痰液细菌学检查概要

1、痰液细菌学检验痰涂片镜检：选择痰标本中脓细胞成团块状分布，集中而不稠密，且周围无鳞状上皮细胞或无 大量成团状分布的细菌球的区域为读片区，认真收寻视野中脓细胞聚集处的脓细胞 胞浆中有无吞噬的细菌及细菌的染色排列特征.接种培养:血平板、巧克力平板、麦康凯/沙氏平板培养观察：一、G+菌:BA生长、Choc不生长、MecK不生长1、G+c 菌：葡萄球菌：淡黄色/白色，中等大小，较凸，规则圆形,B皑血,较湿润，除金黄色葡 萄球菌外，一般不具有临床意义；微球菌：黄色/白色/橙色，中等大小，较凸，规则圆形，不溶血,较干燥，不易乳化较 葡萄球菌生长缓慢，该菌一般无临床意义；链球菌：白色/灰白色、凸起小菌落，B

2、溶血为溶血型链球菌；灰白隆起中心扁平或凹陷，1.0-1.5mm大小的宽大a溶血为肺炎链球菌，该菌是最 常见的肺部感染病原菌，在社区获得性感染中有重要的地位；细如针尖，白色凸起a溶血的为草名色链球菌，自然咯痰标本中的草绿色链球菌 一般不具有临床意义；肠球菌：灰白，低凸,2.0mm左右之a溶血菌落，较湿润，但一般不具有临床意义；口腔球菌：白色凸起较大菌落，不溶血,黏着,接种针挑之则整个菌落挑起，琼脂 上不留痕迹。该菌偶尔可引起肺部的严重感染，一般好发生于COPD病人和肺气月中 病人；学生球菌：白色、凸起细小菌落,自容血,生长慢48h仅0.20.4mm,在含羊血的 MH琼脂上不生长。该菌是上呼吸道的

3、正常菌群组成之一，一般不导致肺部感染；2、G+ b一依靠溶血特征，菌落形态、菌落大小、菌体形态区分：棒状杆菌：白色1.0-1.5mm左右大小，较干燥,不溶血/狭窄B溶血的为白喉或一 般棒状杆菌；小而湿润，灰白/无色，半透明的为J-K棒状杆菌;灰白细小,自容血的可能 为假结核、化脓放线菌、溶血分泌杆菌；除白喉杆菌外，假结核、化脓放线菌、溶血 分泌杆菌是罕见的咽喉部病源菌，棒状杆菌一般不导致肺部感染；乳杆菌：细小，白色凸起a溶血菌落，有特殊的酸臭味，口腔正常菌群，无临床意 义；芽抱杆菌：灰白大菌落，表面粗糙如毛玻璃状、蜡状、边缘不规则，不同种类菌 落形态差异巨大，宽大B溶血。延长培养时间，菌落从湿

4、润变得干燥，边缘呈放射状扩 散，形成叶状、掌状、雪花状、齿轮状等，常常为痰培养的污染菌；根据形态分为G- b（革兰阴性杆菌、G-co（革兰阴性球菌、以及根据对特殊营养 的需求对苛养性G- b进一步分类，常见的如嗜血杆菌，军团菌等：BA生长、Choc生长、MecK生长,一一Gram染色:G- b一氧化酶、分科琼脂颜 色肠杆菌:氧化酶（-,分科琼脂上黄色湿润大菌落；弧菌:氧化酶（+,分科琼脂上淡黄色扁平大菌落；非发酵菌：氧化酶（+/-,分科琼脂上蓝色/无色透明小菌落一鲍曼不动杆菌为中等 大小，菌落聚集处产不扩散黄色色素，分离菌落为兰色；BA生长、Choc生长、MecK不生长,Gram染色:G-co

5、氧化酶（+、触酶（十奈瑟菌：白色/黄色中等大小菌落，该类细菌为口腔常见正常菌群，该菌在痰培养 中含量的高低反应了标本采集状态的合格程度，大量出现提示培养结果将是不可信 的；卡他莫拉菌：白色小菌落（24h内，菌落有脆性，用接种环推之可移，是儿科和老年 病人常见的下呼吸道病原菌；BA不生长/细小、Choc生长、MecK不生长, Gram染色:G-b、菌体细小或 呈扭曲之长丝状嗜血杆菌：灰色/无色，半透明，1.5-2.0mm的多为流感嗜血杆菌，该菌为最常见的肺 部感染病原菌，可发生于各个年龄层次，其高携带与COPD发病有较强的相关性；灰色 略黄,不透明，1.0-1.5mm的多为副流感嗜血杆菌。一般副

6、流感嗜血杆菌不导致肺部 感染，大量出现提示培养结果将是不可信的；BA不生长、Choc不生长、MecK不生长、BCYE- a生长/或在含有L-半胱氨 酸、铁离子、复合抗生素选择剂的强化血琼脂上生长 一Gram染色:G-b、菌体细、 长丝状，提示可能为军团菌：该菌在BCYE- a± 4872 h为中等大小扁平菌落，灰白色， 较粘着;该菌具有较强的生物危险性，其中嗜肺军团菌可传染；感染性腹泻一送检指征1具感染性腹泻症状：包括细菌性腹泻或病毒性，如志贺菌、沙门菌、弧菌科、 致病性大肠埃希菌、小肠结肠炎耶尔森菌和轮状病毒等；2患者长期使用抗生素后的腹泻：要考虑抗生素相关性腹泻，可能引起的致病菌

