ABO血型系统及定型正反不符（59页)讲座

1、ABO血型系统及定型血型系统及定型l正定型（细胞定型）l用已知抗体特异性的试剂血清检查红细胞的抗原 玻片法 试管法 微量板法l反定型（血清定型）l用已知血型的试剂红细胞检查血清中的抗体 试管法 微量板法正反定型结果相符时，才可以记录血型结果。l受检红细胞是洗涤后悬浮于NS.吗?l是用最敏感的试管法吗?l受检者年龄60吗?l病人的丙种球蛋白减低吗?l病人血清与O型普检红细胞的反应与试剂红细胞一样吗?l病人是白血病、肠道阻塞、胃癌、结肠或直肠癌吗？l混合视野反应是输血后标本吗？l血液标本或试管鉴定不当l红细胞悬浮液过浓或过淡及纤维蛋白、小血凝块的干扰l人为的书写错误l标本混乱l忽略观察溶血现象l未

2、加入试剂l未按照试剂生产商的说明操作l离心机校准不良l试剂受到污染l温度在离心过程中增高l减弱的或减少的抗原反应l未知的抗原反应l减弱的或缺少的抗体反应l未知的抗体反应lA或B抗原的亚血型lA、B及AB型RBC与试剂抗血清作实验时，预期反应：4l细胞分型法减弱的凝集反应：健康献血员可能A/B亚型l抗AB 血清能检出某些不与抗A/抗B试剂发生反应的A/B亚型l疾病状态下,抗原强度减弱l如:A型白血病/肿瘤患者在疾病活动期改变为A2或A3亚型 ,疾病缓解期复原l疾病状态下,血型物质过量,中和抗A/抗B试剂,造成假阴性/弱凝集: 卵巢囊肿 胃癌 胰腺癌 肠道阻塞l对策:试管法 红细胞三洗l获得性Al

3、奇异变形杆菌感染的O/B: 与抗A反应呈混合视野2021/8/1211l9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。2021-12-42021-12-4Saturday, December 04, 2021l10、低头要有勇气，抬头要有低气。2021-12-42021-12-42021-12-412/4/2021 10:39:58 PMl11、人总是珍惜为得到。2021-12-42021-12-42021-12-4Dec-214-Dec-21l12、人乱于心，不宽余请。2021-12-42021-12-42021-12-4Saturday, December 04, 2021l13、生气是拿别人

4、做错的事来惩罚自己。2021-12-42021-12-42021-12-42021-12-412/4/2021l14、抱最大的希望，作最大的努力。2021年12月4日星期六2021-12-42021-12-42021-12-4l15、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。2021年12月2021-12-42021-12-42021-12-412/4/2021l16、业余生活要有意义，不要越轨。2021-12-42021-12-4December 4, 2021l17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。2021-12-42021-12-42021-12-42021-12-42021/8/121

5、2烦恼有何惧怕，既然躲不掉，就调好心态与它共存。心向阳光，何惧风霜烦恼有何惧怕，既然躲不掉，就调好心态与它共存。心向阳光，何惧风霜。茫茫人海你我相遇就是缘分，欢迎下载！茫茫人海你我相遇就是缘分，欢迎下载！l获得性BlRBC反应象AB型,血清中有抗B抗体l细胞分型法: A抗原B抗原lGerbal等假设细菌的脱乙酰基酶deactetylases可以将A的免疫结构域糖N乙酰氨基半乳糖胺转化为半乳糖胺。l这个半乳糖胺与B的免疫多糖半乳糖非常的相似，可以与某些抗B发生反应。 l抗体吸附于红细胞表面，可显示直抗阳性l自身免疫性溶血性贫血l抗高血压药物l输血反应l新生儿溶血病l放散技术移去抗体l年龄70l丙

