3.2制药用水的质量保证与控制ppt课件

1、1制药用水的质量保证与控制制药用水的质量保证与控制2制药用水的分类、定义及要求制药用水的分类、定义及要求定义定义 制药用水是药物生产用量大，使用广的一种辅料制药用水是药物生产用量大，使用广的一种辅料,用用于生产过程及药物制剂的制备。于生产过程及药物制剂的制备。分类分类 分为饮用水、纯化水分为饮用水、纯化水 、注射用水及灭菌注射用水。、注射用水及灭菌注射用水。3 制药用水的用途制药用水的选择制药用水的选择 应根据生产工序或使用目的与要求选用适宜的制药应根据生产工序或使用目的与要求选用适宜的制药用水。用水。药品生产企业应确保制药用水的质量符合预期用途药品生产企业应确保制药用水的质量符合预期用途的要

2、求。的要求。4 制药用水的质量要求饮用水饮用水其质量必须符合现行中其质量必须符合现行中 华人民共和国国家标准华人民共和国国家标准规规范；范；GB5749- 2019。纯化水纯化水 不含任何附加剂，其质量应符合不含任何附加剂，其质量应符合二部纯化二部纯化水项下的规定。水项下的规定。5 制药用水的质量要求制药用水的质量要求注射用水注射用水 其质量应符合其质量应符合二部注二部注 射用水项下规射用水项下规定。定。灭菌注射用水灭菌注射用水 不含任何添加剂。其质量应符合不含任何添加剂。其质量应符合二二 部灭菌注射用水项下规定。部灭菌注射用水项下规定。6GMP 对制药用水的要求对制药用水的要求 药品生产用水

3、应适合其用途，药品生产用水应适合其用途，应至少采用饮用水作应至少采用饮用水作 为制药用水。为制药用水。 各类药品生产选用的制药各类药品生产选用的制药用水应符合用水应符合的相关要求。的相关要求。7GMP 对制药用水的要求对制药用水的要求 - 水处理设备及其输送系统的设计、安装和维护应能水处理设备及其输送系统的设计、安装和维护应能确保制药用水达到设定的质量标准。确保制药用水达到设定的质量标准。 - 水处理设备的水处理设备的 运行不得超出其设计能力。运行不得超出其设计能力。 - 应定期清洗应定期清洗,并对清洗效果进行验证。并对清洗效果进行验证。 - 纯化水、注射用水储罐和输送管道所用材料应无毒、纯化

4、水、注射用水储罐和输送管道所用材料应无毒、 耐腐耐腐 蚀；储罐的通气口应安装不脱落纤维的疏水性蚀；储罐的通气口应安装不脱落纤维的疏水性 除除菌滤器；菌滤器； 管道的设计和安装应避免死角、盲管。管道的设计和安装应避免死角、盲管。 - 结构设计应简单、可靠、拆装简便。结构设计应简单、可靠、拆装简便。 - 为便于拆装、更换、清洗零件为便于拆装、更换、清洗零件,执行机构的设计尽执行机构的设计尽量采用标准量采用标准 化、通用化、系统化零部件。化、通用化、系统化零部件。8GMP 对制药用水的要求对制药用水的要求 -水质进行定期监测水质进行定期监测 包括制药用水包括制药用水及原水的监测及原水的监测 ，并有相

5、，并有相 应应 的记录。的记录。 -防止微生物的滋生防止微生物的滋生 纯化水、注射纯化水、注射用水的制备、储存和分配，用水的制备、储存和分配， 如注射用水可采用如注射用水可采用70以上保温以上保温循环。循环。 - 消毒灭菌消毒灭菌 按照按照SOP 对纯化水、对纯化水、注射用注射用 水管道进行消毒水管道进行消毒,必必 要时包含其他供水管道，并有相要时包含其他供水管道，并有相关记录。关记录。 SOP 还应详细规定制药用水微生还应详细规定制药用水微生物污染的警戒限度、纠偏限物污染的警戒限度、纠偏限 度和应采取的措施。度和应采取的措施。9 GMP 对制药用水设备清洗的要求对制药用水设备清洗的要求 设备

6、清洗的规程应遵循以下原则设备清洗的规程应遵循以下原则有明确的清洗方法和清洗周期。有明确的清洗方法和清洗周期。明确关键设备的清洗验证方法。明确关键设备的清洗验证方法。清洗过程和清洗后检查的数据记录并存档保清洗过程和清洗后检查的数据记录并存档保存。存。无菌设备的清洗无菌设备的清洗, - 直接接触药品的部位和部件必须灭菌直接接触药品的部位和部件必须灭菌 - 表明灭菌日期表明灭菌日期,必要时进行无菌验证。必要时进行无菌验证。 经灭菌的设备在经灭菌的设备在3天内使用。天内使用。某些可移动的设备可移到清洁区进行清洗、某些可移动的设备可移到清洁区进行清洗、消毒和灭菌。消毒和灭菌。参考示例参考示例10 我国我

