常用固定液的配制

1、常用固定液的配制1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液（FAA）50%或 70%酒精90ml + 冰醋酸 5ml + 福尔马林（37%40%甲醛 ）5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精，可防止材料收缩。若材料坚硬，可略减冰醋酸，略增福尔马林。若材料易收缩，可稍增加冰醋酸。久置时另加入5ml 甘油以防蒸发和材料变硬。此液又可作保存液。固定时间最多10h。如果用在植物胚胎的材料上，改用下面的配方，效果较好：50%酒精89ml + 冰醋酸 6ml + 福尔马林5ml2. 福尔马林-丙酸-酒精固定液（FPA）福尔马林5ml +

2、丙酸 5ml + 70% 酒精 90ml固定一般的植物组织，通常固定824h,可长久保存。3. 酒精-醋酸-氯仿固定液（卡诺固定液，Carnoy fixative ）配方I :纯酒精3份+乙酸1份配方II :纯酒精 6份+乙酸1份+氯仿3份配方出：甲醇6份+乙酸1份+氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料，为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。固定时间不宜过久。4. 酒精-福尔马林固定液福尔马林26（ 610） ml + 70% 酒精 100ml固定植物一般组织，尤其适用于萌发的花粉管的固定。通常固定24h,亦可长久保存。5. 酒精-福尔马林-甘油固定液95%酒精 150ml + 5% 福尔马林10

3、0ml + 甘油 50ml此液也可长期储存材料。6. 铬酸-醋酸固定液根据固定对象的不同，可分为强、中、弱3 种配方：（1）弱液配方：10%铬酸2.5ml + 10% 醋酸 5ml +蒸馏水 92.5ml（2）中液配方：10%铬酸7ml + 10% 醋酸10ml +蒸馏水 83ml（ 3）强液配方：10%铬酸 10ml + 10%醋酸 30ml + 蒸馏水 60ml弱液配方用在固定较柔软的材料，如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。固定时间较短，一般为数小时，最长可固定 1224h,但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至1h。中液配方用于固定根尖、茎尖、未成熟子房和胚珠等。为了易于渗透，可在此液中加入2

4、%的麦芽糖或尿素。固定时间1224h。强液配方用于固定木质根、茎、成熟子房等。为了易于渗透，可在此液中加入2%的麦芽糖或尿素。固定时间1224h或更长。7. 铭酸-醋酸-福尔马林混合液这3种药品混合在一起所配成的各种固定液，通常称纳瓦申固定液（ Nawashin fixative）,简称Craf。配方见下表：常备液纳瓦申原液（ml）纳瓦申固定液（ml）桑弗利斯液（ml）InmWV甲液1%铭酸40404010%需酸1581013铭酸1520206070冰醋酸108蒸储水75454040322079乙液福尔马林40101010203064蒸储水60909080807036甲、乙两液均为贮备液，使用

5、之前才将二者混合。适用于组织学和细胞学的研究材料。柔嫩而含水多的材料，可选用I或n固定，坚韧而成熟的材料，可用高浓度的IV或V,一般材料多用出。制作染色体和有丝分裂的纺锤体标本时，常用桑弗利斯固定液。I、n、出、w、V固定液的固定时间为1248h,桑弗利斯液固定时间为 46h。8. 铭酸-钺酸-醋酸固定液（Flemming fixative ）强液：10%铭酸水溶液3.1ml + 2%钺酸的铭酸（2%）水溶液12ml + 10%醋酸水溶液30ml +蒸储水11.9ml中液：10%需酸水溶液 0.33ml + 2%钺酸的铭酸（2%）水溶液0.62ml + 10%醋酸水溶液3ml +蒸储水6.27

6、ml弱液：10%铭酸水溶液1.5ml + 2%钺酸的铭酸（2%）水溶液5ml + 10%醋酸水溶液1ml +蒸储水96.5ml此固定液需现用现配。固定 2348h。可用于各种植物组织的固定。9. Lichent 固定液1%铭酸水溶液15ml +冰醋酸5ml +福尔马林80ml此固定液适用于固定丝状藻类和真菌1 . 番红水溶液 番红0.1g溶入蒸储水，定溶至100ml。用前过滤。2 . 番红乙醇溶液番红1g溶入50% （或95%）酒精，定溶至100ml。用前过滤。3 . 固绿染液固绿 0.1g 溶入95%酒精，定溶至100ml。4 . 碘 -碘化钾染液碘化钾溶入100ml蒸储水，再加入1g碘，溶

