疟原虫的防治监测1

1、疟原虫的防治监测疟原虫的防治监测 2疟原虫防治监测目标及要求疟原虫防治监测目标及要求l20152015年，福田全区无本地感染病例，年，福田全区无本地感染病例，20172017年，实年，实现消除疟疾的目标。现消除疟疾的目标。l及时发现，报告及时率及时发现，报告及时率100%100%，实验室确诊率，实验室确诊率100%100%。l我院今年任务：我院今年任务：170170l不定期抽查，抽检不定期抽查，抽检10%10%阴性血片，抽查考试阴性血片，抽查考试l登记信息要详细，地址电话必留。登记信息要详细，地址电话必留。 3疟原虫生活史疟原虫生活史l疟原虫是疟疾的病原体疟原虫是疟疾的病原体l寄生于人体的疟原

2、虫有寄生于人体的疟原虫有 间日疟原虫间日疟原虫 p.vp.v 恶性疟原虫恶性疟原虫 p.fp.f 三日疟原虫三日疟原虫 p.mp.m 卵形疟原虫卵形疟原虫 p.op.o在国内：多间日疟和恶性疟，极少三日疟和卵形疟在国内：多间日疟和恶性疟，极少三日疟和卵形疟 4疟原虫生活史疟原虫生活史 人疟原虫完成其人疟原虫完成其生活史需要人和按蚊生活史需要人和按蚊两个宿主。在按蚊体两个宿主。在按蚊体内进行有性繁殖，内进行有性繁殖，按按蚊蚊是疟原虫的是疟原虫的终末宿终末宿主主；在人体内进行无；在人体内进行无性增殖，性增殖，人人是疟原虫是疟原虫的的中间宿主。中间宿主。 51.正常红细胞26环状体（小滋养体）718

3、滋养体1927裂殖体2829雌配子体30雄配子体疟原虫感染各期细胞形态疟原虫感染各期细胞形态 6疟原虫感染各期细胞形态疟原虫感染各期细胞形态间日疟间日疟恶性疟恶性疟卵形疟卵形疟三日疟三日疟 7人体内人体内 疟原虫的基本结构疟原虫的基本结构l细胞浆细胞浆 蔚蓝色或深蓝色，间日疟原虫发育到大滋养体阶段，胞浆呈阿米巴样活蔚蓝色或深蓝色，间日疟原虫发育到大滋养体阶段，胞浆呈阿米巴样活动，胞浆内有空泡。动，胞浆内有空泡。l核核 在正常情况下核呈鲜红色，呈圆形或不规则，结构致密，在个别发育阶段较为在正常情况下核呈鲜红色，呈圆形或不规则，结构致密，在个别发育阶段较为疏松，例如间日疟原虫雄配子体的核。疏松，例

4、如间日疟原虫雄配子体的核。l疟色素疟色素 间日疟原虫的色素颗粒呈短棒状，黄褐色；恶性疟原虫的色素颗粒呈细砂间日疟原虫的色素颗粒呈短棒状，黄褐色；恶性疟原虫的色素颗粒呈细砂状，黑褐色。状，黑褐色。 8薄血膜中被疟原虫寄生红血球形态特征薄血膜中被疟原虫寄生红血球形态特征间日疟原虫被寄生红细胞间日疟原虫被寄生红细胞胀大色浅，薛氏点鲜红色，细小，数多胀大色浅，薛氏点鲜红色，细小，数多恶性疟原虫被寄生红细胞恶性疟原虫被寄生红细胞大小正常，色稍紫；茂氏点紫红色，粗大，大小正常，色稍紫；茂氏点紫红色，粗大，数少数少 9薄血膜中小滋养体形态特征薄血膜中小滋养体形态特征间日疟原虫小滋养体间日疟原虫小滋养体约为红

