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文档简介
1、血培养采集的方法及注意事项1血培养的概念血培养的概念u血血培养是一项实验室检查,是采集患者血液标本并接种到培培养是一项实验室检查,是采集患者血液标本并接种到培养瓶,用以发现、识别导致患者感染的病原微生物养瓶,用以发现、识别导致患者感染的病原微生物u是诊断菌血症和真菌血症的基本而重要的方法是诊断菌血症和真菌血症的基本而重要的方法u对感染性疾病的诊断、治疗和预后都有极为重要的临床意义对感染性疾病的诊断、治疗和预后都有极为重要的临床意义23血培养的目的血培养的目的u 证实有感染性的病原体证实有感染性的病原体u 鉴定病原体,鉴定病原体,做药敏试验做药敏试验u 指导抗菌药物的使用指导抗菌药物的使用能够更
2、好的帮助医生合理用药,减少患者的死亡率能够更好的帮助医生合理用药,减少患者的死亡率4目前血培养存在的主要问题目前血培养存在的主要问题-医生医生血培养重视程度不够,送检率低血培养重视程度不够,送检率低u 血培养用处不大,治疗费用增加,有指征不送检血培养用处不大,治疗费用增加,有指征不送检u 血培养时间长,不能适应临床需求血培养时间长,不能适应临床需求u 只做需氧培养,不同时做厌氧培养,病原菌检出率低只做需氧培养,不同时做厌氧培养,病原菌检出率低5目前血培养存在的主要问题目前血培养存在的主要问题-检验员检验员u血培养检测运输标准及接收标准不规范血培养检测运输标准及接收标准不规范 应室温储存的却低温
3、储存应室温储存的却低温储存 标本没有及时检验,导致微生物检测延迟标本没有及时检验,导致微生物检测延迟 实验室人员没有认真核查接收标本(采血量不够、培养瓶有破损等)实验室人员没有认真核查接收标本(采血量不够、培养瓶有破损等)u血培养阳性结果的处理不够及时血培养阳性结果的处理不够及时 没有及时将结果反馈给临床没有及时将结果反馈给临床 “ “时间就是生命时间就是生命”6目前血培养存在的主要问题目前血培养存在的主要问题-护理人员护理人员u 采血消毒不够严格,导致污染率偏高采血消毒不够严格,导致污染率偏高 皮肤皮肤消毒不够严格消毒不够严格 培养瓶的消毒问题培养瓶的消毒问题u 不规范的血培养不规范的血培养
4、 采血量、采血时间、采血套数不符合规范采血量、采血时间、采血套数不符合规范 不规范的血培养导致病原菌分离率低不规范的血培养导致病原菌分离率低 难以判断病原菌是污染造成还是感染造成的难以判断病原菌是污染造成还是感染造成的u标本没有及时送检,导致检测延迟标本没有及时送检,导致检测延迟7血培养标本如何采集8血培养临床实践指南血培养临床实践指南nCLSI是美国【临床实验室标准化协会】的英文缩写,英文名为Clinical and Laboratory Standards Instituten美国CLSI的抗微生物药物敏感性试验操作方法和判断标准,是国内临床细菌检验遵循的标准。由于制订该项标准需要投入大量
5、的人力、财力和物力,所以大多数国家包括中国都还没有建立自己的标准而依赖CLSI的方法和标准nCLSI标准每年更新9关键要点关键要点u采血指征采血指征u采血时间采血时间u采血套数采血套数u采血次数采血次数u接种血量接种血量u消毒灭菌消毒灭菌10采血指征采血指征u不明原因的发热(38)或体温过低(36)u白细胞增多( 10109/L),粒细胞减少(1.0109/L)u休克,寒颤u严重的局部感染(脑膜炎、心内膜炎、肺炎、肾盂肾炎、感染)u心率异常加快u低血压或高血压u呼吸频率加快(20次/分或CO2分压32mmHg)怀疑血流感染时要做血培养怀疑血流感染时要做血培养发热发热要做血培养!要做血培养!11
6、03060时间 (分钟)体温体温细菌浓度细菌浓度采血时间采血时间12采集血培养时间的重要性采集血培养时间的重要性? ?9% +14% +9% +11% +发热高峰前发热高峰前12-2.5小时小时发热高峰前发热高峰前2.5-0.5小时小时发热高峰期间发热高峰期间发热高峰后发热高峰后1-12小时小时166 病人病人105 病人病人199 病人病人258 病人病人Thomson et al. 1991. ASCP. Mayo Clinic Study13采血时间采血时间u在应用抗菌药物之前u如果患者已经应用抗菌药物治疗,应该在下一次用药之前采集血培养14采血套数采血套数基本概念基本概念u成人成人“一