7、解后即可使用。5 .苏丹出（或IV）染液将0.1g苏丹山或IV溶解在 50ml丙酮中，再加入 70%酒精50ml o6 .改良苯酚品红染液原液A:将3g碱性品红溶入100ml 70%酒精，此液可长期保存。原液B:将10mlA液加入到90ml 5%苯酚水溶液中。原液C:将55mlB液加入到6ml的冰醋酸和6ml的38%的甲醛中。染色液：取C液20ml,加45%冰醋酸80ml,充分混匀，再加入 1g山梨醇，放置14天后使用，可保存3 年。7 . 间苯三酚染液将 5g 间苯三酚溶入100ml 95% 酒精（若溶液呈黄色，即为失效）。8 . 中性红染液将 0.1g 中性红溶入100ml 蒸馏水，用时稀

8、释10倍。9 . 钌红染液将 510mg 钌红溶入2550ml 蒸馏水，现用现配。10 .龙胆紫染液将 0.2g 龙胆紫溶入100ml 蒸馏水。现常用结晶紫代替。必要时可将医用紫药水稀释5 倍后代用。11 .铁醋酸洋红染液先将100ml 45% 醋酸水溶液置入200ml 的锥形瓶中煮沸，移去火苗，然后慢慢地分多次加入1g洋红粉末（切记不可一次倒入）。待全部倒入后，再煮沸 12min ,并悬入一生锈的小铁钉于染液中，过1min 后取出，使染色剂略含铁质，以增加染色性能。静置12h 后过滤于棕色瓶中备用（置于避光处）。12 .苏木精染液苏木精的配方很多，常用的有如下3 种：配方I:苏木精水溶液0.

9、5g 苏木精溶入100ml 煮沸的蒸馏水中，静置24h 后可使用。配方 n :代氏苏木精（ Delafield ' s haematoxylin甲液：苏木精1g + 无水酒精6ml乙液：硫酸铝铵（铵矾）10g + 蒸馏水 100ml丙液：甘油25ml + 甲醇 25ml分别配制甲、乙两液，将甲液一滴滴地加入乙液中，充分搅拌后，放入广口瓶中用纱布蒙住瓶口，置于温暖和光线充足处710 天，再加入丙液，混匀后静置12 月，至颜色变为深紫色后，过滤备用，可长期保存。配方出：爱氏苏木精（ Ehrlich ' s haematoxy|in苏木精 1g + 无水或 95%酒精 50ml +

10、蒸馏水 50ml + 甘油 50ml + 冰醋酸 5ml + 硫酸铝钾 （钾矶）35g。配制时，先将苏木精溶于酒精中，然后依次加入蒸储水、甘油和冰醋酸，最后加入研细的钾矾，边加边搅拌，直到瓶底出现钾矾结晶为止。混合后溶液颜色呈淡红色，放入广口瓶中，用纱布封口，自然氧化12 月， 至颜色变为深红色时即可过滤备用，可长期保存。13 .席夫试剂（Schiff s reg） ent将 0.5g 碱性品红溶入煮沸的蒸馏水，搅拌使其充分溶解。冷却至50时，过滤于棕色细口瓶中，加入10ml1mol/L盐酸。冷却至 25c左右，加入 1g偏亚硫酸钾或钠（Na2s2O5或K2S2O5） ，振荡使其溶解，密封瓶口

11、，置于黑暗低温处过夜。次日检查，若染色液透明无色或呈淡茶色，即可使用。若染色较深，可加入少量优质活性炭（0.52g）,振荡1min,置于4冰箱中过夜，过滤使用。此液配好后，应塞紧瓶塞，外包黑纸，贮藏于冰箱中。14 .硫堇染液将 0.25g 硫堇粉末，溶于100ml 蒸馏水中，即可使用。使用此液时。需用微碱性自来水封片或用 1%NaHCO3 水溶液封片，能产生多色反应。15 .亚甲基蓝染液0.1g 亚甲基蓝溶入100ml 蒸馏水即可。16 .詹纳斯绿 B （Janus green B）染液5.18g 詹纳斯绿溶入100ml 蒸馏水， 配成饱和水溶液。用时需稀释，稀释倍数应视材料而异。17.苏木精

12、-曙红（HE）染液曙红（Eosin） ，酸性染料，为最优良的动物细胞染料，与苏木精配合使用（复染）对动物组织进行对比染色。苏木精的染液的配方同上。曙红有以下配制方法：配方I:曙红 0.5g + 95%酒精100ml配方n：曙红0.5g +蒸储水100ml配方出：曙红0.5g + 95%酒精25ml +蒸储水75ml18蛋白胶亦称梅氏蛋白的制作将鸡蛋一个打破让蛋清流入烧杯内，用筷子充分条大雪花状泡沫，然后将它用双层纱布过滤到量筒中，经数小时或一夜，过滤出透明的蛋白液，此时再加入等量的甘油，稍稍振摇使两者混合，最后加入麝香草酚（thymol ） （ 1:100）做防腐作用，可保存几个月到一年（4冰箱中） 。载玻片和盖玻片的清洗方