实验 -薄层色谱法

1、2021-12-14精选ppt1实验实验 3 薄层色谱法薄层色谱法2021-12-14精选ppt21. 1. 了解色谱分离的原理及其应用。了解色谱分离的原理及其应用。2. 2. 初步掌握薄层色谱的操作技能。初步掌握薄层色谱的操作技能。目的和要求目的和要求2021-12-14精选ppt32021-12-14精选ppt4 色谱法（色谱法（ChromatographyChromatography）亦称色层法、层）亦称色层法、层析法等。色谱法是分离、纯化和鉴定有机化合物的析法等。色谱法是分离、纯化和鉴定有机化合物的重要方法之一。重要方法之一。 色谱法的基本原理是色谱法的基本原理是利用混合物各组分在某一

2、利用混合物各组分在某一物质中的吸附或溶解性能物质中的吸附或溶解性能（分配）的不同，或其亲（分配）的不同，或其亲和性的差异，使混合物的溶液流经该种物质进行反和性的差异，使混合物的溶液流经该种物质进行反复的吸附或分配作用，从而使各组分分离。复的吸附或分配作用，从而使各组分分离。色谱法原理色谱法原理2021-12-14精选ppt5分分 类类2021-12-14精选ppt66如上色谱都属吸附色谱类型，用固体吸附剂作固如上色谱都属吸附色谱类型，用固体吸附剂作固定相，以不同溶剂作流动相，依据样品中各组分定相，以不同溶剂作流动相，依据样品中各组分在吸附剂上吸附性能的差别来实现分离在吸附剂上吸附性能的差别来实

3、现分离仪器分析实验 高效液相色谱高效液相色谱 (HPLC) (HPLC) 气相色谱气相色谱 (GC)(GC)2021-12-14精选ppt7色谱法三要素色谱法三要素吸附剂（固定相）：吸附剂（固定相）： 用于与样品发生吸附作用的固定不动的用于与样品发生吸附作用的固定不动的 物质。在混合物样品流经固定相的过程物质。在混合物样品流经固定相的过程 中，由于各组分与固定相吸附力的不同，中，由于各组分与固定相吸附力的不同， 就产生了速度的差异，从而将混合物中就产生了速度的差异，从而将混合物中 的各组分分开。的各组分分开。2021-12-14精选ppt8吸附色谱三要素吸附色谱三要素吸附吸附剂剂2021-12

4、-14精选ppt9吸附色谱三要素吸附色谱三要素吸附吸附剂剂2021-12-14精选ppt10吸附色谱三要素吸附色谱三要素吸附吸附剂剂2021-12-14精选ppt11活性氧化铝含水量（）硅胶含水量（）0 00 03 35 58 815151010252515153838吸附色谱三要素吸附色谱三要素吸附吸附剂剂2021-12-14精选ppt12洗脱剂（流动相）：洗脱剂（流动相）： 也称展开剂，在色谱过程中起到将吸附也称展开剂，在色谱过程中起到将吸附 在固定相上的样品洗脱的作用。在固定相上的样品洗脱的作用。乙酸乙酸 吡啶吡啶 水水 醇类（甲醇醇类（甲醇 乙醇乙醇 正丙醇）正丙醇） 丙酮丙酮 乙酸乙

5、酯乙酸乙酯 乙醚乙醚 氯仿氯仿 二氯甲烷二氯甲烷 甲苯甲苯 环己烷环己烷 正正己烷己烷 石油醚石油醚 * * 从前到后从前到后- -洗脱能力降低。洗脱能力降低。2021-12-14精选ppt13结论：若样品极性越小，或流动相极性越大，样品结论：若样品极性越小，或流动相极性越大，样品 在固定相上的移动速度则越快。在固定相上的移动速度则越快。2021-12-14精选ppt14StahlStahl简图简图 （1 1）离化合物的极性；）离化合物的极性；（2 2）吸附剂的活度；）吸附剂的活度；（3 3）展开剂的极性。）展开剂的极性。若将这三个因素各自固定在圆周的若将这三个因素各自固定在圆周的三分之一，转

6、动圆盘正中的三角形，三分之一，转动圆盘正中的三角形，如果角如果角A A指向极性物质，则角指向极性物质，则角B B指向指向活度小的吸附剂，角活度小的吸附剂，角C C就指向选用极就指向选用极性展开剂；性展开剂；A, B, C, 处则是合理的处则是合理的选择组合。选择组合。精选ppt15有机化学中的应用有机化学中的应用* * 分离混合物：分离混合物： 一些结构类似、理化性质也相似的化合物组成的一些结构类似、理化性质也相似的化合物组成的混合物，一般应用化学方法分离很困难，但应用色谱混合物，一般应用化学方法分离很困难，但应用色谱法分离，有时可得到满意的结果。法分离，有时可得到满意的结果。* * 精制提纯

7、化合物：精制提纯化合物： 有机化合物中含有少量结构类似的杂质，不易除有机化合物中含有少量结构类似的杂质，不易除去，可利用色谱法分离以除去杂质，得到纯品。去，可利用色谱法分离以除去杂质，得到纯品。2021-12-14精选ppt16* * 鉴定化合物：鉴定化合物： 在条件完全一致的情况，纯粹的化合物在薄层在条件完全一致的情况，纯粹的化合物在薄层色谱呈现一定的移动距离，称比移值（色谱呈现一定的移动距离，称比移值（R Rf f值），所值），所以利用色谱法可以鉴定化合物的纯度或确定两种性以利用色谱法可以鉴定化合物的纯度或确定两种性质相似的化合物是否为同一物质。质相似的化合物是否为同一物质。* * 跟踪一

