实验五：乳粉中乳糖的测定

1、实验五：乳粉中乳糖的测定一、实验目的：常握莱因一艾农氏法测定乳粉中乳糖的原理和方法。二、实验原理：样品经除去蛋口质以后，在加热条件下，直接滴定已标定过的费林氏液，样 液中的乳糖将费林氏液中的二价铜还原为氧化亚铜。以次甲基蓝为指示剂，在终 点稍过量吋，乳糖将蓝色的氧化型次甲基蓝还原为无色的还原型次甲基蓝。根据 样液消耗的体积，计算乳糖含量。费林氏液由卬、乙液组成，甲液为硫酸铜溶液，乙液为氢氧化钠与酒石酸钾 钠溶液。平时甲、乙液分别贮存，测定时才等体积混合，混合时，硫酸铜与氢氧 化钠反应，生成氢氧化铜沉淀：inaoh + cuso4 = cu（0h）2 j +na2so4 牛成的氢氧化铜沉淀与酒石

2、酸钾钠反血，牛心酒石酸钾钠与铜的络合物,使氢氧化铜溶解：cookcookhoh+ cu(oh)2hohchocu + 2h2oh0oonacoona酒石酸钾钠铜络合物屮的二价铜是一个氧化剂,能使还原糖氧化，而二价铜被还原成一价的红色氧化亚铜沉淀:cookchochcu + (ch0h)4 +2比。=2chch2ohcoonacookcoohchoh+ (choh)4+2cu2olchohch2ohcoona反应终点用次甲基蓝指示剂显示。次甲基蓝是氧化能力较二价铜更弱的一种弱氧化剂，故待二价铜全部被还原糖还原，过量一滴还原糖立即使次甲基蓝还原，溶 液的蓝色即消失。反应终点应为氧化亚铜的砖红色。三

3、、所用仪器及试剂药品：1、试剂(1) 费林氏液：甲液：取34.639g硫酸铜，溶于水屮，加入0.5ml浓硫酸，加水至500mlo 乙液：取173g酒石酸钾钠及50g氢氧化钠溶解于水中，稀释至500ml,静置两 天后过滤。(2) 次甲基蓝溶液:10g/lo(3) 盐酸溶液：体积比1： l(4) 酚瞰溶液：05g酚駄溶于75ml体积分数为95%的乙醇中，并加入20ml 水，然后再加入约0. imol/l的氢氧化钠溶液，直到加入一滴立即变成粉红色， 再加入水定容金loomlo(5) 氢氧化钠溶液：c(na0h)为300g/l。取300g氢氧化钠,溶于loooml水中。(6) 醋酸铅溶液：c(pbac

4、2)为200g/l。取20g醋酸铅,溶解于100ml水中。(7) 草酸钾一磷酸氢二钠溶液：取草酸钾3g,磷酸氢二钠7g,溶解于100ml 水中。2、仪器(1) 250ml三角瓶(蒸憎水洗净烘干)(2) 酸式滴定管(050ml、o.lml精确度)(3) 250ml> 100ml 容量瓶(4) 5ml、50ml 移液管(5) 电炉子四、操作方法:(1)用乳糖标定费林氏液：称取预先在9294°c烘箱屮干燥2h的乳糖标样约0.75g (准确到0.2mg ), 用水溶解并稀释至250mlo将此乳糖溶液注入一个50ml滴定管中，待滴定。a)预滴定：取10ml费林氏液(甲、乙液各5ml)于2

5、50ml三角瓶屮。再加入20ml蒸诸水，从滴定管中放岀15ml乳糖溶液于三角瓶屮，置于电炉上加热，使其在 2min内沸腾，沸腾后关小火焰，保持沸腾状态15s,加入3滴次甲基蓝溶液，继 续滴入乳糖溶液至蓝色完全褪尽为止，读取所用乳糖的毫升数。b）精确滴定：另取费林氏液（甲、乙液各5ml）于250ml三角烧瓶中，再加入20ml蒸 诸水，一次加入比预备滴定量少0.51.0ml的乳糖溶液，置于电炉上，使-其在 2min内沸腾，沸腾后关小火焰，维持沸腾状态2min,加入3滴次甲基蓝溶液， 然后继续滴入乳糖溶液（一滴一滴徐徐滴入），待蓝色完全褪尽即为终点。以此 滴定量作为计算的依据（在同吋测定蔗糖吋，此即

6、为转化前滴定量）。费林氏液的乳糖校正值（fi）：kx“xlooo250=4 x % x(4-4-1)(4-4-2)式中：ai实测乳糖数，mg；vj滴定时消耗乳糖液量，ml；mi称取乳糖的质量，goal】由乳糖液滴定毫升数查表411所得的乳糖数，mgo（2）乳糖的测定a. 样品处理a）称取2.53g样品（准确至o.olg）,用100ml水分数次溶解并洗入250ml 容量瓶屮。b）加4ml醋酸铅、4ml草酸钾一磷酸氢二钠溶液，每次加入试剂时都要 徐徐加入，并摇动容量瓶，用水稀释至刻度。静止数分钟，用干燥滤纸过滤，弃 去最初25ml滤液后,所得滤液作滴定用。b. 滴定a）预滴定：将此滤液注入一个50

7、ml滴定管中，待测定。取10ml费林氏 液（甲、乙液各5ml）于250ml三角烧瓶中，再加入20ml蒸徭水，置于电炉 上加热，使其在2min内沸腾后关小火焰，保持沸腾状态15s,加入3滴次甲基蓝。 然后徐徐滴入乳糖溶液至蓝色完全褪尽为止，读取所用乳糖的毫升数。b） 精确滴定：另取10ml费林氏液（甲、乙各5ml）于250ml三角瓶 中，再加入20ml蒸憾水，一次加入比预备滴定量少0.51.0ml的乳糖溶液，置 于电炉上，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，维持沸腾状态2min,加入3 滴次甲基蓝溶液，然后一滴一滴徐徐滴入乳糖溶液，待蓝色完全褪尽即为终点。 以此滴定量作为计算的依据（在同时测定蔗糖时，此即为转化前滴定量）。五、计算：乳糖含量的