5、细胞直径的约为红细胞直径的1 13 3；环较粗大；核；环较粗大；核1 122个；一个；一个红细胞寄生个红细胞寄生2 2个环状体，不如恶性疟原虫多见个环状体，不如恶性疟原虫多见恶性疟原虫小滋养体恶性疟原虫小滋养体约为红细胞的约为红细胞的 1/6 1/6；环纤细；核；环纤细；核1212个；一个；一个红细胞寄生个红细胞寄生2 2个环状体的常见个环状体的常见 10薄血膜中大滋养体形态特征薄血膜中大滋养体形态特征间日疟原虫大滋养体间日疟原虫大滋养体虫体不规则，较大；阿米巴样空泡明显；疟色虫体不规则，较大；阿米巴样空泡明显；疟色素细小，黄褐色素细小，黄褐色恶性疟原虫大滋养体恶性疟原虫大滋养体体小，圆形；空

6、泡小；早期疟色素细小，金黄体小，圆形；空泡小；早期疟色素细小，金黄色，晚期结成块状，黑褐色色，晚期结成块状，黑褐色 11薄血膜中裂殖体前期形态特征薄血膜中裂殖体前期形态特征间日疟原虫裂殖体间日疟原虫裂殖体(S)(S)前期前期圆形或不规则；核分裂为圆形或不规则；核分裂为2 2个以上，空泡消个以上，空泡消失；疟色素分布不匀失；疟色素分布不匀恶性疟原虫裂殖体前期恶性疟原虫裂殖体前期圆形，核分裂为圆形，核分裂为2 2个以上；疟色素集成团快个以上；疟色素集成团快 12薄血膜中成熟裂殖体形态特征薄血膜中成熟裂殖体形态特征间日疟原虫裂殖体间日疟原虫裂殖体大于正常红细胞；裂殖子大于正常红细胞；裂殖子12241

7、224个，通常个，通常1616个，个，排列不规则；疟色素常集于一侧，黄褐色排列不规则；疟色素常集于一侧，黄褐色恶性疟原虫裂殖体恶性疟原虫裂殖体小于正常红细胞；裂殖子较小，小于正常红细胞；裂殖子较小，883636个，个，排列不规则；疟色素成团状，黑褐色排列不规则；疟色素成团状，黑褐色 13薄血膜中大（雌）配子体形态特征薄血膜中大（雌）配子体形态特征间日疟原虫雌配子体间日疟原虫雌配子体小于正常红细胞，圆形；核小，致密，深红色，小于正常红细胞，圆形；核小，致密，深红色，偏于一侧，胞浆深蓝色；疟色素散在偏于一侧，胞浆深蓝色；疟色素散在恶性疟原虫雌配子体恶性疟原虫雌配子体新月型，两端较尖；核小，致密，深

8、红色，新月型，两端较尖；核小，致密，深红色，位于中央；胞浆深蓝色；疟色素块围于核周位于中央；胞浆深蓝色；疟色素块围于核周 14薄血膜中小（雄）配子体形态特征薄血膜中小（雄）配子体形态特征 间日疟原虫雄配子体间日疟原虫雄配子体大于正常红细胞，圆形；核大，疏松，浅红色，大于正常红细胞，圆形；核大，疏松，浅红色，多位于中央；胞浆浅蓝色或淡红色；疟色素散在多位于中央；胞浆浅蓝色或淡红色；疟色素散在恶性疟原虫雄配子体恶性疟原虫雄配子体腊肠形，两端钝圆；核大，疏松，淡红色，位于中央；腊肠形，两端钝圆；核大，疏松，淡红色，位于中央；胞浆浅蓝色或浅红色；疟色素围于核周胞浆浅蓝色或浅红色；疟色素围于核周 15厚

9、血膜中疟原虫的形态l厚血膜由于用血量较多，厚血膜由于用血量较多，涂制的血膜小，红细胞涂制的血膜小，红细胞重叠且干燥慢，致使虫重叠且干燥慢，致使虫体皱缩，空泡消失，胞体皱缩，空泡消失，胞浆变形，但原虫集中，浆变形，但原虫集中，易发现易发现 l各期疟原虫的体积都略各期疟原虫的体积都略为缩小，其中只有大、为缩小，其中只有大、小滋养体的形态有较大小滋养体的形态有较大改变，而裂殖体和配子改变，而裂殖体和配子体的形态则无明显变化体的形态则无明显变化 16厚血膜厚血膜小滋养体形态小滋养体形态小滋养体胞浆呈环状或向核的一侧或两侧收缩，使环的中间断裂，或围绕核小滋养体胞浆呈环状或向核的一侧或两侧收缩，使环的中间