8、些化学反应进程：跟踪一些化学反应进程： 可以利用薄层色谱或纸色谱观察原料色点的逐可以利用薄层色谱或纸色谱观察原料色点的逐步消失，以证明反应完成与否。步消失，以证明反应完成与否。2021-12-14精选ppt17薄层色谱薄层色谱 薄层色谱又叫薄板层析，是色谱法中的一种，是快速薄层色谱又叫薄板层析，是色谱法中的一种，是快速分离和定性分析少量物质分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，属固的一种很重要的实验技术，属固- -液吸附色谱，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点，一方面液吸附色谱，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点，一方面适用于适用于少量样品少量样品（几到几微克，甚至（几到几微克，甚至0.010.0

9、1微克）的分离；微克）的分离；另一方面在制作薄层板时，把吸附层加厚加大，又可用来另一方面在制作薄层板时，把吸附层加厚加大，又可用来精制样品精制样品，此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生，此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。此外，薄层色谱法还变化而不能用气相色谱分析的物质。此外，薄层色谱法还可用来可用来跟踪有机反应跟踪有机反应及进行及进行柱色谱之前的一种柱色谱之前的一种“预试预试”。2021-12-14精选ppt18一、实验步骤一、实验步骤薄层板的制备薄层板的制备展开剂的选择展开剂的选择点样点样展开展开显色显色比移值比移值干铺法干铺法倾注法倾注法紫外光显色

10、法紫外光显色法碘蒸气显色法碘蒸气显色法试剂显色法试剂显色法2021-12-14精选ppt191. 1. 制薄层板制薄层板硬板制备：硬板制备：50mL50mL烧杯中放置烧杯中放置10g10g硅胶硅胶GFGF254 254 ，逐渐加入，逐渐加入5%5%羧甲基纤维素钠（羧甲基纤维素钠（CMCCMC）水溶液）水溶液7mL7mL，调成均匀的糊状。，调成均匀的糊状。将其涂于三片玻璃板（将其涂于三片玻璃板（7.57.52.5 cm)2.5 cm)上，室温放置半小上，室温放置半小时后，放入烘箱中在时后，放入烘箱中在110110恒温半小时，即制得硬板。恒温半小时，即制得硬板。精选ppt202. 2. 点样点样样

11、品准备：样品准备：偶氮苯的纯化偶氮苯的纯化 样品：样品： 1% 偶氮苯溶液；偶氮苯溶液； 展开剂：展开剂：9:1 石油醚石油醚/乙酸乙酯乙酸乙酯 1:3 石油醚石油醚/乙酸乙酯乙酸乙酯2. 苏丹苏丹的纯化的纯化 样品：样品： 1%苏丹苏丹的溶液；的溶液； 展开剂：展开剂：9:1 石油醚石油醚/乙酸乙酯乙酸乙酯 1:3石油醚石油醚/乙酸乙酯乙酸乙酯3. 混合样品的分离混合样品的分离 样品：样品： 1%偶氮苯和偶氮苯和1%苏丹苏丹溶液混合样品溶液混合样品 展开剂：展开剂：9: 1石油醚石油醚/乙酸乙酯乙酸乙酯2021-12-14精选ppt21u小极性。小极性。2021-12-14精选ppt22 微

12、量圆环技术微量圆环技术 1 1 用环己烷展开用环己烷展开 2 2 用苯展开用苯展开 3 3 用氯仿展开用氯仿展开2021-12-14精选ppt23展开槽 普通展开槽普通展开槽 双底展开槽双底展开槽2021-12-14精选ppt24 多次展开多次展开 一次展开未达满意分离时，可将一次展开未达满意分离时，可将薄层板干薄层板干 燥后再次用同一种溶剂展开，可重复多燥后再次用同一种溶剂展开，可重复多次，直到混合物分离为止。次，直到混合物分离为止。 梯度展开梯度展开 混合物性质差别较大时，一种流混合物性质差别较大时，一种流动相不能有效分离时，可采用不同溶剂依次展开不动相不能有效分离时，可采用不同溶剂依次展

13、开不同距离。同距离。 二维展开二维展开在两个垂直的方向上进行展开。将在两个垂直的方向上进行展开。将样品点在薄层板的一个角上，展开适当距离后，挥样品点在薄层板的一个角上，展开适当距离后，挥干溶剂，再将薄层板以与原展开方向成干溶剂，再将薄层板以与原展开方向成 90 90 的方的方向进行展开。向进行展开。2021-12-14精选ppt25原点原点1 12 22021-12-14精选ppt26薄层色谱示意图薄层色谱示意图12-132-22-32-42021-12-14精选ppt274.4.显色及数据记录显色及数据记录2021-12-14精选ppt281. 1. 板点样需很轻，否则固定相会粘到点样管下方。板点样需很轻，否则固定相会粘到点样管下方。2. 2. 一根点样管只能点一种样品，否则有交叉污染。一根点样管只能点一种样品，否则有交叉污染。n 样品点直径应不超过样品点直径应不超过 2 mm2 mm，样品点决不能浸到展开，样品点决不能浸到展开剂中。剂中。4. 4. 展开剂离薄层板上缘约展开剂离薄层板上缘约0.5 cm0.5 cm时应停止走板，取出时应停止走板，取出 晾干。不可使展开剂走到板的尽头。板取出后要及晾干。不可使展开剂走到板的尽头。板取出后要及 时标记