7、套一套” ” 血培养包括:血培养包括:需氧瓶需氧瓶和和厌氧瓶厌氧瓶各一个各一个 注意:注意:一次穿刺采血,算一次穿刺采血,算“一套一套”,采集第二套应从另一,采集第二套应从另一穿刺点获得穿刺点获得u“双瓶双侧双瓶双侧”,是指从一个部位采血接种一套培养瓶,再从另一部位,是指从一个部位采血接种一套培养瓶,再从另一部位 采血接种另一套培养瓶,一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单采血接种另一套培养瓶,一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单 个血培养个血培养u儿童一般只做需氧培养,特殊患者才考虑厌氧培养儿童一般只做需氧培养,特殊患者才考虑厌氧培养15采血套数采血套数指南中强调:指南中强调:血培养至少送
8、血培养至少送2 2套套u除外新生儿外,成人:除外新生儿外,成人:任何时候,不能只送一瓶!任何时候,不能只送一瓶!162 23 3套血培养,有助于污染的判断套血培养,有助于污染的判断 采集采集1套无法判套无法判断是病原菌还断是病原菌还是污染菌是污染菌17 血培养套数与阳性检出率()血培养套数与阳性检出率()6580969918Weinstein et al. Detection of Bloodstream Infections in Adults: How Many Weinstein et al. Detection of Bloodstream Infections in Adults:
9、How Many BloodCultures Are Needed J Clin Microbiol. 2007; 45:3546-3548BloodCultures Are Needed J Clin Microbiol. 2007; 45:3546-3548血培养套数与检测灵敏度()血培养套数与检测灵敏度()19u这些研究中,使用这些研究中,使用“配对需氧配对需氧/厌氧血培养瓶厌氧血培养瓶”比用比用“两个需氧两个需氧血培养瓶血培养瓶”能检出更多的金葡、肠杆菌科细菌和厌氧菌能检出更多的金葡、肠杆菌科细菌和厌氧菌u推荐常规血培养要包括配对的需氧推荐常规血培养要包括配对的需氧/厌氧血培养瓶厌氧血
10、培养瓶CLSI 2007 M47-A20厌氧瓶平均报阳时间快于需氧瓶厌氧瓶平均报阳时间快于需氧瓶厌氧瓶平均报阳时间厌氧瓶平均报阳时间, 大肠埃希菌大肠埃希菌, 12.4厌氧瓶平均报阳时间厌氧瓶平均报阳时间, 肺炎克雷伯菌肺炎克雷伯菌, 16.8厌氧瓶平均报阳时间厌氧瓶平均报阳时间, 肠球菌肠球菌, 17.3厌氧瓶平均报阳时间厌氧瓶平均报阳时间, 葡萄球菌葡萄球菌, 30.88需氧瓶平均报阳时间需氧瓶平均报阳时间, 大肠埃希菌大肠埃希菌, 13.5需氧瓶平均报阳时间需氧瓶平均报阳时间, 肺炎克雷伯菌肺炎克雷伯菌, 17.7需氧瓶平均报阳时间需氧瓶平均报阳时间, 肠球菌肠球菌, 20.5需氧瓶平均
11、报阳时间需氧瓶平均报阳时间, 葡萄球菌葡萄球菌, 31.7905101520253035大肠埃希菌大肠埃希菌肺炎克雷伯菌肺炎克雷伯菌肠球菌肠球菌葡萄球菌葡萄球菌厌氧瓶平均报阳时间厌氧瓶平均报阳时间需氧瓶平均报阳时间需氧瓶平均报阳时间h21厌氧瓶检出致病菌时间更短厌氧瓶检出致病菌时间更短同样检出致病菌,BACTEC平均检测时间比Bact/Alert少少4.36小时小时Zadroga R et al. Clin Infect Dis. 2013;56:790-79722厌氧瓶、需氧瓶互相补充:提高检出率厌氧瓶、需氧瓶互相补充:提高检出率J Microbiol Immunol Infect. 200
12、7;40:445-44923采血次数采血次数u对怀疑菌血症、真菌血症对怀疑菌血症、真菌血症的的患者,推荐患者,推荐同时同时或或短时间内短时间内(1010分钟内)分钟内)从不同部位(如从不同部位(如双臂双臂)采集)采集 2 23 3 套血培养标本,套血培养标本,做到做到“双瓶双侧双瓶双侧”,如有必要可同时如有必要可同时从下肢静脉从下肢静脉采血接种第三套培养瓶,采血接种第三套培养瓶,采血后的采血后的 2 2 5 5 天内不需要重复采集血培养天内不需要重复采集血培养 u急性心内膜炎:急性心内膜炎:3030分钟分钟内完成内完成3 3套套血培养的采集,如果血培养的采集,如果2424小时内报告小时内报告阴
