设计性实验设计方案模板

1、脉通胶囊质量控制研究设计方案一、 处方 人参 大黄 川芎 葛根二、 制法以上四味，取川芎粉碎成0.3-0.5cm的粗粉，加6倍量水，浸泡4小时，水蒸汽蒸馏法提取挥发油，分取挥发油，-环糊精包合备用。另取人参、大黄、葛根粉碎成粗粉，与提取挥发油后的川芎药渣及水溶液合并，加乙醇使含醇量为75，加热回流提取3次，每次1小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.051.10(50)的稠膏，再进行喷雾干燥，干燥物粉碎成细粉，上述药粉、川芎挥发油-环糊精包合物研磨混匀，制成1000粒胶囊，即得。三、性状本品为胶囊剂，内容物为黄棕色颗粒，气清香，味辛、凉、微苦。三、 定性鉴别研究本品中人参、水

2、蛭、川芎均是经过提取后装入胶囊，所以无法用显微鉴别进行成分的定性研究。根据每种药材中所含的化学成分并结合提取方法，采用理化鉴别，其主要质量研究工作如下。 1、人参 人参中主要含人参皂苷类有效成分，在制备工艺研究时，选择提取溶剂主要是用对人参皂苷类成分溶解度大的含水醇类进行提取，故在进行定性鉴别研究时，宜对皂苷类成分进行研究。据报道，人参中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re相对含量较高，故以此二者成分为对照品，但人参皂苷Rg1和人参皂苷Re又不是人参中专属性成分，故还宜加入人参对照药材作为对照，将更具有现实意义。研究方法如下：供试品溶液的制备：取本品5粒，加温热蒸馏水30ml使溶解，加乙醚30ml洗涤

3、并入分液漏斗中，弃去乙醚液，再加乙醚30mL萃取，弃去乙醚液，水溶液加水饱和正丁醇提取5次（20mL，20mL，15mL，15mL，15mL），合并正丁醇液，加1% NaOH溶液洗涤2次，每次30mL，弃去碱液，再加用正丁醇饱和的水溶液洗涤2次，每次20mL，收集正丁醇液，置蒸发皿中蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。阴性对照溶液的制备：取阴性样品（缺人参药材的样品），按照供试品溶液制备的条件制备样品，得阴性对照溶液。对照药材溶液的制备：取人参对照药材1g，加氯仿40mL，加热回流1小时，弃去氯仿液，药渣挥干溶剂，加水0.5mL拌匀湿润后，加水饱和的正丁醇10m

4、L，超声处理30分钟，吸取上清液，加3倍量氨试液，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为对照药材溶液。薄层层析及检识方法：照薄层色谱法（中国药典2000年版一部附录 B）试验，吸取对照药材溶液，供试品溶液及阴性对照溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水（1372）10以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105烘至斑点显色清晰，并对结果进行分析。2、川芎川芎含有约1%的挥发油。主要成分有内酯类、酚类、有机酸类、生物碱类及有机酸酯类等。在制备工艺研究时，采用先提取挥发油，再用醇提，基本上能将川芎中所含大多有效成分提出。关于川芎的鉴

5、别方法多采用TLC法，以对照药材为对照。进行研究：供试品溶液的制备：方法1 取本品4粒，倾出内容物，置烧杯中，加30mL水使溶解，转入分液漏斗中，用乙醚提取3次，每次15mL，合并乙醚液，用2% Na2CO3提取3次，每次15mL，合并碱液，用盐酸调pH值23，再用乙醚提取3次，每次15mL，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为供试品溶液。 方法2 取本品4粒，倾出内容物，置烧杯中，加30mL水使溶解，转入分液漏斗中，用正己烷萃取3次，每次15mL，合并正己烷溶液，用甲醇萃取2次（20mL，15mL），合并甲醇液，回收甲醇至约5mL，作为供试品溶液。阴性对照溶液的制备：取阴性对照样品

6、（缺川芎的样品），按照供试品溶液的制备方法进行制备，即得。对照药材溶液的制备：取川芎对照药材1g，加醋酸乙酯20mL，浸渍过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加2mL甲醇使溶解，作为对照药材溶液。薄层层析及检识方法：照薄层色谱法（中国药典2000年版一部附录 B）试验，吸取对照药材溶液、供试品溶液及阴性对照液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯（91）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。四、含量测定人参为方中君药，故以人参为含量测定对象。中国药典2005年版一部“人参”含量测定规定，人参中含人参皂苷Rg1和人参皂苷Re不少于0.25%，含人参皂苷Rb1不少于0.20%

7、，本品中仍以人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1为测定指标，并参考有关文献312进行研究。1仪器与试药高效液相色谱仪（日本岛津）紫外检测器（日本岛津）CLCODS C18柱人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rb1对照品2色谱条件选择 (1)色谱条件 参照中国药典2005年版一部“人参”项下含量测定的色谱条件。并经研究确定：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：乙腈-水梯度洗脱；检测波长为203nm。 (2)理论塔板数（n）的计算根据对照品色谱峰计算人参皂苷Re的理论塔板数（n）。n=16（tR/w）2(3) 分离度(R)据公式R=2(tR2-tR1)/(w1+w2)计

8、算分离度（4）拖尾因子据公式T=W0.05h/2d1计算拖尾因子3对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1 对照品，人参皂苷Re 对照品（中国药品生物制品检定所），置五氧化二磷干燥器中，减压干燥48小时，取出，精密称取适量，用甲醇溶解制成每1ml含人参皂苷Rg10.4mg，人参皂苷Re0.35mg的溶液，作为对照品溶液。4 供试品溶液的制备取本品5粒，倾出内容物，精密称定，加温热蒸馏水30ml使溶解，加乙醚30ml洗涤并入分液漏斗中，弃去乙醚液，再加乙醚30mL萃取，弃去乙醚液，水溶液加水饱和正丁醇提取5次（20mL，20mL，15mL，15mL，15mL），合并正丁醇液，加1% NaOH溶液洗涤2次

9、，每次30mL，弃去碱液，再加用正丁醇饱和的水溶液洗涤2次，每次20mL，收集正丁醇液，置蒸发皿中蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。5阴性对照试验将供试品溶液（按正文中条件制备），阴性对照溶液（缺人参药材的样品，照供试品溶液条件同法制备）及对照品溶液（人参皂苷Rg1、人参皂苷Re），分别注入液相色谱仪，按上述色谱条件进行测，判断阴性是否有干扰。6线性试验精密吸取人参皂苷Rg1、对照品（0.462mg/ml）、人参皂苷Re对照品（0.414mg/ml），注入液相色谱仪，按上条件进行测定，计算回归方程和相关系数。7稳定性试验（考察供试品溶液保存的时间）精密吸取同一供试品溶液10l，注入液相色谱仪，按上色谱条件，间隔不同时间0，0.5h、1h、2h、4h进行测定，计算RSD值（3%）。8精密度试验（考察仪器的精密度）精密吸取同一对照品溶液 10 l ，注入液相色谱仪，按上条件进行测定，计算RSD值（3%）。9重复性试验对同一批号样品，按照供试品溶液制备方法制备6次，进行测定，计算RSD值（3%）。10耐用性试验液相色谱法典型的变动因素：不同厂牌或不同批号的同类型色谱柱， 流动相的组成比例的变化，流动相pH值的变化，柱温， 流速，检测波长等。按上述