10、断裂，或围绕核间日疟小滋养体间日疟小滋养体间日疟原虫的环较大，常呈分号间日疟原虫的环较大，常呈分号“；”和感叹号和感叹号“！”状状恶性疟小滋养体恶性疟小滋养体恶性疟原虫的环纤细，常呈分号恶性疟原虫的环纤细，常呈分号“：”、飞、飞鸟鸟“.”.”、V V状和断环状状和断环状 17厚血膜间日疟形态厚血膜间日疟形态l间日疟大滋养体的胞浆间日疟大滋养体的胞浆可皱缩断裂成几个块状，可皱缩断裂成几个块状，大小不一，似互不连接。大小不一，似互不连接。核位于胞浆之中或外边。核位于胞浆之中或外边。有些仅见胞浆和疟色素有些仅见胞浆和疟色素而核看不清楚。而核看不清楚。l间日疟原虫裂殖体前期、间日疟原虫裂殖体前期、成熟

11、殖体及配子体，除成熟殖体及配子体，除虫体略为缩小，着色较虫体略为缩小，着色较深外，均与薄血膜相似。深外，均与薄血膜相似。 大滋养体大滋养体裂殖体裂殖体小配子体小配子体大配子体大配子体 18厚血膜恶性疟形态厚血膜恶性疟形态恶性疟原虫除环状体外其它期与薄血膜形态相似恶性疟原虫除环状体外其它期与薄血膜形态相似大滋养体大滋养体恶性疟裂殖体恶性疟裂殖体 19厚血膜红细胞形态厚血膜红细胞形态寄生的红细胞经染色后，因细胞内血红蛋白溶解，轮廓消失，但有时会留下残骸的寄生的红细胞经染色后，因细胞内血红蛋白溶解，轮廓消失，但有时会留下残骸的“影子影子” ” 20读片练习：薄血膜中间日疟环状体读片练习：薄血膜中间日

12、疟环状体( (pvRpvR) ) 约占寄生红细胞的约占寄生红细胞的1/31/3，很少见到一个红细胞寄生，很少见到一个红细胞寄生2 2个个环状体和一个环状体有环状体和一个环状体有2 2个核个核 21读片练习：薄血膜中间日疟环状体读片练习：薄血膜中间日疟环状体( (pvRpvR) ) 22 读片练习：薄血膜中间日疟大滋养体读片练习：薄血膜中间日疟大滋养体(PVT)(PVT)l经经8 81010小时，虫体增大，胞质增多，伸出伪足。小时，虫体增大，胞质增多，伸出伪足。l出现黄褐色的疟色素。出现黄褐色的疟色素。l红细胞胀大，变形，颜色变淡，并出现数量较多，淡红色的小点，称薛氏小点红细胞胀大，变形，颜色变

13、淡，并出现数量较多，淡红色的小点，称薛氏小点 23读片练习：薄血膜中间日疟裂殖体（读片练习：薄血膜中间日疟裂殖体（PVSPVS）l经经4040小时晚期滋养体发育成熟，小时晚期滋养体发育成熟，虫体变圆，空泡消失虫体变圆，空泡消失l核开始分裂又称裂殖体前期核开始分裂又称裂殖体前期l色素聚集成团块色素聚集成团块l成熟裂殖体约有成熟裂殖体约有12122424个个 细细胞核胞核l胞浆也随之分裂胞浆也随之分裂l受染受染RBC RBC 胀大、颜色苍白、胀大、颜色苍白、虫体几乎充满红细胞虫体几乎充满红细胞 24间日疟原虫雌配子体（间日疟原虫雌配子体（PVGPVG）间日疟原虫雄配子体（间日疟原虫雄配子体（PVG

