江苏省灌南高级中学高三生物生物技术实践知识点总结

1、学习必备欢迎下载江苏省灌南高级中学高三生物生物技术实践知识点总结·培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。·培养基按照 物理性质 可分为 液体培养基 半固体培养基和固体培养基 。在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。液体培养基 应用于工业或生活生产， 固体培养基 应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基 则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。·按照 成分

2、 培养基可分为 人工合成培养基 和天然培养基 。合成培养基 是用成分已知的化学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于微生物的分离鉴定。天然培养基 是用化学成分不明的天然物质配制而成，常用于实际工业生产。·按照培养基的 用途 ，可将培养基分为选择培养基 和鉴定培养基 。 选择培养基 是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。鉴别培养基 是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。·培养基的化学成分包括水 、 无机盐 、 碳源 、 氮源 、生长因子 等。·碳源：能为微生物的

3、代谢提供碳元素的物质。如CO、 NaHCO等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机23碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源 。·氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如-+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿N、 NH、NO、 NH2334素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。·培养基还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌 时需要在培养基中添加 维生素 ，培养 霉菌 时须将培养基的 pH 调至酸性 ，培养 细菌 是需要将pH 调至中性或微碱性 ，培养 厌氧型微生物 是则需要提供 无氧 的条件·无菌

4、技术·获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面：无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。·消毒与灭菌的区别消毒 指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。消毒方法常用煮沸消毒法， 巴氏消毒法（对于一些不耐高温的液体）还有化学药剂 （如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、紫外线消毒 。灭菌 则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌 、高压蒸汽灭菌。灭菌方法：接种环、接种针、试管口

5、等使用灼烧灭菌法；玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱；培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅。表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。比较项消毒灭菌理化因素的作用强度较为温和强烈消灭微生物的数量部分生活状态的微生物全部微生物芽孢和孢子能否被消灭不能能制作牛肉膏蛋白胨固体培养基（ 1）方法步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。（ 2）倒平板操作的步骤：等待平板冷却凝固，大约需·倒平板操作的讨论学习必备欢迎下载将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰。用左手的拇

6、指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约 1020mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。5 10min。然后，将平板倒过来放置，使培养皿盖在下、皿底在上。1. 培养基灭菌后，需要冷却到50左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？提示：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。2. 为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。3. 平板冷凝后，为什么要将平板倒置？答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分

7、更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。4. 在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。纯化大肠杆菌（ 1）微生物接种的方法最常用的是平板划线法 和稀释涂布平板法。（ 2）平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作。将聚集的菌种逐步稀释 分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。（ 3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到

8、琼脂固体培养基的表面，进行培养。分为系列 稀释操作 和涂布平板操作 两步。（ 4）用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的 是：使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，以便于纯化菌种。（ 5）平板划线法操作步骤：将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红。在火焰旁冷却接种环，并打开棉塞。将试管口通过火焰。将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液。将试管通过火焰，并塞上棉塞。左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养皿。灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三、四、五

9、区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连。将平板倒置放入培养箱中培养。·平板划线操作的讨论1. 为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。2. 在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却

10、后再进行划线？答：以免接种环温度太高，杀死菌种。3. 在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。（ 6）涂布平板操作的步骤：将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。取少量菌液，滴加到培养基表面。将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8 10s。用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布平板操作的讨论涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？

11、学习必备欢迎下载提示：应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围；等等。菌种的保存（ 1）对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏 的方法。临时保藏方法将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养。当菌落长成后，将试管放入4 的冰箱中保藏。以后每3 6 个月，都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上。缺点 ：这种方法保存的时间不长，菌种容易被污染或产生变异。（ 2）对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏 的方法。在 3mL 的甘油瓶中，装入 1mL 甘油后灭菌。将 1mL 培养的菌液转 移到甘油瓶中，与甘

