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文档简介

1、实验二：酶反应抑制剂类型的判断酶反应抑制剂类型的判断 1 实验目的实验目的1）进一步熟悉酶动力学参数的图解求值2）掌握单一底物酶促反应抑制剂的作用模型判断3）掌握在同一张图上进行多次回归拟合的方法2 实验原理实验原理 理论课上有关酶抑制剂的内容3 实验数据实验数据 对一个单一底物酶促反应的抑制剂的影响进行研究并得到以下结果： 抑制剂作用的模型是什么？估算Vmax和Km的值及反应的抑制常数。4 实验步骤实验步骤1）一次生成3条线性回归直线-10-50510152003691/V1/SEquationy = a + b*xAdj. R-Square0.99983ValueStandard Erro

2、rHIntercept0.963910.02107HSlope0.307970.00204Equationy = a + b*xAdj. R-Square0.99988ValueStandard ErrorGIntercept1.004340.01156GSlope0.200240.00112Equationy = a + b*xAdj. R-Square0.99985ValueStandard ErrorFIntercept0.992790.0065FSlope0.101616.27833E-4 针对单纯的竞争性抑制的方程式预测出Lineweaver-Burk图的斜率将随抑制剂浓度的变化而变

3、化，但1/V0轴的截距1/Vmax并不变化。因此，上述数据与抑制剂（I）作为单纯的竞争性抑制剂竞争性抑制剂一致。 从1/V0轴的截距，可以估计出Vmax。三者的斜率的分别为0.10161、0.20024、0.30797。我们从上面的方程式注意到图的斜率（SI）为： )1 (maxKiIVKmSI I SI 1 0.30797 0.5 0.20024 0 0.10161 因此，当将斜率作为I的函数作图，得到下图的结果： 2）以斜率SL（slope）对I作图-0.4-0.20.00.20.40.60.81.00.100.150.200.250.30SlopeIEquationy = a + b*Adj. R-Squar0.9987ValueStandard ErroBIntercept0.10000.00339BSlope0.20630.00525第二个图上的横坐标的截距为-Ki ；因此 Ki 可被估计为:0.5mmolL

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