14、PVG）读片练习：薄血膜中间日疟配子体（读片练习：薄血膜中间日疟配子体（PVGPVG） 25读片练习：薄血膜中恶性疟原虫环状体（读片练习：薄血膜中恶性疟原虫环状体（PFRPFR）虫体虫体：约：约占占RBCRBC的的1/5-1/61/5-1/6、环状、常见几个虫同时寄生在同一细胞里、环状、常见几个虫同时寄生在同一细胞里核核： 小致密规则、常见小致密规则、常见2 2个核个核胞浆胞浆：纤细完整：纤细完整恶性疟原虫环状体恶性疟原虫环状体 26读片练习：薄血膜中恶性疟原虫大滋养体（读片练习：薄血膜中恶性疟原虫大滋养体（PFTPFT） l一般不出现在外周一般不出现在外周血血l虫体小结实，圆形，虫体小结实，

15、圆形，不活动不活动l疟色素集中一团，疟色素集中一团，黑褐色黑褐色l原虫此时开始集中原虫此时开始集中在内脏毛细血管在内脏毛细血管 27读片练习：薄血膜中恶性疟原虫裂殖体（读片练习：薄血膜中恶性疟原虫裂殖体（PFSPFS） l裂殖裂殖子子8 83636个，通常个，通常18182424个，排列不规则个，排列不规则l疟色素集中成一团疟色素集中成一团l虫体占红细胞体积的虫体占红细胞体积的2/32/3至至3/4 3/4 28读片练习：薄血膜中恶性疟原虫配子体（读片练习：薄血膜中恶性疟原虫配子体（PFGPFG） 雄配子体雄配子体 雌配子体雌配子体 形态：形态：雄配子体雄配子体雌配子体雌配子体 29读片练习：

16、间日疟原虫厚血膜中环状体的形态读片练习：间日疟原虫厚血膜中环状体的形态环状体 30读片练习：间日疟原虫厚血膜中环状体的形态读片练习：间日疟原虫厚血膜中环状体的形态环状体 31读片练习：间日疟原虫厚血膜中大滋养体形态读片练习：间日疟原虫厚血膜中大滋养体形态间日疟大滋养 32读片练习：间日疟原虫厚血膜中大滋养体形态读片练习：间日疟原虫厚血膜中大滋养体形态大滋养 33读片练习：间日疟原虫厚血膜中大滋养体形态读片练习：间日疟原虫厚血膜中大滋养体形态胞浆断裂成块 34读片练习：间日疟原虫厚血膜中未成熟裂殖体读片练习：间日疟原虫厚血膜中未成熟裂殖体间日疟未成熟裂殖体 35读片练习：间日疟原虫厚血膜中未成熟

17、裂殖体读片练习：间日疟原虫厚血膜中未成熟裂殖体未成熟裂体大大滋养体滋养体 36读片练习：间日疟原虫厚血膜中大配子体形态读片练习：间日疟原虫厚血膜中大配子体形态间日疟大配子体配子体间日疟大滋养体 37读片练习：间日疟原虫厚血膜中的色素特点读片练习：间日疟原虫厚血膜中的色素特点间日疟原虫色素 38读片练习：厚血膜中恶性疟原虫环状体（读片练习：厚血膜中恶性疟原虫环状体（PFRPFR）恶性疟原虫环状体（两核） 39读片练习：厚血膜中恶性疟原虫环状体（读片练习：厚血膜中恶性疟原虫环状体（PFRPFR） 40读片练习：厚血膜中恶性疟原虫大滋养体（读片练习：厚血膜中恶性疟原虫大滋养体（PFTPFT）恶性疟原