12、油充分混匀后，放在 20 的冷冻箱中保存。疑难解答（ 1）生物的营养营养是指生物摄取、利用营养物质的过程。营养物质是指维持机体生命活动，保证发育、生殖所需的外源物质。人及动物的营养物质：水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类。植物的营养物质：矿质元素、水、二氧化碳等三类。微生物的营养物质：水、无机盐、碳源、氮源及特殊营养物质五类。（ 2）确定培养基制作是否合格的方法将未接种的培养基在恒温箱中保温 12 天，无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。课题二 果酒和果醋的制作1、发酵：通过微生物技术的培养来生产大量代谢产物的过程。2、有氧发酵：醋酸发酵谷氨酸发酵·无氧发

13、酵：酒精发酵乳酸发酵3、酵母菌是兼性厌氧菌型微生物真菌·酵母菌的生殖方式：出芽生殖(主要)分裂生殖 孢子生殖4、在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。C6H O 6O 6CO 6HO1262225、在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。C6H12O6 2C2H5OH2CO6、 20左右最适宜酵母菌繁殖酒精发酵时一般将温度控制在18 -25 7、在葡萄酒自然发酵的过程中, 起主要作用的是附着在葡萄皮表面的野生型酵母菌. 在发酵 过程中 , 随着酒精浓度的提高 , 红葡萄皮的色素也进入发酵液, 使葡萄酒呈现深红色. 在缺氧 呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都

14、因无法适应这一环境而受到制约。8、醋酸菌是单细胞细菌( 原核生物 ), 代谢类型是异养需氧型, 生殖方式为二分裂9、当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 2C2H5OH4O2 CHCOOH6H O3210、控制发酵条件的作用醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。醋酸菌最适生长温度为30 35，控制好发酵温度，使发酵时间缩短，又减少杂菌污染的机会。有两条途径生成醋酸：直接氧化和以酒精为底物的氧化。11、实验流程：挑选葡萄冲洗榨汁酒精发酵果酒（醋酸发酵果醋）12、酒精检验

15、：果汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验。在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。先在试管中加入发酵液 2 L，再滴入物质的量浓度为 3mol/L 的 H2SO43 滴，振荡混匀，最后滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液 3 滴，振荡试管，观察颜色13、充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的；排气口是在酒精发酵时用来排出二氧化碳的；出料口是用来取样的。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连接，其目的是防止空气中微生物的污染。开口向下的目的是有利于二氧化碳的排出。使用该装置制酒时，应该关闭充气口；制醋时，应该充气口连接气泵，输入氧气。疑难解答（ 1）你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗？

16、为什么？应该先冲洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。学习必备欢迎下载（ 2）你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染？如：要先冲洗葡萄，再除去枝梗；榨汁机、发酵装置要清洗干净，并进行酒精消毒；每次排气时只需拧松瓶盖，不要完全揭开瓶盖等。（ 3）制葡萄酒时，为什么要将温度控制在18 25？制葡萄醋时，为什么要将温度控制在30 35？温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。20左右最适合酵母菌的繁殖。因此需要将温度控制在其最适温度范围内。而醋酸菌是嗜温菌，最适生长温度为30 35，因此要将温度控制在30 35。课题三腐乳的制作1、多种微生物参与了豆腐的发酵，如青霉、酵母、

17、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一种丝状真菌。代谢类型是异养需氧型。生殖方式是孢子生殖。营腐生生活。2、原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。3、实验流程：让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制4、酿造腐乳的主要生产工序是将豆腐进行前期发酵和后期发酵。前期发酵的主要作用： 1. 创造条件让毛霉生长。 2. 使毛酶形成菌膜包住豆腐使腐乳成型。后期发酵主要是酶与微生物协同参与生化反应的过程。通过各种辅料与酶的缓解作用，生成腐乳的香气。5、将豆腐切成3cm×3cm×1cm 的若干块。所用豆腐的含

18、水量为70左右，水分过多则腐乳不易成形。* 水分测定方法如下：精确称取经研钵研磨成糊状的样品510g( 精确到 0.02mg) ，置于已知重量的蒸发皿中，均匀摊平后，在100 105 电热干燥箱内干燥4h，取出后置于干燥器内冷却至室温后称重，然后再烘30min，直至所称重量不变为止。·毛霉的生长：条件：将豆腐块平放在笼屉内，将笼屉中的控制在15 18，并保持一定的温度。来源： 1. 来自空气中的毛霉孢子，2.直接接种优良毛霉菌种时间： 5天·加盐腌制：将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中，同时逐层加盐，随着层数的加高而增加盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些。加盐腌制的时间约