6、球蛋白过低血症l丙球蛋白缺乏血症l缗钱状凝集l冷自身抗体l未知的ABO同种抗体l未知的其它同种抗体ABO抗体的区别抗体的区别特异性血清其它来源血型频率性 质抗BA全部常属IgM效价 8-512初乳 唾液泪液(IgA)抗ABO、 Oh全部常属IgG,与Ax,A3凝集抗A在蜗牛鱼卵中也可发现抗AB全部常属IgM效价 32-2048抗A1A2B A2Ax22-35%1-8%大多数少数报告有输血反应用A2细胞吸收过的抗A血清;双花扁豆(Doliekos biflorus)抗HOh 非Oh全部部分被H物质抑制欧洲荆豆(Ulex europaeus)l天然抗体l未经可察觉的抗原刺激而产生的抗体lO型血清中

7、多为IgG抗A和抗BlA/B型血清中大多为IgM抗体l免疫抗体l妊娠/输血等l球蛋白浓度增高:多发性骨髓瘤/原发性巨球蛋白血症l纤维蛋白原增高l血管扩张剂l霍奇金淋巴瘤l新生儿脐带血中的华尔道胶l抗I是反定型中最常见的自身抗体l有时也见抗i和抗Prl抗I通常凝集所有供者RBC包括患者自身及反定型所用RBCl抗I引起的凝集比抗A抗B所引起的凝集弱l脐带血所带的I抗原量少通常不被凝集l与冷凝集有关的最常见的特异性抗体是抗Il有些冷抗体与I和H抗原强的细胞如（O和A2细胞）反应最强，称之为抗HI联合抗体。l 抗I 抗i 抗H 抗HI 抗Pr 成OI + - + + + 成AI + - - - + 脐

8、Oi - + + - +l酶OI + - + + +l抗HI： O成A2成B/A成脐O脐ABlABO同种抗体:A2/A2B中的抗A1l A1/A1B中的抗Hl未知的同种抗体:l筛选细胞及反定型中的O细胞l一组谱细胞鉴定抗体特异性lA抗原中主要为A1和A2 l其它A亚型：A3、Ax、Aend、Am、Ay、和AellB亚型一般比A亚型更少：B3、Bx、Bm和Bel等l1 红细胞与抗A抗A1抗B及抗AB的凝集程度l2 红细胞上H物质活性的强弱l3 血清中是否存在抗A1l4 分泌型人的唾液中A、B和H物质项目A1细胞A2细胞与抗A反应42与抗A1反应成人抗原位点100万25万脐血抗原位点31万25万乙

9、酰D半乳糖胺转移酶PH 6时最多PH 7时最多各种弱各种弱A亚型的鉴别程序亚型的鉴别程序红细胞弱凝集混合外观(Mf）A60A3与抗AA3 Ax10 红细胞呈十分弱的mf凝集Aend及/或抗Aend只与抗AB呈弱凝集AxA1B反应不凝集容易吸附放散抗AAm能吸附分泌型唾液中有一定量的A物质及放散不容易吸附放散抗AAy抗A分泌型唾液含少量的A物质Am Ay 吸附放散抗AAelAel分泌型唾液只含H物质无A物质l与人源性抗A试剂的反应强度为4, 与抗H+/2+l可能有不规则抗A1存在 (sometimes)l1-8% A2和22-35%的A2B存在抗 A1l血型物质 A Hl举例 抗A 抗B Ac

10、Bc Ocl 4+ 4+ + - -lA1和A2决定簇的区别是仅存在量的差异l还是抗原决定簇结构不同？l用A2细胞重复吸收来源于B型个体的抗A血清可以移去所有抗体，表明二者之间仅是量的差别。lA2和A2B个体常常产生抗A1，说明A2细胞上缺乏A1细胞上的一种决定簇。 lType1 Gal13GlcNAc 1R（血清）lType2 Gal14GlcNAc 1R （红细胞）lType3 Gal13GalNAc1R（红细胞）lType4 Gal13GalNAc 1R （红细胞）lType5 Gal13Gal 1R（人工合成）lType6 Gal14Glc 1RlA1细胞出现重复的3型A抗原结构，但A

