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文档简介

1、传染病实验报告一、实验材料:病鸭、 镜子、剪刀、托盘、普通平板、麦 康凯平板、血平皿、接种环、酒精灯、药敏纸片、生化管、注射 器、小白鼠二、实验方法:病理解剖观察、病料接种培养、特殊平板培养、生化实验、药敏试验、动物实验、玻板凝集实验(演示)三、实验内容及步骤:(一)病理解剖观察:1、观察鸭子的天然孔道,是否有异常黏液分泌2、打开病鸭腹腔, 采用“三刀法”打开腹腔(两只鸭腿与腹 部交接的地方各剪一刀,腹部中间再剪一刀)。同时注意观察皮下及 胸、腿部肌肉有无异常(如出血、皮下水肿等 )。3、检查皮下及肌肉:观察皮下与肌肉是否有出血坏死,皮下是否 有渗出物等.4、检查体腔与内脏:注意体腔内、气囊是

2、否有异物,是否增厚、 有绿斑、出血等现象,内脏器官的体积、颜色、性质是否异常.(1)呼吸系统:主要检查鼻腔内是否有异常分泌物;气管是否 有出血环,有异常黏液分泌;肺脏颜色形状是否正常,是否有出血坏 死肿大等现象。(2)消化系统:口腔是否有黏液;食道是否有出血,坏死灶溃 疡;肌胃腺胃是否出血有坏死灶,乳头是否肿胀 ;肠道是否有充血出 血坏死灶;肝脏是否发坏生变性,肿大,有无出血点,出血斑,坏死等 异常;胰脏是否有出血,坏死.(3)泌尿系统:主要检查肾脏,是否肿大,有出血坏死尿酸盐 沉积。(4)心血管系统:心脏的颜色,是否有心包积液;各处血管是否 有充血现象.(5)淋巴系统:检查胸腺、法氏囊是否肿

3、大出血;肠道淋巴结 及盲肠扁桃体是否异常。(6)神经系统:检查颅腔脑是否肿大,积液,脑膜有无异常;神 经粗细颜色.(二)病料接种培养1、选取病变明显典型的部位接种,大鸭子选取脑、肝、脾、 肺接种,小鸭子选取接种,并将血平皿划分成相应的几部分做好标记。2、将接种环酒精灯灭菌,蘸取相应部位,使用“ Z”形划线 接种法划线接种。每蘸取一个部位后都要进行酒精灯燃烧灭菌,接种 时应在酒精灯周围进行.3、将接种好的血平皿放置在37c恒温下培养24小时后取出 观察菌落生长情况。(三)特殊平板培养1、选取病变明显典型的部位接种,大鸭子选取脑、肝、脾、 肺接种,小鸭子选取接种,并将麦康凯平板划分成相应的几部分做

4、好 标记。2、将接种环*S精灯灭菌,蘸取相应部位,使用“ Z”形划线接种法划线接种。3、将接种好的麦康凯平板放置在 37c恒温下培养24小时后 取出观察其生长情况。(四)生化实验1、选取(二).3中培养好的细菌,大鸭子选取 接种的细菌 小鸭子选取两种不同菌落形态的细菌.2、将接种环灭菌蘸取相应细菌至生化管,37C恒温,24小时后 拿出观察。(五)药敏试验1取适量培养的细菌与一定生理盐水混合均匀,用棉签蘸取后涂 布于普通平板上;2待平板上的菌液晾干后,将带有卡那霉素、氨节西林、氟苯尼 考、头抱曲松、多西霉素、恩诺沙星、磺胺甲基异恶噪的药敏纸片贴 于平板上;3将贴好药敏纸片的平板放于37c恒温箱中

5、培养24小时后观察 结果.(六)动物试验1、在EP管中加入适量的生理盐水,选取(二)。3中培养好的 细菌,大鸭子选取 接种的细菌,小鸭子选取两种不同菌落形态的细 菌用灭菌后的接种环分别蘸取至 EP管中,混匀制成菌液。2、分别用一次性注射器将三种菌液分别注入三只小鼠体内(皮下注射,注射时要缓慢推进以防局部积液),并将小鼠做好标记。24小时后观察小鼠病理特征。(七)玻板凝集实验(演示实验)1、分别编号1号,2号,3号。再分别往1号,2号,3号玻 片中加入40ul抗原,40ul抗原,40ul生理盐水。其中3号作为对照。2、分别往1号,2号加入10ul血清,5ul血清,3号不加血清. 一段时间后观察现

6、象。四、实验结果(一)病理解剖观察1、大鸭子:呼吸系统:气管出血;肺脏有出血点.消化系统: 食道充血;胃浆膜面出血;,肠道表面充血出血,肠 系膜出血;肝脏肿胀,质脆易碎,表面斑驳有针尖大小的坏死灶;胰 脏有透明样坏死灶;气囊广泛出血。泌尿系统:肾脏质脆易碎,花斑肾。心血管系统:心包黄色积液,有出血点,心冠脂肪出血。淋巴系统:胸腺肿大;法氏囊有出血斑;脾脏肿大,呈大理石样变.神经系统:脑充血,神经无明显症状.2、小鸭子:呼吸系统:气管出血;肺脏出血;气囊均有出血斑。消化系统:食道充血;腺胃肌胃出血;肝脏肿大,有针尖大小坏死 灶,颜色布局不均匀,质脆;肠道黏膜充血出血,肠系膜出血;泄殖 腔出血,胰