18、虫大滋养体恶性疟原虫大滋养体 41读片练习：厚血膜中恶性疟原虫裂殖体（读片练习：厚血膜中恶性疟原虫裂殖体（PFSPFS）恶性疟原虫未成熟裂殖 42读片练习：厚血膜中恶性疟原虫配子体（读片练习：厚血膜中恶性疟原虫配子体（PFGPFG）小配子体 大配子体 43读片练习：薄血膜中间读片练习：薄血膜中间日日疟和恶性疟原虫环状体的形态区别疟和恶性疟原虫环状体的形态区别 pvRpvR pFRpFR大小：约占大小：约占RBCRBC的的1/3 1/3 约占约占RBCRBC的的1/51/5部位：部位：RBCRBC里少见多个虫同时寄生里少见多个虫同时寄生 RBCRBC的边缘的边缘 、常见多个虫同时寄生、常见多个虫

19、同时寄生核：大、较松、两核少见核：大、较松、两核少见 小、致密、两核多见小、致密、两核多见 胞浆：较粗、不规则胞浆：较粗、不规则 纤细、规则纤细、规则 环状体环状体 44读片练习：厚血膜中间读片练习：厚血膜中间日日疟和恶性疟原虫环状体的形态区别疟和恶性疟原虫环状体的形态区别 pvR pFRPFR 45读片练习：厚血膜中间读片练习：厚血膜中间日日疟和恶性疟原虫色素的比较疟和恶性疟原虫色素的比较PFG色素PV色素 46血片的制作血片的制作l厚血膜厚血膜 用推片的一角，从取血部位刮取约用推片的一角，从取血部位刮取约4 4l l血（相当于火柴血（相当于火柴头大小），使血滴与平置的载玻片接触，再由里向外

20、一个方向头大小），使血滴与平置的载玻片接触，再由里向外一个方向旋转，转旋转，转2424圈，涂成直径圈，涂成直径0.810.81cmcm大小圆形厚血膜。大小圆形厚血膜。l薄血膜薄血膜再取一小滴血再取一小滴血1 1 l l, ,将血置于第一张玻片离厚血膜适当远的将血置于第一张玻片离厚血膜适当远的地方地方. .将采血玻片将采血玻片( (推片推片) )的边缘紧贴载玻片使血液沿边缘散开的边缘紧贴载玻片使血液沿边缘散开( (如如图示图示) )。要求：头体尾分明，如舌状。要求：头体尾分明，如舌状。 47血片的制作血片的制作正确的推片姿势正确的推片姿势 48各种不同的疟疾血片涂制法各种不同的疟疾血片涂制法标准

21、血片标准血片门诊发热病人血片门诊发热病人血片居民普查血片居民普查血片 49厚薄血膜的标准厚薄血膜的标准l厚血膜血量适宜，不宜过多或过少厚血膜血量适宜，不宜过多或过少l薄薄血膜平整血膜平整, ,无皱折和空泡，红细胞单层排列无皱折和空泡，红细胞单层排列 50血片染色血片染色两种染色方法两种染色方法: :l吉氏染色法（常用）吉氏染色法（常用）l瑞氏染色法瑞氏染色法 51吉氏染色吉氏染色l吉氏染液吉氏染液( (原液原液) )的配置的配置 吉氏染粉吉氏染粉 (Azure B type) 5g(Azure B type) 5g 甘油甘油 ( (纯纯) 250ml) 250ml 甲醇甲醇 ( (纯纯) 25

22、0ml) 250mll稀释吉氏原液稀释吉氏原液原液需经原液需经pH7.0pH7.0盐酸缓冲液（盐酸缓冲液（PBSPBS）或净水稀释后，方）或净水稀释后，方可用于厚薄血片染色可用于厚薄血片染色 吸取母液时，不要晃动瓶子吸取母液时，不要晃动瓶子, ,以免沉淀物泛起影响染色以免沉淀物泛起影响染色效果效果 52吉氏染色吉氏染色l吉氏染色吉氏染色 （注意：纯染液和固定的纯乙醇要避光防挥发注意：纯染液和固定的纯乙醇要避光防挥发）100%100%乙醇或甲醇固定薄片（用滴管一滴）乙醇或甲醇固定薄片（用滴管一滴）配制配制10%10%染液（每张血片约需染液染液（每张血片约需染液2ml2ml）：试管内）：试管内18