19、为8 天左右。·用盐腌制时，注意控制盐的用量：盐的浓度过低，不足以抑制微生物的生长，可能导致豆腐腐败变质；盐的浓度过高会影响腐乳的口味·食盐的作用： 1. 抑制微生物的生长，避免腐败变质2. 析出水分，是豆腐变硬，在后期制作过程中不易酥烂 3. 调味作用，给腐乳以必要的咸味4. 浸提毛酶菌丝上的蛋白酶。·配制卤汤：卤汤直接关系到腐乳的色、香、味。卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的。卤汤中酒的含量一般控制在 12%左右。·酒的作用： 1. 防止杂菌污染以防腐2. 与有机酸结合形成酯，赋予腐乳风味3. 酒精含量的高低与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系，酒精含量

20、越高，对蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延长；酒精含量过低，蛋白酶的活性高，加快蛋白质的水解，杂菌繁殖快，豆腐易腐败，难以成块。·香辛料的作用： 1. 调味作用 2.杀菌防腐作用 3.参与并促进发酵过程·防止杂菌污染：用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用沸水消毒。装瓶时，操作要迅速小心。整齐地摆放好豆腐、加入卤汤后，要用胶条将瓶口密封。封瓶时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染。疑难解答（ 1）利用所学的生物学知识，解释豆腐长白毛是怎么一回事？豆腐生长的白毛是毛霉的白色菌丝。严格地说是直立菌丝，在豆腐中还有匍匐菌丝。（ 2）为什么要撒许多盐，将长毛的豆腐腌起来？

21、盐能防止杂菌污染，避免豆腐腐败。（ 3）我们平常吃的豆腐，哪种适合用来做腐乳？含水量为70%左右的豆腐适于作腐乳。用含水量高的豆腐制作腐乳，不易成形。（ 4）吃腐乳时，你会发现腐乳外部有一层致密的“皮”。这层“皮”是怎样形成的呢？它对人体有害吗？它的作用是什么？“皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝（匍匐菌丝），对人体无害。它能形成腐乳的“体”，使腐乳成形。课题四酵母细胞的固定化一、实验原理1使用固定化酶技术，将这种酶固定在一种颗粒状的载体上，再将这些酶颗粒学习必备欢迎下载装到一个反应柱内，柱子底端装上分布着许多小孔的筛板。酶颗粒无法通过筛板的小孔，而反应溶液却可以自由出入。生产过程中，将葡

22、萄糖溶液从反应柱的上端注入，使葡萄糖溶液流过反应柱，与固定化葡萄糖异构酶接触，转化成果糖，从反应柱的下端流出。反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本，提高了果糖的产量和质量。2固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。一般来说，酶更适合采用 化学结合法和物理吸附法固定，而 细胞 多采用 包埋法 固定化。这是因为细胞个大，而酶分子很小；个大的难以被吸附或结合，而个小的酶容易从包埋材料中漏出。固定化酶优点：使酶既能与反应物接触，又能与产物分离，还可以被反复利用。固定化细胞优点：成本更低，操作更容易，可以催化一系列的化学反应。二、

23、实验步骤1。细胞的活化称取 lg干酵母，放入50 mL 的小烧杯中，加人蒸馏水10 mL，用玻璃棒搅拌，使酵母细胞混合均匀，成糊状，放置1h 左右，使其活化。【注】活化：让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态2。配制物质的量浓度为0.05mo1/L 的 CaCl 2 溶液称取无水CaCl2 0.83g 。放人 200mL的烧杯中，加入150mL的蒸馏水，使其充分溶解，待用。3。配制海藻酸钠溶液称取 0.7g 海藻酸钠，放入50mL 小烧杯中。加人10mL 水，用酒精灯加热，边加热边搅拌，将海藻酸钠调成糊状，直至完全溶化，用蒸馏水定容至10 mL。注意，加热时要用小火，或者间断加热，反复几