7、有念珠菌、金黄色葡萄球菌、艰难梭菌二标本采集和注意事项1.标本采集：(1粪便标本：采集粪便中的粘液、脓血、水样部位。(2直肠拭子：如不能立即培养，应将标本放入运送培养基或pH7.0的磷酸盐甘油 中保存运送。(3呕吐物：(4可疑食品。2.注意事项：(1采集新鲜粪便；(2在急性期采集标本；(3用药前采集标本；(4厌氧菌培养应在床 边接种。三常见肠道病原微生物的分离与鉴定1.志贺菌:志贺菌属是引起人类细菌性腹泻的最常见病原菌之一。以其。抗原将志贺菌属分为4个血清型,痢疾志贺菌、福氏志贺菌、鲍氏志贺菌、宋内志贺 菌。我国大部分地区以福氏志贺菌为主。(1分离培养:取粪便的粘液或脓血部分，接种于SS琼脂和

8、麦康凯琼脂平板 上,35C过夜培养；(2初步鉴定:挑选无色透明、中等大小、圆形、光滑的菌落接种于KIA和MIU培养基.上，35C过夜培养；(3最后鉴定:取乳糖(斜面阴性，发酵葡萄糖产酸不产气，硫化氢、动力、月尿素酶阴性叫深阴性的菌落作生化反应和血清凝集试验(4非典型株的处理：对生化反应和血清凝集试验结果不符合者，可用琼脂和肉汤 交替传代,一般经5-10代后可恢复典型性状；(5临床意义:志贺菌属的致病作用主要是侵袭力和内毒素，个别菌的某些型能产 生外毒素。2 .沙门菌:沙门菌属广泛存在于自然界中，已发现有2000多个血清型，但只有少数几个血清 型对人类致病。鼠伤寒沙门菌是常见肠道致病菌，由其引起

9、的腹泻病和院内交叉感 染居各沙门菌感染之首，尤其以免疫功能未健全的婴幼儿易感(1分离培养:取患者的粪便(肠热症患者2周以后，胃肠炎病人早期、尿液、血液 或骨髓液、其他体液、分泌物、呕吐物或食物等标本，接种增菌培养基或直接接种于SS琼脂和麦康凯琼脂平板上，35C过夜培养；(2初步鉴定:挑选无色透明中心呈黑色、中等大小、圆形、光滑的菌落接种于KIA和MIU培养基上，35C过夜培养；(3最后鉴定:取乳糖(斜面阴性,发酵葡萄糖产酸产气(伤寒沙门菌不产气，硫化氢 不定，动力阳性，月尿素酶、呷咪阴性的菌落作生化反应和血清凝集试验 ；(4临床意义:沙门菌属对人类致病临床上表现为肠热症(伤寒和副伤寒、败血症

10、和食物中毒(肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌和鸭沙门菌等。3 .致病性弧菌：致病性弧菌已成为夏秋季急性流行性腹泻和食物中毒的重要、常见病原菌 ，包 括弧菌属、气单胞菌属和邻单胞菌属。溶血素和肠毒素是弧菌属重要的致病因子 ； 气单胞菌能产生肠毒素、溶血素和细胞毒素等。（1分离培养:取患者的粪便、呕吐物或食物等标本，接种增菌培养基（碱性陈水或 直接接种于SS琼脂、庆大琼脂或TCBS琼脂平板上，35C过夜培养；（2初步鉴定:悬滴标本运动活泼（可作制动试验，革兰染色阴性，具有多型性；在选 择平板上菌落形态典型；在KIA培养基上不分解乳糖，分解葡萄糖产酸不产气（个别 产气，不产硫化氢；氧化酶阳性（

11、麦氏弧菌为阴性；（3最后鉴定:进行生化反应和血清凝集试验。4.致腹泻大肠埃希菌（DCEC:DCEC是引起小儿腹泻的一组重要病原微生物。1945年Bray首次报告了大肠 埃希菌引起的婴幼儿腹泻，生化反应和血清凝集试验作为 DCEC的最后鉴定。（1产 肠毒素型大肠埃希菌（ETEC:ETEC有30个血清型，可产生两种肠毒素，即耐热肠毒素 （ST和不耐热肠毒素（LT;（2肠致病性大肠埃希菌（EPEC:EPEC有18个血清型，是流行性婴幼儿腹泻的病 原菌，具有高度传染性。多发生在夏秋季，临床表现:发热、呕吐、腹泻、便中多粘液 无血，病程较长；尿液细菌学检查如何看待尿培养结果？对尿培养结果白处理原则是：（1菌落计数，G+球菌10转/ml,G一杆菌10阶/ml 时，则报告细菌培养鉴定结果和药敏结果，不再报告细菌数量；（2培养结果小于以上规定时，则报告细菌菌落计数，通常不报告药敏，以免造成误 导用药;（3如果细菌小于规定细菌数，但培养出的细菌较纯，病人又多为慢性泌尿系统 感染时，则既报告细菌鉴定结果及菌落计数结果又报告药敏结果。（4如果病人在近期多次培养的结果不一样，菌落计数均小于规定指标时，这些不稳定的细菌多为正常 菌群,临床意义