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文档简介

1、 实验技术二 普通光学显微镜油镜的使用一、实验目的一、实验目的1. 熟悉普通光学显微镜的构造及各部分的功能；2. 学习并掌握油镜的原理和使用技术；3. 观察常见微生物的形态。二、显微镜的基本结构及油镜的工作原理二、显微镜的基本结构及油镜的工作原理 显微镜的基本结构机械部分光学部分底座镜柱镜臂 镜筒 载物台 物镜转换器粗准焦螺旋细准焦螺旋目镜物镜反光镜聚光器 油镜的使用需在载玻片与镜头之间加滴香柏油，主要原因有： 1. 增加照明亮度.因其折射率与玻璃相同，光线通过载玻片直接通过油质进入物镜而不发生折射其中NA= n.sin。为光线最大入射角的半数，一般来说最大只能达到90，而n为介质折射率。由于

2、香柏油的折射率（1.51）比空气及水的折射率（分别为1.0和1.33）要高，因此以香柏油作为介质的油镜所能达到的数值孔径值要高于低倍镜、高倍镜。NA 光波波长物镜的数值孔径值分辨率 =2.增加显微镜的分辨率三、实验器材三、实验器材1. 示玻片： 放线菌、细菌三型、青霉 菌、曲霉菌染色玻片标本。2. 试剂： 香柏油、二甲苯。3. 其他器材：显微镜、擦镜纸、吸水纸。四、操作步骤1.观察前的准备： 2. 显微镜观察： （1）低倍镜观察：（2）高倍镜观察：（3）油镜观察：（1）取镜安放（2）光源调节滴香柏油调焦低倍镜的观察高倍镜的观察侧面注视，升载物台使油镜与香柏油接触油镜的观察转油镜调焦选定视野放置

3、切片调节光源和焦距（4）还原各部件。反光镜垂直于镜座，将物镜转 成“八”字 形，再向下旋。同时把聚光镜降下。 （1）降下载物台，取下载玻片。3. 显微镜用毕后的处理 （2）擦香柏油 （3）用擦镜纸清洁其他物镜及目镜；用绸布 清洁显微镜的金属部件。先用擦镜纸拭去镜头上的先用擦镜纸拭去镜头上的香柏油，再蘸少许二甲苯香柏油，再蘸少许二甲苯擦去残留油迹，最后用干擦去残留油迹，最后用干净擦镜纸擦去残留二甲苯。净擦镜纸擦去残留二甲苯。五、思考问题五、思考问题 1. 用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片和镜头之间加滴什么油？起什么作用？2.比较低倍镜、高倍镜及油镜各方面的差异。为什么在使用高倍镜及油镜时应特别注意避免粗调节器的误操作？ 3.什么是物镜的同焦现象？它在显微镜观察中有什么意义？ 4. 影响显微镜分辨率的因

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