23、00ul1800ul缓冲液或净水滴加吉氏原液缓冲液或净水滴加吉氏原液200ul200ul（或：（或：3 3滴染液滴染液加加2727滴缓冲液），混匀，滴入待染标本的厚薄血膜上，滴缓冲液），混匀，滴入待染标本的厚薄血膜上，染色染色1030min1030min，清水细缓冲洗，晾干镜检。，清水细缓冲洗，晾干镜检。( (注意：反注意：反扣染色，染料残渣不易沉淀在血片上扣染色，染料残渣不易沉淀在血片上) ) 53注意事项注意事项l使用前载玻片一定要清洁，不然会影响血片制作和镜使用前载玻片一定要清洁，不然会影响血片制作和镜检结果（玻片处理：检结果（玻片处理：3%3%盐酸浸泡，洗衣粉洗涤，蒸馏盐酸浸泡，洗衣粉

24、洗涤，蒸馏水洗涤浸泡，烘干）水洗涤浸泡，烘干）l厚血膜干燥时不要太热，过热会使原虫变形，影响镜厚血膜干燥时不要太热，过热会使原虫变形，影响镜检结果，同时推两张，发结果的片子要干透（放检结果，同时推两张，发结果的片子要干透（放1 1小时小时以上，染前用风筒低温档吹干），留底的片子自然风以上，染前用风筒低温档吹干），留底的片子自然风干第二天染最好干第二天染最好l固定薄血膜时不要将乙醇触碰到厚血膜固定薄血膜时不要将乙醇触碰到厚血膜l冲洗染液时，从侧面冲水，不要直接冲，避免冲走厚冲洗染液时，从侧面冲水，不要直接冲，避免冲走厚血膜血膜 54如何确定疟原虫血片为阴性如何确定疟原虫血片为阴性 检查全部厚血膜

25、未查见疟原虫检查全部厚血膜未查见疟原虫 最少检查最少检查100100个厚血膜油镜视野未查见疟原虫个厚血膜油镜视野未查见疟原虫 55血片评分标准血片评分标准项目项目检查内容检查内容质量标准质量标准分分值值分分值值分分值值考核分值考核分值血片制作血片制作 （8080分）分）厚血膜厚血膜 （4040分）分）血量（血量（1010分）分）4 45L5L1010略多或略少略多或略少7 7过多或过少过多或过少5 5位置位置(10(10分）分）玻片右玻片右1/31/31010稍偏右稍偏右7 7偏右过多偏右过多5 5直径（直径（1010分）分）cm1.0cm100.8或或

26、1.01.01.2cm1.2cm8 80.71.2cm1.2cm5 5外观（外观（1010分）分）圆形厚膜均匀，边缘整圆形厚膜均匀，边缘整齐齐1010圆形稍不均不整齐圆形稍不均不整齐8 8厚薄不均影响着厚薄不均影响着色色5 5薄血膜薄血膜 （4040分）分）血量（血量（1010分）分）1 11.5L1.5L1010略多或略少略多或略少7 7过多或过少过多或过少5 5位置位置(10(10分）分）玻片玻片1/21/21/31/3处处1010稍偏右或偏左稍偏右或偏左7 7偏右或偏左过多偏右或偏左过多5 5直径（直径（1010分）分）2.02.02.5cm2.5cm1010稍大或稍小稍大或稍小8 8过多或过少过多或过少5 5外观（外观（1010分）分）舌状厚薄均匀，无划痕舌状厚薄均匀，无划痕1010舌状稍不均舌状稍不均8 8厚薄不均呈波浪厚薄不均呈波浪型，有划痕型，有划痕5 5血片染色质量（血片染色质量（1010分）分）外观（外观（1010分）分）厚血膜完整厚血膜完整1010厚血膜半脱落厚血膜半脱落5 5厚血膜全脱落厚血膜全脱落2 2血片清洁度（血片清洁度（1010分）