13、性,则继续采集阴性,则继续采集2 2套血培养套血培养u亚急性心内膜炎:每亚急性心内膜炎:每间隔间隔3030分钟至分钟至1h1h采集采集1 1套,连续套,连续采集采集3 3套套标本,如标本,如果果2424小时内报告阴性,则继续采集小时内报告阴性,则继续采集2 2套血培养套血培养24接种血量接种血量采血量与检出率的关系血量每增加1毫升,成年人菌血症阳性检出率增加3 但并非越多越好,超过一定数量的采血量会稀释培养瓶内的肉汤,使肉汤无法有效中但并非越多越好,超过一定数量的采血量会稀释培养瓶内的肉汤,使肉汤无法有效中和血中的抑制物质(补体、抗体、抗生素),所以血液与肉汤的最佳比例为和血中的抑制物质(补体
14、、抗体、抗生素),所以血液与肉汤的最佳比例为1:41:1025接种血量接种血量u成人一套标本(需氧厌氧成人一套标本(需氧厌氧2 2个培养瓶),每瓶个培养瓶),每瓶8 810ml10ml,共,共20ml20ml,双侧双瓶即,双侧双瓶即40ml40mlu婴幼儿推荐的采血量应少于患儿总血容量的婴幼儿推荐的采血量应少于患儿总血容量的 1% 1%,每瓶不少于每瓶不少于2ml2mlu采血量不足时应优先保证需氧瓶,因临床采血量不足时应优先保证需氧瓶,因临床9090以上以上的感染为需氧菌或兼性需氧菌感染的感染为需氧菌或兼性需氧菌感染 利用瓶身刻度准确采血26规范采集规范采集血培养标本血培养标本无菌操作:无菌操
15、作:污染率的指标是3%u手卫生手卫生u皮肤消毒皮肤消毒u培养瓶的消毒培养瓶的消毒27u每次采集血液标本前一定要洗手每次采集血液标本前一定要洗手u使用使用3-5ml3-5ml抗菌皂液抗菌皂液u保证所有手部皮肤接触皂液的时间保证所有手部皮肤接触皂液的时间超过超过1515秒秒u注意指尖及指甲内侧注意指尖及指甲内侧u不要遗忘拇指不要遗忘拇指u纸巾干手并勿用手直接关闭水笼头纸巾干手并勿用手直接关闭水笼头你的手真得洗干净了吗?你的手真得洗干净了吗?严格执行手卫生严格执行手卫生28皮肤凝固酶阴性葡萄球菌定植于输液管皮肤凝固酶阴性葡萄球菌定植于输液管严格执行皮肤消毒程序严格执行皮肤消毒程序定植细菌定植细菌“污
16、染污染”血培养血培养29u推荐使用碘推荐使用碘酊酊、碘伏碘伏或或洗必泰洗必泰作为皮肤消毒剂作为皮肤消毒剂u 碘碘酊酊作用时间:作用时间:1min1minu 碘伏作用时间:碘伏作用时间:1.5-2min1.5-2min u 洗必泰作用时间:洗必泰作用时间:1min1min (但不能用于少于(但不能用于少于2 2个月婴儿皮肤消毒)个月婴儿皮肤消毒)皮肤消毒皮肤消毒3070%70%乙醇乙醇擦拭静脉穿刺部位,擦拭静脉穿刺部位,待干待干30秒秒1-2% 1-2% 碘酊碘酊3030秒秒或或10%10%碘伏消毒碘伏消毒6060秒秒,从穿刺点向外画圈消毒从穿刺点向外画圈消毒, ,直径直径1.5-2cm1.5-
17、2cm用用70%70%乙醇消毒乙醇消毒 6060秒秒(脱碘),待酒(脱碘),待酒精挥发精挥发干燥后采血干燥后采血细菌是细菌是死的死的,不是不是死的死的皮肤消毒程序(三步法)皮肤消毒程序(三步法)31培养瓶的消毒程序培养瓶的消毒程序1.去掉培养瓶口的塑料瓶盖2.70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60秒3.自然待干4.将标本注入培养瓶内5. 颠倒混匀标本与肉汤,以避免血液凝集 (儿童采血量少,更应注意颠倒混匀)细菌是细菌是死的死的,不是不是32蝶翼针采血程序蝶翼针采血程序1皮肤消毒2 培养瓶消毒3 标注采血量4 准备采血针5 静脉穿刺6 负压采血33血培养采血注意事项血培养采血注意事项u血培养建议从外周静脉采血,不建议采动脉血血培养建议从外周静脉采血,不建议采动脉血u常规血培养不宜从静脉导管或静脉留置装置取血常规血培养不宜从静脉导管或静脉留置装置取血u注射器采血注射器采血,采好后注入血培养瓶之前采好后注入血培养瓶之前不不需要更换针头需要更换针头u标本采集部位标本采集部位:从两侧从两侧上肢上肢静脉采血静脉采血“双瓶双侧双瓶双侧”,必要时从,必要时从下肢下肢静脉采血做第三套血培养静脉采血做第三套血培养u采采多多种血液标本种血液标本时一定时一定最先采集血培养标本最先采集血培养标本34u 无需保留的:从独立的外周静脉采集2套血培养,无菌状态下取出导管 并剪下5cm导管尖端或近心端于无
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