后渗透脆性试验温育后渗透脆性试验较上试验敏感较上试验敏感, ,常用于轻症遗传性球形红细

10、胞增多症、遗传性非球常用于轻症遗传性球形红细胞增多症、遗传性非球形细胞溶血性贫血的诊断和鉴别诊断。形细胞溶血性贫血的诊断和鉴别诊断。脆性增加：见于遗传性球形红细胞增多症、遗传性椭圆形红细胞脆性增加：见于遗传性球形红细胞增多症、遗传性椭圆形红细胞增多症、遗传性非球形细胞溶血性贫血增多症、遗传性非球形细胞溶血性贫血; ;脆性减低：见于珠蛋白生成障碍性贫血、缺铁性贫血、镰形细胞脆性减低：见于珠蛋白生成障碍性贫血、缺铁性贫血、镰形细胞贫血、脾切除术后。贫血、脾切除术后。自身溶血及纠正试验自身溶血及纠正试验遗传性球形遗传性球形RBCRBC增多症、先天性非球形增多症、先天性非球形RBCRBC性溶贫的鉴性溶

11、贫的鉴别诊断。别诊断。遗传性球形红细胞增多症孵育后溶血明显增强，加入葡遗传性球形红细胞增多症孵育后溶血明显增强，加入葡萄糖及萄糖及ATPATP溶血均得到明显纠正；溶血均得到明显纠正；I I型先天性非球形红细胞性溶血性贫血（型先天性非球形红细胞性溶血性贫血（G-6- PDG-6- PD缺陷）缺陷）时自身溶血加重，加入葡萄糖及时自身溶血加重，加入葡萄糖及ATPATP溶血均得到明显纠溶血均得到明显纠正；正；II II型（丙酮酸激酶缺陷症型（丙酮酸激酶缺陷症) )自身溶血增强，加入葡萄糖孵自身溶血增强，加入葡萄糖孵育溶血不能纠正，只有加入育溶血不能纠正，只有加入ATPATP溶血才能纠正。溶血才能纠正。

12、三、红细胞酶缺陷的检测三、红细胞酶缺陷的检测参与红细胞代谢（主要是糖代谢）的酶由参与红细胞代谢（主要是糖代谢）的酶由于基因缺陷导致活性改变而发生溶血的一于基因缺陷导致活性改变而发生溶血的一组疾病。组疾病。常见酶缺陷：常见酶缺陷：G-6-PDG-6-PD缺陷缺陷PKPK缺陷缺陷常用检查试验常用检查试验高铁血红蛋白还原试验高铁血红蛋白还原试验红细胞红细胞G-6-PDG-6-PD缺陷时，高铁血红蛋白还原率明显下降；缺陷时，高铁血红蛋白还原率明显下降；主要见于蚕豆病和伯氨喹啉型药物溶血性贫血。主要见于蚕豆病和伯氨喹啉型药物溶血性贫血。氰化物氰化物- -抗坏血酸试验抗坏血酸试验红细胞红细胞G-6-PDG

13、-6-PD缺陷时，缺陷时，2-4h2-4h发生颜色改变；发生颜色改变；变形珠蛋白小体生成试验变形珠蛋白小体生成试验红细胞红细胞G-6-PDG-6-PD缺陷、不稳定缺陷、不稳定HbHb、HbHHbH病等增高；病等增高；葡萄糖葡萄糖-6-6-磷酸脱氢酶荧光斑点试验和活性测定磷酸脱氢酶荧光斑点试验和活性测定红细胞红细胞G-6-PDG-6-PD缺陷时，荧光很弱或无荧光；活性降低。缺陷时，荧光很弱或无荧光；活性降低。丙酮酸激酶荧光筛选试验和活性测定丙酮酸激酶荧光筛选试验和活性测定K K严重严重四、珠蛋白生成异常的检查四、珠蛋白生成异常的检查血红蛋白电泳血红蛋白电泳HbA2HbA2增高：是诊断增高：是诊断

14、- -轻型地中海贫血的重要依据轻型地中海贫血的重要依据; ; HbA2HbA2减低：见于缺铁性贫血及铁粒幼细胞贫血；减低：见于缺铁性贫血及铁粒幼细胞贫血；胎儿血红蛋白酸洗脱试验胎儿血红蛋白酸洗脱试验阳性主要见于地中海贫血。阳性主要见于地中海贫血。胎儿血红蛋白测定或胎儿血红蛋白测定或HbFHbF碱变性试验碱变性试验- -轻型地中海贫血明显增高。轻型地中海贫血明显增高。HbAHbA2 2定量测定定量测定限制性内切酶谱分析限制性内切酶谱分析-Hb-Hb病的基因诊断病的基因诊断第四节第四节 获得性溶血性贫血的常用实验检获得性溶血性贫血的常用实验检测测抗人球蛋白试验 antihuman globulin test又称 Coombs试验原理：本试验是检查不完全抗体的方法，是诊断自身免疫性溶血性贫血的试验。在AIHA病人血液中常含有抗自身RBC的不完全抗体，且多与表面含有相应抗原的RBC结合，