抗中性粒细胞胞浆抗体ppt课件

1、ANCA抗中性粒细胞胞浆抗体抗中性粒细胞胞浆抗体antineutrophil cytoplasmic antibodiesANCA的发现的发现n1982 Davies 寡免疫复合物型节段坏寡免疫复合物型节段坏死性新月体肾小球肾炎死性新月体肾小球肾炎()病人病人中初次发现中初次发现ANCA 。n1985 Vander Woude 研讨阐明研讨阐明ANCA对对Wegener肉芽肿高度敏感，肉芽肿高度敏感，是疾病活动的目的。是疾病活动的目的。What is ANCA?n是以中性粒细胞和单核细胞胞浆成分为是以中性粒细胞和单核细胞胞浆成分为靶抗原的本身抗体，主要为靶抗原的本身抗体，主要为IgG型。型。n

2、ANCA好像抗核抗体谱一样，是一类本好像抗核抗体谱一样，是一类本身抗体的总称，其作用的抗原成分是中身抗体的总称，其作用的抗原成分是中性粒细胞中的髓样颗粒蛋白。性粒细胞中的髓样颗粒蛋白。ANCA的测定的测定q间接免疫荧光法间接免疫荧光法 (IIF) 最常用最常用q 胞浆型胞浆型 c-ANCA q 核周型核周型 p-ANCA 排除排除ANA的能的能够够q 不典型不典型 a-ANCAq酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法 (ELISA)细胞质呈弥漫性颗细胞质呈弥漫性颗粒样染色不均匀粒样染色不均匀环绕细胞核周围的细环绕细胞核周围的细胞质亮染胞质亮染 直接运用直接运用IIF法判别法判别ANCA时，时，p-ANC

3、A和和ANA很难区分，两者并存时很难区分，两者并存时又可相互掩盖，在又可相互掩盖，在ANA滴度较高时那滴度较高时那么鉴别更加困难，容易呵斥假阳性或么鉴别更加困难，容易呵斥假阳性或假阴性。假阴性。 以乙醇固定的中性粒细胞为基质有时难以区分pANCA与抗核抗体，借助灵长类肝脏冰冻切片可以将二者相区别：假设抗核抗体阳性那么一切肝细胞核出现荧光，而pANCA以及cANCA)阳性，仅在肝血窦的中性粒细胞出现荧光。特异性靶抗原特异性靶抗原nc-ANCA 丝氨酸蛋白酶丝氨酸蛋白酶3 PR3np-ANCA 髓过氧化物酶髓过氧化物酶MPOn 弹性蛋白酶弹性蛋白酶HEL)n 组织蛋白酶组织蛋白酶GCGn 溶菌酶溶

4、菌酶LYn 乳铁蛋白乳铁蛋白LFn 通透性杀菌蛋白通透性杀菌蛋白BPIn PR3nPR3PR3是中性丝氨酸蛋白酶家族中的一是中性丝氨酸蛋白酶家族中的一员员, ,是由是由228228个氨基酸组成的分子量为个氨基酸组成的分子量为27KD27KD的蛋白酶。的蛋白酶。nPR3PR3可降解、消化血管壁成分如弹力可降解、消化血管壁成分如弹力蛋白及其它细胞外基质。蛋白及其它细胞外基质。 MPOnMPOMPO是中性粒细胞内含量最为丰富的蛋是中性粒细胞内含量最为丰富的蛋白质白质, ,其分子量为其分子量为133133至至155KD,155KD,由两条由两条重链和两条轻链组成。重链和两条轻链组成。nMPOMPO在中

5、性粒细胞的氧爆炸或产生超氧在中性粒细胞的氧爆炸或产生超氧阴离子过程中起重要的催化作用。阴离子过程中起重要的催化作用。 ANCA的致病作用的致病作用中性粒细胞被攻击中性粒细胞被攻击TNF,IL-1等等靶抗原转移到细胞膜外表靶抗原转移到细胞膜外表附着于血管内皮细胞外表附着于血管内皮细胞外表ANCA与之结合与之结合中性粒细胞脱颗粒、中性粒细胞脱颗粒、出现反响性氧分子、出现反响性氧分子、释放蛋白溶解酶释放蛋白溶解酶部分血管损伤，小血管炎症部分血管损伤，小血管炎症ANCA的临床意义的临床意义 ANCA相关小血管相关小血管炎炎n显微镜下多血管炎显微镜下多血管炎MPAn 变应性肉芽肿血管炎变应性肉芽肿血管炎

6、CSSn 坏死性新月体肾炎坏死性新月体肾炎NCGN n MPA肾脏局限肾脏局限型型nWegener肉芽肿肉芽肿WG ANCA不仅与原发性小血管炎相关,也可见于许多其它炎症性疾病,例如炎症性肠病,包括溃疡性结肠炎和克隆氏病;本身免疫性肝胆疾病,如原发性硬化性胆管炎;类风湿性关节炎;和某些肺部非感染性炎症性疾病,如囊性纤维化、肺间质纤维化等。但上述ANCA相关的疾病并不识别PR3和MPO,其特异性ANCA靶抗原为其它胞浆成分。与与ANCA抗体谱相关的疾病抗体谱相关的疾病疾病IIF荧光模型特异性靶抗原WGcANCA,pANCA(少见）PR3(85%)MPO(10%)MPAcANCA,pANCAPR3

7、(45%)MPO(45%)NCGNpANCA,cANCA (少见）PR3(25%)MPO(65%)CSSpANCA,cANCA (少见）PR3(10%)MPO(60%)SLEpANCALF,HEL, MPO(少见）RApANCA,aANCALF, MPO(少见）UCpANCA,aANCALF,其他PBCpANCA,aANCALF, HEL,其他感染感染pANCA,aANCAPR3, MPO,BPI,其他c-ANCA在诊断活动性在诊断活动性WG时的敏感性时的敏感性为为81%90%,特异性为特异性为97%,多数多数WG患患者的者的ANCA特异性靶抗原为特异性靶抗原为PR3;多数多数MPA患者为患者为p-ANCA，靶抗原为，靶抗原为MPO，抗，抗MPO抗体与抗体与p-ANCA同时阳性同时阳性诊断诊断MPA的特异性可高达的特异性可高达99%。ANCA阳性的临床意义 单纯间接免疫荧光下单纯间接免疫荧光下 ANCA阳阳性，其诊断价值极为有限，故对疑性，其诊断价值极为有限，故对疑心原发性小血管炎的患者，应进一心原发性小血管炎的患者，应进一步检测步检测ANCA所作用的特异性抗原所作用的特异性抗原成分，尤其是成分，尤其是 PR3和和MPO。 北大第一医院肾内科对疑心小血管炎的5604名患者血清进展了ANCA的检测