双环醇保肝抗炎作用研究进展培训讲学

1、双环醇保肝抗炎作用研究进展肝细胞损伤和肝脏炎症坏死肝细胞损伤和肝脏炎症坏死 肝细胞损伤肝细胞损伤是各型肝病共同的病理基础及共同表现是各型肝病共同的病理基础及共同表现; 导致肝细胞变性、凋亡、坏死最终导致肝衰竭。导致肝细胞变性、凋亡、坏死最终导致肝衰竭。 肝脏炎症坏死及其所致的肝纤维化肝脏炎症坏死及其所致的肝纤维化是疾病进展的主要病理是疾病进展的主要病理学基础。学基础。 在对病因治疗的基础上有效控制肝组织炎症，有可能减少在对病因治疗的基础上有效控制肝组织炎症，有可能减少肝细胞破坏和延缓肝纤维化的发展。肝细胞破坏和延缓肝纤维化的发展。 临床常用的抗炎保肝药物临床常用的抗炎保肝药物n双环醇双环醇n甘

2、草酸制剂甘草酸制剂n水飞蓟素类水飞蓟素类n还原型谷胱苷肽还原型谷胱苷肽n多烯磷脂酰胆碱多烯磷脂酰胆碱n硫普罗宁等硫普罗宁等- -不是肝脏和血清不是肝脏和血清ALTALT和和ASTAST活性的抑制剂活性的抑制剂- -不是肝脏不是肝脏ALTALT酶蛋白合成的抑制剂酶蛋白合成的抑制剂百赛诺对转氨酶的作用百赛诺对转氨酶的作用百赛诺不是肝脏和血清ALT和AST活性的抑制剂 大鼠肝脏、血清直接温孵法，发现ALT活性不降低百赛诺不抑制小鼠肝脏和血清百赛诺不抑制小鼠肝脏和血清ALTALT、ASTAST活性活性Geng-Tao Liu, Yan Li, et al. Mechanism of protectiv

3、e action of bicyclol against CCl4-induced liver injury in mice. Liver International, 2005, 25(4):872-879 .9小鼠肝脏小鼠肝脏ALT酶蛋白纯化酶蛋白纯化免疫家兔免疫家兔兔抗小鼠肝脏兔抗小鼠肝脏ALT抗体制备抗体制备抗体抗体+小鼠给药后肝匀浆小鼠给药后肝匀浆进行免疫火箭电泳进行免疫火箭电泳测定肝脏测定肝脏ALT蛋白水平蛋白水平1-4: 正常组 82.36.85-9: 双环醇组 82.07.4 Protein: 170mg/each正常和给药小鼠肝匀浆正常和给药小鼠肝匀浆ALTALT免疫火箭电泳

4、测定免疫火箭电泳测定百赛诺不影响肝脏百赛诺不影响肝脏ALTALT酶蛋白含量酶蛋白含量Geng-Tao Liu, Yan Li, et al. Mechanism of protective action of bicyclol against CCl4-induced liver injury in mice. Liver International, 2005, 25(4):872-879 .肝细胞保护剂对转氨酶的作用（体内）肝细胞保护剂对转氨酶的作用（体内）临床耐受性试验临床耐受性试验n志愿者：志愿者：6.25-150mg, tidx4周周n对志愿者血清对志愿者血清ALT，AST活性无影响

5、。活性无影响。（结果已发表在国内外核心刊物）清除自由基、抗氧化清除自由基、抗氧化Liu GT, Li Y, Wei HL, et al. Mechanism of protective action of bicyclol against CCl4 induced liver injury in mice. Liver International. 2005, 25(4):872-879 .Effect of bicyclol on the levels of CCl3 radical as detected by ESR in liver microsomesBicyclol (200, 3

6、00 mg/kg) was given orally to mice three times before alcohol treatment. Mice were sacrificed at 12 h and 6 h after alcohol administration for GSH content determination respectively. Data were expressed as meansSD (n=8).*, P0.05, *, P0.001 vs. control group; #, P0.05 vs. alcohol group.Zhao J, Chen H

7、, Li Y. Eur J Pharmacol. 2008 ;586(1-3):322-331. Fig. 10. Time-course changes in plasma endotoxin level in acute alcohol intoxicated mice. Alcohol (6 g/kg) was administered to mice by gavage. The animals were sacrificed at 1.5, 3, 6, and 12 h after alcohol administration. Data were expressed as mean

8、sSD (n=6). , P0.01 vs. control group.Fig.11. Effect of bicyclol on plasma endotoxin level in acute alcohol-intoxicated mice. Bicyclol (200, 300 mg/kg) was given orally to mice three times before alcohol treatment. Mice were sacrificed at 1.5 h after alcohol administration.Data were expressed as mean

