传染病血清标志检测指标的发展与应用

1、1会计学传染病血清标志检测指标的发展与应用传染病血清标志检测指标的发展与应用优势优势简单，易操作成本低缺点缺点包被面积小，反应面积有限颜色反应（灵敏度、特异性）包被均一性不足（精密度）反应时间不一致造成结果偏差（精密度低，熟练的操作人员其批间差也达20%以上） 洗板容易带来污染手工操作，管理不易结合标记抗体 结合磁性微珠转移至电极施加电压启动反应信号检测 现在（现在（ECLECL）优点：异相免疫分析，抗原抗体高效结合，无传统一步法的缺点结果稳定，高精密度可控的反应体系快速的检测时间抛弃型tip头避免交叉污染缺点：成本相对较高乙型肝炎乙型肝炎: : 世界性的公共卫生问题世界性的公共卫生问题HBs

2、Ag Prevalence8% - High 2-7% - Intermediate 检测范检测范围围52000 52000 IU/mlIU/ml手工步骤手工步骤结果显示结果显示 ( ( IU/mlIU/ml) ) ( (70%70%-80% -80% 标本标本在此范围在此范围) )e411/2010(e411/2010(1 1:100:100) ) e601/e170(e601/e170(1 1:400:400) ) 在线稀释在线稀释e411/2010(1:100) e601/e170(1:400) 在线稀释在线稀释 HBsAg HBsAg II II QuantQuant25的的标本标本5

3、2000 IU/ml结论结论 理想的治疗终点是持续的HBsAg的消失。 HBsAg是Pegasys治疗预后的良好的指示指标(而不是HBV DNA )。 Elecsys HBsAg II quantitative assay可以仪器自动预稀释，并且达到很好的线性范围。 60-80% 的标本可以一次得到最终结果。 - -表面抗体定量检测具备溯源性表面抗体定量检测具备溯源性监控意义监控意义Anti-HBs( IU/Anti-HBs( IU/L L ) )接种建议接种建议提示提示HBVHBV感染恢复感染恢复提示成功的疫苗接种提示成功的疫苗接种提示再次疫苗接种的提示再次疫苗接种的时间时间10100001

4、0000可以保护可以保护7 7年年qHBV抗病毒治疗的重要监测指标。Elecsys HBeAg 分析灵敏度分析灵敏度 用参考材料82做方法比较 (100 PEI U/mL)Elecsys HBeAg Elecsys HBeAg 灵敏度极佳灵敏度极佳00.20.40.60.81.01.21.40123456HBeAg concentration PEI U/mLHBeAg concentration PEI U/mLs/co ratios/co ratioElecsys HBeAgElecsys HBeAgAssay AAssay Acut-cut-offoff PEI PEI 是是 Paul-

5、Ehrlich-Institute Paul-Ehrlich-Institute 的简称，它是德国的一个机构，隶属于德国卫生的简称，它是德国的一个机构，隶属于德国卫生部。部。该机构成立已经该机构成立已经100100多年，主要的研究方向是疫苗、抗体、基因治疗、变态反多年，主要的研究方向是疫苗、抗体、基因治疗、变态反应原研究等。它有很多职能，包括德国以及欧盟的医学产品法规的制定；应原研究等。它有很多职能，包括德国以及欧盟的医学产品法规的制定； PEI PEI 是的合作组织，只要职能是体外血液产品的质量确认。是的合作组织，只要职能是体外血液产品的质量确认。 PEI PEI 还提供以下标志物的参考品和

6、国际标准品：还提供以下标志物的参考品和国际标准品：HIV 1/2, HIV 1/2, HBVHBV, HCV, HAV, Rubella virus and HCMV, HCV, HAV, Rubella virus and HCMV由于由于HBeAgHBeAg没有没有 WHOWHO标准品，所以目前标准品，所以目前PEI PEI 标准品是最高级的国际标准品。标准品是最高级的国际标准品。稀释灵敏度稀释灵敏度 Elecsys HBeAg的的 COI结果具有半定量的分析结果具有半定量的分析能力能力0.11101001000100001000000.11101001,00010,000log HBeA

7、g PEI U/mLlog HBeAg PEI U/mLlog COIlog COIrecombinant HBeAg (5g/mL)2300 PEIU/mL目前在国外最高的自然标本为1450 PEIU/ml2.001.000.000.001.002.003.004.005.00Analytical sensitivityAnalytical sensitivity Dilution of PEI reference material (100 Dilution of PEI reference material (100 U/mL)U/mL)检出灵敏度：检出灵敏度： 0.2 PEI U /L

8、0.2 PEI U /L2.001.000.005.002.51.250.3130.0780.0390.6250.156COICOIAnti-HBe concentration PEI Anti-HBe concentration PEI U/mLU/mLCOICOISpecificity in blood donors (n=?)Specificity in blood donors (n=?)Cut-off indexCut-off indexNumber of samplesNumber of samplesCut-offCut-offElecsys Anti-HBe 优异的临床特异性优