24、次，直到海藻酸钠溶化为止。4。海藻酸钠溶液与酵母细胞混合将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加人已活化的醉母细胞，进行充分搅拌，使其混合均匀，再转移至注射器中。【注】冷却至室温的目的：防止杀死酵母菌5。固定化酵母细胞以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2 溶液中，观察液滴在CaCl2 溶液中形成凝胶珠的情形。将这些凝胶珠在CaCl 2 溶液中浸泡30 min 左右。【注】 CaCl2溶液的作用：使胶体聚沉6 使用固定化酵母细胞发酵a) 将固定好的酵母细胞 ( 凝胶珠 ) 用蒸馏水冲洗 2-3 次。b) 将 150mL质量分数为 10%的葡萄糖溶液转移到 200mL的锥形瓶中，

25、再加入固定好的酵母细胞，置于 25下发酵 24h。三、注意事项1. 配制海藻酸钠溶液：小火、间断加热、定容，如果加热太快，海藻酸钠会发生焦糊。2. 海藻酸钠溶液与酶母细胞混合：冷却后再混合，注意混合均匀，不要进入气泡3. 制备固定化酵母细胞：高度适宜，并匀速滴入4刚形成的凝胶珠应在CaCL2溶液中浸泡一段时间，以便Ca2+与Na+充分交换，形成的凝胶珠稳定。检验凝胶珠是否形成，可用下列方法：用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压，如果不容易破裂，没有液体流出就表明成功地制成了凝胶珠，还可以用手将凝胶珠在实验桌上用力摔打，如果凝胶珠很容易弹起，也表明制备的凝胶珠是成功的。5凝胶珠的颜色和形状如

26、果制作的 凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明 海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的 凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明 海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。课题五探讨加酶洗衣粉的洗剂效果一、实验原理1加酶洗衣粉是指含有 酶制剂 的洗衣粉，目前常用的酶制剂有四类： 蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。2碱性蛋白酶能将血渍、奶渍 等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽，使污迹从衣物上脱落。脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能分别将大分子的脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质，使洗衣粉具有更好的去污能力。学习必备欢迎下载3在本

27、课题中，我们主要探究有关加酶洗衣粉的三个问题：一是普通洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤效果有什么不同；二是在什么温度下使用加酶洗衣粉效果最好，三是添加不同种类的酶的的洗衣洗剂效果有哪些区别。二、实验步骤粉，其2 探究用加酶洗衣粉洗涤的最佳温度条件在 3 个编号的烧杯里，分别注入500mL清水。取 3 块大小相等的白棉布，用滴管在每块白布上分别滴上一滴食用油、鸡血、牛奶，分别放入烧杯里，用玻璃棒搅拌。将 3 个烧杯分别放入 50 摄氏度的热水、沸水和冰块中，保温 5 分钟。称取 5 克加酶洗衣粉 3 份，分别放入 3 个烧杯中，用玻璃棒均匀搅拌。保温观察并记录 3 个烧杯中的洗涤效果。10 分

28、钟。3 探究不同种类的加酶洗衣粉洗涤的效果污染物蛋白酶洗衣粉脂肪酶洗衣粉复合酶洗衣粉普通洗衣粉油渍汗渍血渍观察并记录四种洗衣粉分别洗涤三种污染的洗涤效果。三、注意事项1变量的分析和控制影响加酶洗衣粉洗涤效果的因素有水温、水量、水质、洗衣粉的用量，衣物的质料、大小及浸泡时间和洗涤的时间等。在这些因素中，水温是我们要研究的对象，而其他因素应在实验中保持不变。选择什么样的水温进行实验需要实验者根据当地一年中的实际气温变化来确定水温，通常情况下，冬季、春季、秋季和夏季可分别选取 5 、 15 、 25 和 35 的水温，因为这 4 个水温是比较符合实际情况的，对现实也有指导意义。2洗涤方式和材料的选择