9、sSD (n=6). , P0.01 vs. control group;#, P0.01 vs. alcohol group.Effect of bicyclol on plasma endotoxin level in acute alcohol-intoxicated miceZhao J, Chen H, Li Y. Eur J Pharmacol. 2008 ;586(1-3):322-331. 抗肝损伤抗肝损伤- -对肝细胞对肝细胞/ /线粒体膜形态的保护作用线粒体膜形态的保护作用药物对肝线粒体膜的保护作用（体内）药物对肝线粒体膜的保护作用（体内）A A，B-B-正常对照，正常对照

10、，C C，D-D-肝损伤，肝损伤，E E，F-F-给药后给药后药物对肝细胞膜的保护作用（体外）药物对肝细胞膜的保护作用（体外）Hui-Ping Wang, Yan Li. Protective effect of bicyclol on acute hepatic failure induced by lipopolysaccharide and D-galactosamine in mice. European Journal of Pharmacology. 2006, 534(1-3):194-201.1赵冬梅，刘耕陶.双环醇对对乙酰氨基酚致小鼠肝线粒体损伤的保护作用.中国新药杂志，20

11、02，7（11）：536-5402李烨，李燕，刘耕陶.双环醇对实验性肝纤维化的防护作用及分子机制.中华医学杂志,2004,84(24):2096-21013李 烨，戴国炜，李 燕，刘耕陶.双环醇对扑热息痛弓l起小鼠肝脏能量代谢和线粒体功能障碍的影响.药学学报.2001，36（10）：723-726抗肝损伤抗肝损伤- -对线粒体功能的保护作用对线粒体功能的保护作用线粒体线粒体ATPATP酶活性酶活性线粒体肿胀度线粒体肿胀度线粒体膜流动性线粒体膜流动性抗肝损伤抗肝损伤- -对肝脏病理形态的保护作用对肝脏病理形态的保护作用1Liu GT, Li Y, Wei HL, et al. Mechanism

12、 of protective action of bicyclol against CCl4 induced liver injury in mice. Liver International. 2005, 25(4):872-879 .2Geng Tao Liu. Bicyclol: A Novel Drug For Treating Chronic Viral Hepatitis B and C.Medicinal Chemistry,2009,5,29-43.3莫成林, 李烨, 李燕. 双环醇对小鼠慢性酒精性肝损伤的保护作用 J . 中华医学杂志, 2005, 85 (48) : 340

13、9-3413.Fig. 12. Localization of liver TNF- and CD14 expression in acute alcohol-intoxicated mice. Bicyclol (200, 300 mg/kg) was given orally to mice (n=5) three times before alcohol treatment. Mice were sacrificed at 12 h after alcohol administration. 1: expression of TNF-; 2: expression of CD14. a:

14、 Control; b: Alcohol;c: Pretreatment with Bicyclol. Arrows: Positive cells. Original magnification100.抗肝损伤分子机制抗肝损伤分子机制- -抑制炎症因子表达抑制炎症因子表达Fig. 9. Effects of bicyclol on hepatic TNF- and IL-1mRNA expression in acute alcohol-intoxicated mice. Bicyclol (200, 300 mg/kg) was given orally to mice three tim

15、es before alcohol treatment. Mice were sacrificed at 12 h after alcohol administration. (A): lane 12, Control; lane 34, Alcohol; lane 56, By 200 mg/kg; lane 78, By 300 mg/kg. (B): Ratio of PCR products relative to GAPDH. Data were expressed as meansSD (n=4). *, Pb0.05 vs. control group; #, Pb0.05, #

16、, Pb0.001 vs. alcohol group.1Zhao J, Chen H, Li Y. Protective effect of bicyclol on acute alcohol- induced liver injury in mice J . Eur J Pharmacol, 2008, 586 (123) :322-331.2李烨，李燕，刘耕陶.双环醇对实验性肝纤维化的防护作用及分子机制.中华医学杂志,2004,84(24):2096-2101抗肝损伤分子机制抗肝损伤分子机制- -抑制炎症导致的肝细胞凋亡抑制炎症导致的肝细胞凋亡赵冬梅、刘耕陶. 双环醇对刀豆蛋白A所致小鼠

17、肝细胞核DNA损伤的保护作用. 中华医学杂志，2001, 81(14):844-848 .A: 100bp.DNA条带标准品B C: 正常对照组D E F: ConA模型对照组G H I: 百赛诺150mg/kgWang H, Li Y. Eur J Pharmacol. 2006 ;534(1-3):194-201. Effect of bicyclol on liver injury induced by lipopolysaccharide/D-galactosamine in mice Liver specimens were obtained at 6 h after LPS/Dga

18、lactosamine injection. (A) Normal control; (B) (C) carboxymethyl cellulose vehicle administration 1 h before LPS/GalN injection; (D) bicyclol 300 mg/kg administration for 3 times 1 h before LPS/D-galactosamine injection; (E) bicyclol 300 mg/kg administration once 1 h before LPS/D-galactosamine injec