7、腺有针尖大小坏死灶,透明样坏死.泌尿系统: 肾脏质脆,花斑肾。心血管系统:心脏心包积液,心冠脂肪出血,心脏有出血点,充血严重。淋巴系统:胸腺肿大;脾脏肿大有坏死灶,成大理石样;法氏囊有 出血点。神经系统神经无明显症状.(二)病料接种培养(血平皿培养)1、大鸭子平板:菌落均呈乳白色,光滑,圆形菌落,无溶血现象。2、小鸭子平板;有两种形态菌落,一种呈光滑透明圆形菌落,一 种呈光滑灰白菌落有溶血现象。(三)特殊平板培养麦康凯培养基培养:大鸭子接种菌生长较好 ,呈红色;小鸭子接种菌白色菌呈灰白色生长.(四)生化实验实验中接种的三套可疑菌落生化管为如下结果试剂/菌种甘露醇鼠李糖蔗糖半乳糖果糖葡萄糖大鸭O

8、, 十+O, 十O, 十O, 十一小鸭(白色菌落)O, 十+o,+o,+O, 十一小鸭(透明菌落)O, 十O, 十O, 十O, 十O, 十一注:+阳性或产酸;O+产酸又产气;一阴性或不发酵。大肠杆菌:能发酵多种碳水化合物产酸产气,大多数菌种可迅速发酵乳糖和山梨醇,仅极少数迟发酵或不发酵;约半数菌株不 分解蔗糖。沙门氏菌:发酵葡萄糖,麦芽糖,甘露醇和山梨醇产气;不发酵乳糖、 蔗糖链球菌:能发酵简单的糖类,产酸不产气。巴氏杆菌:可分解葡萄糖、果糖、蔗糖、甘露醇和半乳糖,产酸不产 气;一般发酵乳糖、鼠李糖、水杨甘、肌醇、菊糖。(五)药敏试验二、实验结果(1)大鸭抑菌圈直径(mm判定标准耐药中介敏感卡

9、那霉素24<1314-17>18氨辛西林15<131416>17氟苯尼考24<121317>18头抱曲松27<1920-22>23多西划、素21<121315>16恩诺沙星35<1516-20>21磺胺甲基异恶噪28<121316>17(2)小鸭(白色菌落)抑菌圈直径(mm判定标准耐药中介敏感卡那霉素13< 131417>18氨辛西林7< 131416>17氟苯尼考13< 121317>18头抱曲松15< 192022>23多西划、素11< 121315&g

10、t;16恩诺沙星10< 151620>21磺胺甲基异恶噪30< 121316>17(3)小鸭(透明菌落)抑菌圈直径(mm判定标准耐药中介敏感卡那霉素7< 131417>18氨辛西林7< 1314-16>17氟苯尼考7< 121317>18头抱曲松7< 1920-22>23多西划、素7< 121315>16恩诺沙星7< 1516-20>21磺胺甲基异恶噪7< 121316>17(六)动物实验解剖后病理特征:1、小鼠1号(接种大鸭子菌):皮下出血,有胶冻样物质;心脏出 血严重;肝脏出血肿大;

11、肠粘膜出血;肾脏出血;肺脏出血;胃出血; 脾脏肿大。2、小鼠2号(接种小鸭子无色菌):打开腹腔有恶臭味;皮下有 胶冻样物质;心脏有出血充血;肝脏表面斑驳,有坏死灶;胃充血;肠 道充血;肺脏充血出血;肾脏肿大。3、小鼠3号(接种小鸭子白色菌):心脏出血;肺脏出血;肝脏肿 大出血;胃出血;脾脏肿大;肠系膜出血;胰腺出血质脆易碎;肾脏 肿大出血.(七)玻板凝集实验(演示实验)1号凝集现象最明显,2号凝集现象不明显,3号无凝集现象.五、结果与分析1、大鸭子的分析:特征病理病变为肝脏肿胀,质脆易碎,表面斑 驳有针尖大小的坏死灶;胰脏有透明样坏死灶.心脏心包积液;肺脏出 血;气囊出血。其菌落在麦康凯上生长为红色生长良好。其动物实验 病理症状呈全身性败血变化和皮下胶冻样渗出.综合生化与药敏,初步 怀疑为沙门氏菌与大肠杆菌的混合感染.沙门氏菌造成全身性败血变 化,大肠杆菌可能造成皮下腹腔胶冻样渗出。2、小鸭子分离出两种菌落。白色菌落在血平皿上有溶血现象,镜检形态为球状,呈链状排列。接种动物病变呈全身性败血,初步怀疑为

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