29、。在洗涤方式中有机洗和手洗两种方式，应考虑其中哪一种比较科学？哪一种更有利于控制变量？再有，洗衣机又可以分为半自动和全自动两种，相比之下，采用全自动洗衣机比较好，并且应该尽量使用同一型号小容量的洗衣机，其机械搅拌作用相同。关于洗涤材料的选择也有一些讲究。用衣物作实验材料并不理想，这是因为作为实验材料的衣物，其大小、颜色、洁净程度等应该完全一致，而这并不容易做到；此外，人为地在衣物上增加污物，如血渍、油渍等，也令人难以接受。因此，选用布料作为实验材料比较可行。在作对照实验时，可以控制布料的大小、颜色以及污物的量，使其相同；同时，也便于洗涤效果的比较。3水量、水质和洗衣粉用量的问题。水的用量和布料

30、的大小是成正比的。做实验用的布料不易过大，水量不易过多，但应该让布料充分浸泡在水中。水量和洗衣粉的用量可以参考下表。实验时可根据表中的数据换算出实际用量。如果在实验中使用手洗的方法，如课本中图 4-4 所示，使用 1 000 mL 的烧杯作为容器，可以用 500 mL 的水，洗衣粉的用量可以用 1 g 或 1.5 g 。洗涤方式机洗手洗水量0.5 L0.5 L洗衣粉量0.5 g1 g 或 1.5 g学习必备欢迎下载其他相关问题简述如下。实验中可以用滴管控制污物的量，待污物干燥后再进行实验；布料应放在洗衣粉溶液中浸泡相同的时间；采用玻璃棒或筷子搅拌的方式模拟洗衣过程；模拟搅拌的时间、次数和力量应

31、基本相同。课题六的粗提取与鉴定·提取 DNA的溶解性原理包括哪些方面？DNA在不同浓度NaCl 溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精。· DNA在不同浓度NaCl 溶液中溶解度有何特点？要使DNA溶么浓度？要使DNA析出，又需要使用什么浓度？在 0.14mol/L时溶解度最小；较高浓度可使DNA溶解；DNA析出。解，需要使用什0.14mol/L可使·在溶解细胞中的 DNA时，人们通常选用 2mol/LNaCl 溶液；将 DNA分子析出的方法是向溶有 DNA的 NaCl 溶液中缓慢注入蒸馏水，以稀释 NaCl 溶液。酒精是一种常用有机溶剂，但 DNA却不能溶于酒精（特

32、别是95冷却酒精），但细胞中蛋白质可溶于酒精。从理论上分析，预冷的乙醇溶液具有以下优点。一是抑制核酸水解酶活性，防止DNA降解；二是降低分子运动，易于形成沉淀析出；三是低温有利于增加DNA分子柔韧性，减少断裂。·采用 DNA不溶于酒精的原理，可以达到什么目的？将 DNA和蛋白质进一步分离。·提取 DNA还可以利用DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性原理。利用该原理时，应选用怎样的酶和怎样的温度值？蛋白酶，因为酶具有专一性，蛋白酶只水解蛋白质而不会对DNA产生影响。温度值为60 80，因为该温度值蛋白质变性沉淀，而DNA不会变性。补充： DNA的变性是指DNA分子在高温下解螺旋，

33、其温度在80以上，如在PCR技术中 DNA变性温度在95。·洗涤剂在提取DNA中有何作用？洗涤剂将细胞膜上的蛋白质，从而瓦解细胞膜。·当鉴定提取出的物质是否是DNA时，需要使用什么指示剂进行鉴定？在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺呈现蓝色。原理总结：通过利用不同浓度NaCl 溶液溶解或析出DNA，可以从细胞中提取和提纯DNA；再利用酒精进一步将 DNA与蛋白质分离开来，达到提纯的目的；最后利用二苯胺试剂鉴定提取的物质是否是DNA。实验材料的选取不同生物的组织中DNA含量不同。在选取材料时，应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。本实验用鸡血细胞做实验材料有两个原因。一是因为鸡血细胞核的DNA含量丰富，材料易得；二是鸡血细胞极易吸水胀破，而用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长。鸡血细胞破碎以后释放出的DNA，容易被玻璃容器吸附，所以在提取过程中为了减少DNA的损