19、tion. Original magnification X100.小结小结 双环醇体外对血清双环醇体外对血清ALTALT、ASTAST的活性无直接抑制的活性无直接抑制作用，体内给药对肝脏作用，体内给药对肝脏ALTALT蛋白水平无影响。临床蛋白水平无影响。临床志愿者口服药物对转氨酶活性也无抑制作用。志愿者口服药物对转氨酶活性也无抑制作用。 保肝药的降酶作用来自保肝药的降酶作用来自- - -肝细胞膜和线粒体膜形态和功能的改善肝细胞膜和线粒体膜形态和功能的改善- -抑制炎症因子及相关受体的表达抑制炎症因子及相关受体的表达- -抑制炎症导致的肝细胞凋亡抑制炎症导致的肝细胞凋亡双环醇的临床使用依据双环

20、醇的临床使用依据n慢性乙型肝炎防治指南慢性乙型肝炎防治指南(2010(2010年更新版年更新版) )n非酒精性脂肪性肝病诊疗指南非酒精性脂肪性肝病诊疗指南(2010(2010年修订版年修订版) )n酒精性肝病诊疗指南酒精性肝病诊疗指南(2010(2010年修订版年修订版) )n河南省新农合按病种付费临床路径河南省新农合按病种付费临床路径“酒精性肝炎酒精性肝炎” （豫卫医改（豫卫医改（20122012）4 4号文件）号文件）1.1.双环醇治疗酒精性肝病双环醇治疗酒精性肝病医院：卫生部中日友好医院医院：卫生部中日友好医院负责人：马安林负责人：马安林试验组：试验组： 54 54例，给予百赛诺例，给予

21、百赛诺50mg50mg，tid. tid. 对照组：对照组： 49 49例，给予多烯磷脂酰胆碱例，给予多烯磷脂酰胆碱456mg456mg，tid. tid. 2 2组均连续用药组均连续用药3636周，周，试验组试验组2323例、对照组例、对照组2121例患者完成治疗例患者完成治疗前后前后2 2次肝穿刺活组织检查次肝穿刺活组织检查马安林马安林, 郭新珍郭新珍, 刘霞刘霞, 等等.双环醇与多烯磷脂酰胆碱治疗酒精性肝病的疗效比较双环醇与多烯磷脂酰胆碱治疗酒精性肝病的疗效比较. 中华肝脏病杂志中华肝脏病杂志. 2011, 19(6):471-472双环醇与多烯磷脂酰胆碱治疗酒精性肝病的疗效比较双环醇与

22、多烯磷脂酰胆碱治疗酒精性肝病的疗效比较马安林，郭新珍，刘霞马安林，郭新珍，刘霞.中华肝脏病杂志中华肝脏病杂志.2011.l9(6):471-472.双环醇与多烯磷脂酰胆碱治疗酒精性肝病的疗效比较双环醇与多烯磷脂酰胆碱治疗酒精性肝病的疗效比较马安林，郭新珍，刘霞马安林，郭新珍，刘霞.中华肝脏病杂志中华肝脏病杂志.2011.l9(6):471-472.双环醇与多烯磷脂酰胆碱治疗酒精性肝病的疗效比较双环醇与多烯磷脂酰胆碱治疗酒精性肝病的疗效比较马安林，郭新珍，刘霞马安林，郭新珍，刘霞.中华肝脏病杂志中华肝脏病杂志.2011.l9(6):471-472.双环醇与多烯磷脂酰胆碱治疗酒精性肝病的疗效比较双

23、环醇与多烯磷脂酰胆碱治疗酒精性肝病的疗效比较马安林，郭新珍，刘霞马安林，郭新珍，刘霞.中华肝脏病杂志中华肝脏病杂志.2011.l9(6):471-472.研究结果及结论研究结果及结论 百赛诺治疗组百赛诺治疗组ALTALT及及ASTAST的下降速度和程度优于多烯的下降速度和程度优于多烯磷脂酰胆碱对照组。磷脂酰胆碱对照组。 百赛诺治疗及对照组百赛诺治疗及对照组3636周后可使血清周后可使血清GSTPXGSTPX水平水平显著上升，显著上升，MDAMDA水平显著下降。水平显著下降。 通过比较治疗前后的超声影像学表现，我们看到两通过比较治疗前后的超声影像学表现，我们看到两组治疗前后均有一定程度的改善，而