11、2细胞却没有。l抗A1是3型或4型A特异性的，或者抗A1可以优先与3型或4型A反应。l只有A1转移酶能够转化3型H加一个N乙酰氨基半乳糖基成为3型Al因此A2细胞上可以检测到3型H而不是3型A抗原。l双花扁豆植物血凝素检测N乙酰氨基半乳糖胺，当过量的浓度下，它可以凝集A2细胞，因此将它用作A亚型分型试剂更多是依赖A1和A2表现型数量上的差异。l最早由Friedenreich在1936年描述l与抗A和抗AB共同孵育时：“混合视野外观”（mixed field agglutination）。即：小的凝集块周围是大量未凝集的细胞。l与抗A反应强度低于A2l与抗AB反应呈混合视野,但并不增强l偶有抗A

12、1 (occasionally) l血型物质 A HlA3不像是A2和O细胞的嵌合体 lAend最早由Weiner 等于1959年描述l类似于A3细胞：它们与一些抗A和抗AB表现很弱的混合视野外观lAend分泌型的唾液中只有H物质，但是无A物质l抗A1出现在部分Aend个体的血清中l10细胞凝集（Mf）lAm细胞不能被抗A和抗AB凝集，或者仅能发生很弱的凝集。Am细胞可以吸附放散抗A 。lAm分泌型的唾液中包含正常含量的A和H物质，Am血清中通常无抗A1。lAm作为ABO位点上一个稀有的等位基因遗传lAm在法国献血者的频率是150 000中有1例。（A型人中占0.0015%），中国台湾的数据是

13、400 000万人中1例。l抗原性较弱 抗A: - / w+l抗H 4+(甚至会超过Oc)l无抗A1产生,与抗AB反应不增强l血型物质: A HlAx表现型最初由Fischer和Hahn于1935年报道，它的主要血清学特点是：l红细胞与多数来源于B型血清的抗A不发生反应，但是可以被大多数来源于O型个体的抗AB凝集，没有混合视野表现。l血清中含有抗A1，后者有时候可以凝集A1和A2细胞。l除了H物质，Ax分泌型个体唾液中可以捡出痕量的A物质l抗A: -/ w+l抗H:4+(与Oc的抗H差不多)l常有抗A1(Frequently) ,比A2 A3都高l与抗A+B的反应比抗A明显增强l血型物质 Hl

14、Ax表现型具有很高的遗传异质性：l许多家系资料表明Ax以ABO位点上一种稀有的等位基因的方式遗传l在一些家庭中遗传背景不清楚l在两项独立的研究中，法国Ax的频率为1/77000 (A型人中的0.003%)和1/44000 l与抗A1反应较弱 2+l与抗A及抗H反应较强 4+/3+l仅有A1和Aint的细胞与抗A1发生反应lLandsteiner和Levine：有些A型个体的红细胞既不能定义为A1也不能定义为A2lAint在黑人中较白人更为常见，lAint是作为ABO位点上的一个等位基因遗传的。l它的H抗原强度象A2一样强，甚至更强。l在通常的条件下，Ael细胞与抗A和抗AB不发生凝集，虽然它们

15、可以结合这些抗体，结合的抗体可以通过吸收放散技术检测到lAel分泌型唾液中无A物质，仅有H物质，血清中常含有抗A1，也可以含有能够凝集A2细胞的抗体l在Ael血清和红细胞膜上不能检出A转移酶。l在法国150000例献血者中，没有检测到Ael表现型，在中国台湾400000人中捡出5例Ael个体lAel以ABO位点上的一种稀有的等位基因遗传的。lOlsson等l对其它弱A亚型的ABO基因的外显子、剪切部位和启动子进行序列测定l那些表现型不太容易被划分到任何现存的分类中。这些异常的基因被称作Aw（15）。 Subgroups of APheno-typeRed cellstestedWith ant