9、异的临床特异性Specificity = 100%Specificity = 100%临床价值：临床价值： 在多余在多余HBeAg存在的条件下即能早期发现存在的条件下即能早期发现Anti-Hbe的血的血清转换，清转换， 对于指导医生的治疗有更灵敏的应用价值。对于指导医生的治疗有更灵敏的应用价值。Journal of Medical Virology ; 60;256-63(2000)单项抗HBc阳性结果的解释问题。q罗氏罗氏Elecsys预处理血清标本预处理血清标本将明显改善抗HBc检测的特异性；具有标本预处理的抗HBc试验的特异性在 99.8%至 99.9%之间。中国CDC报告的丙肝病例逐年

10、大幅增高卫生部历年公布全国丙肝疫情卫生部历年公布全国丙肝疫情中国报告的丙肝病例在最近中国报告的丙肝病例在最近6 6年内几乎翻了年内几乎翻了6 6倍倍211453938052927706811003391180160200002000040000400006000060000800008000010000010000012000012000020032003年年20042004年年20052005年年20062006年年20072007年年20082008年年肝肝硬硬化化肝肝癌癌CE1E2/NS1NS2NS3NS4aNS4bNS5aNS5b核酸序列5-nc3-nc3429141490260533

11、60531262569371核心蛋白包膜蛋白糖蛋白功能不清三磷酸核苷酸结合的螺旋酶RNA聚合酶功能c22-3c22-3、c33cc33c、c100-c100-3 3和和5-1-15-1-1的重组蛋白，灵敏度和特异性得的重组蛋白，灵敏度和特异性得到进一步改善，平均窗口期缩短至到进一步改善，平均窗口期缩短至7-8W7-8W。 C E1E2NS2NS3NS4NS553结构部分结构部分非结构部分非结构部分Core-Peptide rec. NS3-Protein NS4-Peptide aa 9-48 aa 1192-1457 aa 1689 - 1743E 1E 2CoreRNA Elecsys E

12、lecsys Anti-HCV Anti-HCV 试剂中试剂中 应用的抗原应用的抗原 Elecsys Anti-HCV Elecsys Anti-HCV 能够检测能够检测 HCV genotypes 1-6 HCV genotypes 1-6 种不同基因型种不同基因型来，100%灵敏识别HCV主要1-6种基因型。快速的反应时间快速的反应时间 18分钟。1985年第一个诊断试剂盒出现。数字反映出来的数字反映出来的 不过是冰山一角不过是冰山一角 中国艾滋病：危险的泰坦尼克号中国艾滋病：危险的泰坦尼克号 染的依据。1985 HIV抗体ELISA试剂、全病毒裂解抗原（第一代）1990 HIV抗体ELI

13、SA试剂、基因工程或合成肽抗原（第二代）1992 HIV1/HIV2抗体ELISA联检试剂1994 HIV抗体双抗原夹心法ELISA试剂（第三代）1994 HIV抗体唾液检测试剂1996 家用HIV-1检测系统1996 HIV-1P24抗原检测试剂1996 HIV1抗体尿液检测试剂1997 HIV1/2/O抗体ELISA试剂1998 HIV-1/2抗原抗体联检试剂（第四代）1998 HIV抗体确认WB试剂1999 HIV-1RNA定量检测试剂2002 HIV1基因型耐药性检测试剂2003 HIV抗体快速检测试剂检测早期HIV感染具有良好的敏感性抗原或核酸检测，必要时进行随访。艾滋病检测筛查实验

14、室复检判定为阳性反应的样品，确证实验室可以直接进行确证试验。样品初筛试验初筛试验筛查试剂阳性反应阴性反应复检试验复检试验原有试剂+另一不同原理（或厂家）试剂或另外两种不同原理（或厂家）试剂均阳性反应一阴一阳均阴性反应确证试验确证试验报告阴性图图 1 1 HIVHIV 抗体筛查检测流程抗体筛查检测流程现在现在(ECL)(ECL) HIV抗原抗体联合检测，缩短窗口期，降低漏检风险 自动化，安全 随机处理标本，快速出结果项目酶免电化学发光收费试剂价格医院利润收费试剂价格医院利润HIV55550803545HBVAg8174017.722.3HCV282261204575梅计

15、1061393270112.7157.3Thank you for your attentionThank you for your attentionRoche Diagnostics (Shanghai) Limited Shanghai 200031ChinaThis presentation is our intellectual property. Without our written consent, it shall neither be copied in any manner, nor used for manufacturing, nor communicated to

16、third parties.COBAS and LIFE NEEDS ANSWERS are trademarks of Roche - -表面抗体定量检测具备溯源性表面抗体定量检测具备溯源性qHBV抗病毒治疗的重要监测指标。中国CDC报告的丙肝病例逐年大幅增高卫生部历年公布全国丙肝疫情卫生部历年公布全国丙肝疫情中国报告的丙肝病例在最近中国报告的丙肝病例在最近6 6年内几乎翻了年内几乎翻了6 6倍倍211453938052927706811003391180160200002000040000400006000060000800008000010000010000012000012000020032003年年20042004年年20052005年年20062006年年20072007年年20082008年年。1985年第一个诊断试剂盒出现。1985 HIV抗体ELISA试剂、全病毒裂解抗原（第一代）1990 HIV抗体ELI