24、且百赛诺可在一定组治疗前后均有一定程度的改善，而且百赛诺可在一定程度上改善肝内脂肪沉积、炎症死及纤维化，尤其对于程度上改善肝内脂肪沉积、炎症死及纤维化，尤其对于炎症的改善程度。炎症的改善程度。2.2.百赛诺治疗非酒精性脂肪肝百赛诺治疗非酒精性脂肪肝注: 1、患者诊断标准符合2006年2月非酒精性脂肪性肝病诊疗指南 2、随机分组采用 SPSS15.0统计软件 3、治疗期间均未使用其他保肝药物78例20岁64岁非酒精性脂肪性肝病患者，随机分为两组采用减轻体重(1200g/周)为前提的基础治疗联合药物治疗，两组疗程均为24周治疗组（40例）：基础治疗+百赛诺50mg，tid对照组（38例）：基础治疗

25、+多烯磷脂酰胆碱456mg，tid治疗前后检测：人体学指标、B超、肝功能检测、肝脏组织学检查n苏红领苏红领,韩英韩英,樊代明樊代明,等等.双环醇双环醇与多烯磷脂酰胆碱治疗非与多烯磷脂酰胆碱治疗非酒精性脂肪肝的疗效比较酒精性脂肪肝的疗效比较. .中华肝脏病杂志中华肝脏病杂志.2011,19(7):552-553.1051711322320302515035%百赛诺组多烯磷脂酰胆碱组# 组间比，P 0.05 完全应答率部分应答率研究结果研究结果- -百赛诺组部分应答率优于对照组百赛诺组部分应答率优于对照组应答标准：(1)完全应答：ALT复常；超声远场回声衰减程度较治疗前改善，且GST-PX和MDA

26、至少l项较治疗前改善；脂变、炎症及坏死积分较治疗前减少2分以上。(2)部分应答：ALT复常；超声检查指标改善不显著；组织学改变不明显。(3)无应答：未达到上述指标者1.百赛诺显著改善肝功能指标研究结果研究结果百赛诺显著改善肝功和血脂指标百赛诺显著改善肝功和血脂指标ALP：碱性磷酸酶 GGT：谷氨酰转肽酶2.百赛诺明显改善血脂指标3.百赛诺明显改善B超积分研究结果研究结果百赛诺显著改善百赛诺显著改善B B超积分和炎症超积分和炎症近场回声增高、灶性高回声或肝光点增粗各计1分；远场回声衰减、肝肿大、肝内管道系统显示不清或无法辨认各计2分。4.百赛诺改善脂肪变性、炎症、纤维化*与对照组相比，P0.05

27、百赛诺治疗后脂肪变、炎症、纤维化不同程度减轻百赛诺治疗后脂肪变、炎症、纤维化不同程度减轻苏木精一伊红染色脂肪变性和炎症坏死治疗前治疗后纤维化表现网状纤维染色检查项目：ALT、AST、TBiL3.3.百赛诺防治化疗药物所致肝损害百赛诺防治化疗药物所致肝损害周建凤, 陈书长, 白春梅, 等. 双环醇片防治化疗药物性肝损害的研究. 肝脏, 2007, 12(4):286-287 .结果结果- -百赛诺对肝损害的治疗作用百赛诺对肝损害的治疗作用结果结果- -百赛诺对肝损害的预防作用百赛诺对肝损害的预防作用 本研究表明口服双环醇片可有效治疗化疗药物性肝本研究表明口服双环醇片可有效治疗化疗药物性肝 损害，

28、中位治疗损害，中位治疗1212天后肝功能即显著恢复。天后肝功能即显著恢复。 化疗同时并用双环醇片，患者肝功能损害的发生率化疗同时并用双环醇片，患者肝功能损害的发生率 大为下降，程度也明显减轻，保障了化疗按时足量大为下降，程度也明显减轻，保障了化疗按时足量 进行。进行。研究结论研究结论Xie W, Shi G, Zhang H, et al. Hepatology International. 2012, 6(2):441-448 A randomized, multi-central, controlled study of patients with hepatitis B e antige

29、n-positive chronic hepatitis B treated by adefovir dipivoxil or adefovir dipivoxil plus bicyclolA randomized, multi-central, controlled study of patients with hepatitis B e antigen-positive chronic hepatitis B treated by adefovir dipivoxil or adefovir dipivoxil plus bicyclolXie W, Shi G, Zhang H, et

30、 al. Hepatology International. 2012, 6(2):441-448 A randomized, multi-central, controlled study of patients with hepatitis B e antigen-positive chronic hepatitis B treated by adefovir dipivoxil or adefovir dipivoxil plus bicyclolXie W, Shi G, Zhang H, et al. Hepatology International. 2012, 6(2):441-

31、448 Xie W, Shi G, Zhang H, et al. Hepatology International. 2012, 6(2):441-448 A randomized, multi-central, controlled study of patients with hepatitis B e antigen-positive chronic hepatitis B treated by adefovir dipivoxil or adefovir dipivoxil plus bicyclolFig. 6 Necroinflammation and fibrosis scores of patient No. 2were signi