16、i-seraSerum tested withKnown red cellsSalivaof secretorsAnti-A-B-AB-A1-HA1A2BO A1V_VV_V_A and HAint+_V+_V_A and HA2+_V_+Some-times. +_V_A and HA3+mf_+mf_+Occa-sionally. +_V_A and HAm-/w+_-/w+_V_V_A and HAx-/W+_+/+_VFre-quently +_V_Hl弱的B变异型是很少的。l可能是由于在许多群体中B基因的频率要相对低得多。l弱B亚型较难以分类。lSalmon做出结论：B亚型最好的分类

17、应参照A变异型：B3、Bx、Bm和Bel，另外加上那些不符合其它4种类型的Bw。 l1972年 Wiener和Cioffi首先报道一例ABH非分泌型B3。l它被作为最稀少的一种B亚型 l这种表现型以与抗B和抗AB呈现混合视野反应为特点l血清中缺乏抗Bl唾液中含有正常含量的B抗原lB3通常是由于ABO位点上的稀有等位基因所致。 l一种异质性的血型l典型的Bx红细胞与抗B和抗AB呈弱凝集。l血清中含有弱的抗BlBx分泌型唾液中含有一些B物质，后者常常仅能通过Bx细胞与抗B的凝集抑制试验才能检测到lBx是ABO位点上的一种稀有的等位基因。lBm细胞不能被抗B或抗AB凝集lB抗原仅能通过敏感的技术比如

18、吸收放散抗B才能检测到。lBm分泌型唾液中B物质的含量接近正常BlBm个体的血清中不含有抗B。l通常Bm是作为ABO位点上一个变异的基因来遗传的，但是有几个例外报道。 lBel红细胞与抗B和AB不发生凝集反应，但是它们的确可以结合抗B，抗体可以通过放散技术被检测到。lBel分泌型唾液中不出现B物质，血清中可能存在抗B抗体。lBel作为ABO位点上的稀有基因而遗传， lOlsson等确认了7种新的等位基因，它们与正常B基因相比有1个核苷酸改变，导致一个氨基酸的取代（见表2.19Bw2到8），所有这些等位基因与B的弱表达相关，但是没有做进一步分类。正定型中意外阳性或阴性l洗涤细胞l加入自身对照l增

19、加血清/细胞比例l降低孵育温度,延长孵育时间 4 /22 /37 15min-30minl镜检l用不同来源的抗体试验l用人源性试剂作吸收放散(并作相应对照)lNS.三洗受检1ml红细胞l加入等量人源性抗A或抗Bl充分混匀41小时，离心去上清l4冷盐水充分洗涤细胞58次（留末次洗涤液）l56热放散l检测放散液及最后一次洗涤液l注意：要有阴阳性对照反定型中意外阳性或阴性lA1细胞阳性,A2细胞和筛选细胞阴性,自身阴性: 可能是含有抗A1的A或AB型l部分筛选细胞阳性,自身阴性: 血清中可能含有意外抗体,用一组谱细胞,确定抗体特异性l室温盐水反应抗体:MN、P、Lewisl抗人球试验阳性抗体：Ss

20、Rh Kell Duffy Kiddl排除冷抗体及缗钱状凝集 ： HI抗体 l排除多凝集 ： 同型成人新鲜血清、脐带血清 植物血凝素（Tn、T抗原活化）酶处理的成人O细胞l9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。21.12.421.12.4Saturday, December 04, 2021l10、低头要有勇气，抬头要有低气。*12/4/2021 10:39:59 PMl11、人总是珍惜为得到。21.12.4*Dec-214-Dec-21l12、人乱于心，不宽余请。*Saturday, December 04, 2021l13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。21.12.421.12.4*December 4, 2021l14、抱最大的希望，作最大的努力。2021年12月4日星期六*21.12.4l15、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么