叶片荧光测量实验报告精品资料

1、叶片荧光测量实验报告1. 实验目的2. 实验方法利用 PAM100,荧光成像系统测量叶绿素荧光3. 实验原理及一些参数的意义荧光的变化反映光合与热耗散的变化。光化学淬灭（ Photochemical Quenching）:由于光合作用引起的荧光下降，反映了光合活性的高低。qP=(Fm-Fs)/Fv=1-(Fs-Fo)/(Fm-Fo) （基于 “沼泽模型 ”）qL=(Fm-F)/(Fm-Fo)·Fo/F=qP ·Fo/F（基于 “湖泊模型 ”）非光化学淬灭（ Non-Photochemical Quenching）:由于热耗散引起的荧光下降。qN=(Fv-Fv )/Fv=1-

2、(Fm-Fo)/(Fm-Fo) NPQ=(Fm-Fm)/Fm=Fm/Fm-1 ，不需测定 Fo，适合野外调查 qN 或 NPQ 反映了植物耗散过剩光能转化为热的能力， 反映了植物的光保护能力。Fv/Fm =(Fm-Fo)/Fm : PS II 的最大量子效率，反映植物潜在最大光合能力，高等植物一般在 0.80.84 之间，当植物受到胁迫 （Stress）时，Fv/Fm 显著下降。PS II = Yield = (Fm -Fs)/Fm=F/Fm = qP·Fv/Fm: 任一光照状态下 PS II 的实际量子产量（实际光合能力、实际光合效率）不需暗适应，不需测定Fo，适合野外调查。Y(N

3、PQ)=1-Y(II)-1/(NPQ+1+qL(Fm/Fo-1)：调节性能量耗散， PS II处调节性能量耗散的量子产量。若Y(NPQ)较高，一方面表明植物接受的光强过剩， 另一方面则说明植物仍可以通过调节（如将过剩光能耗散为热）来保护自身。Y（NPQ）是光保护的重要指标。Y(NO)=1/(NPQ+1+qL(Fm/Fo-1) ：非调节性能量耗散PS II 处非调节性能量耗散的量子产量。若Y(NO) 较高，则表明光化学能量转换和保护性的调节机制（如热耗散） 不足以将植物吸收的光能完全消耗掉。也就是说，入射光强超过了植物能接受的程度。这时，植物可能已经受到损伤，或者（尽管还未受到损伤）继续照光的话

4、植物将要受到损伤。Y（NO）是光损伤的重要指标。P：光合速率，即相对电子传递速率rETRPm: 最大光合速率，即最大相对电子传递速率rETRmax：初始斜率，反映了光能的利用效率：光抑制参数Ik=Pm/：半饱和光强，反映了样品对强光的耐受能力。AL: 作用光ML: 检测光SP/P+Fsp:饱和脉冲光注：光化学淬灭可以被一种短饱和脉冲光（0.21 s）暂时完全抑制，剩余的荧光淬灭就是非光化学淬灭。 （叶绿素 a 荧光理论及其应用张西斌）4. 实验步骤4.1 Dual-Pam100的操作步骤参数调整打开 Dual-Pam100 的界面，更改下面参数：Mode:fluo+P700;Means lig

5、ht:fiuo-int=10P700-int=5Act light:Far red light=5Width=40sSat pulse:P+F+sp-int=10;点 Light ，进入界面，再点edit 进行下面参数的编辑：Intense1，4,8,12,14,16,18,19,20Time2,2,2,2,2,2,2,2,2,之后的全部设置为0；进入测定界面开始测定回到 slow kinetics 界面点击 F0， Fm(确定 Y（II ）值 0.8-0.85 之间 )点 Bal( 平衡光系统 I ， II ) 点 Pm( 待回复灰色 ) 点 start(过 4s 后) 点 Al 作用光（过

6、 3min半）点 P+F+sp 饱和光（ 此时一般会观察到红色曲线达到平衡 ）过 30s 左右关掉 Al( 曲线会下降 ) 再过 1min 左右（曲线平稳）点 stop在当前界面点击曲线保存按钮保存曲线。回到 light curve 界面点 Bal点 start（出现对话框 new F0,Fm and Pm-determindtion 点NO ）等曲线绘成后点report 保存数据数据保存后手动清空当前界面数据。4.2 荧光成像系统的操作先打开荧光成像仪再打开电脑对应系统将叶片按要求放在叶室；进入 setting 界面如下调整参数：Meas.Light-int=1Frequence=1;Act.