7、国GMP 对制药企业制水系统微生物污染对制药企业制水系统微生物污染的要求的要求 药品生产质量管理规范对生产企业工艺用水系统的要求, 可以看出，新版GMP 强调了水系统的制备、储存和分配应能防止微生物的滋生，这就对整个系统设备和管道的材料构成、管道回路的布局和设备性能提出了特别的要求。并加强了微生物限度的检测。11工艺用水系统的验证工艺用水系统的验证 一般性要求 一般是参照FDA 的观点进行验证，采用以下两类方法 验证系统的可靠性： 定期检测微生物学指标。 在特定的监控部位安装监控装置，对水系统的有关 部位取样检测，以确保整个系统始终达标运行。12 一般性要求一般性要求 FDA 高纯水检查指南高

8、纯水检查指南中论述，工艺用水系中论述，工艺用水系统的验证一般可分为统的验证一般可分为3 个阶段。个阶段。 初始验证阶段初始验证阶段 运行阶段运行阶段 长期考察阶段长期考察阶段 工艺用水系统的验证工艺用水系统的验证13工艺用水系统的验证工艺用水系统的验证 一般性要求一般性要求 我国工艺用水验证的基本思路我国工艺用水验证的基本思路 证明水系统在已有的或未来的操作情况下，工艺用水的证明水系统在已有的或未来的操作情况下，工艺用水的 质量与预期设计的一致。质量与预期设计的一致。 验证必须用文件证明，当根据设计的操作方法和规程，验证必须用文件证明，当根据设计的操作方法和规程， 管理工艺用水系统时，系统能稳

9、定地生产出一定数量和管理工艺用水系统时，系统能稳定地生产出一定数量和 质量质量 的水。的水。 验证通常需进行适当的挑战性实验，但验证方法需认真验证通常需进行适当的挑战性实验，但验证方法需认真 考虑；给水系统人为接种微生物或加入内毒素以考察其去考虑；给水系统人为接种微生物或加入内毒素以考察其去 除污染的能力是不切实际的除污染的能力是不切实际的 。14 工艺用水系统的验证工艺用水系统的验证 URS(工程技术标准确认工程技术标准确认SQ)工程技术指标是用于满足用户需求的工程技术实现方式，工程技术指标是用于满足用户需求的工程技术实现方式，包括功能指标及工程包括功能指标及工程 技术指标。技术指标。工程技

10、术指标确认包含工程技术指标确认包含 设备设备/系统的详细工程技术信息描系统的详细工程技术信息描述。述。是供应商制造厂供货技术文件的依据。是供应商制造厂供货技术文件的依据。其具体内容需要与供货商制造商共同确认。其具体内容需要与供货商制造商共同确认。为了清晰完整的表示用户需求，建议使用表格。为了清晰完整的表示用户需求，建议使用表格。 在签署合同前，需对供应商在签署合同前，需对供应商 进行审计，以确保其有能力进行审计，以确保其有能力按照功能设计制造相应设备。按照功能设计制造相应设备。 如：用水情况表：使用点位置、用水时间、流量、用如：用水情况表：使用点位置、用水时间、流量、用水量、用水水量、用水 水

11、温、水温、 压力等。压力等。 选材要求选材要求 系统功能系统功能 监测和记录的参数监测和记录的参数 自自控配置要求控配置要求15 工艺用水系统的验证工艺用水系统的验证 程序程序nDQ(设计确认)n -设计文件确认n -系统基本生产参数的确认n -主要组件的确认生产能力、资料、抛光等）n 16 工艺用水系统的验证工艺用水系统的验证程序程序关键仪表的确认量程、精度等）关键仪表的确认量程、精度等） - 规格确认规格确认 是否购入安装了符合规格的仪表。是否购入安装了符合规格的仪表。 - 厂商资质的确认厂商资质的确认 确认所购仪器出厂前的检验记录。确认所购仪器出厂前的检验记录。 - 设置确认设置确认 确

12、认是否设置了符合规格要求的仪表。确认是否设置了符合规格要求的仪表。 17 工艺用水系统的验证工艺用水系统的验证程序程序 施工程序的确认施工程序的确认 焊接、坡度、死角、压力测试等。焊接、坡度、死角、压力测试等。 系统功能的确认系统功能的确认 主要的报警联锁功能、消毒主要的报警联锁功能、消毒/灭菌方灭菌方 式等。式等。 偏差报告偏差报告18 工艺用水系统的验证工艺用水系统的验证 程序程序 IQ安装确认）安装确认） - 文件确认文件确认 P&ID管道仪表流程图和布局图的检查非管道图）管道仪表流程图和布局图的检查非管道图） - 组件的检查组件的检查 - 仪表和仪表校准的检查确认重要仪表与标准

13、仪表的仪表和仪表校准的检查确认重要仪表与标准仪表的误差在记录里附上所使用的标准仪表的校正说明书等。误差在记录里附上所使用的标准仪表的校正说明书等。19 工艺用水系统的验证工艺用水系统的验证 程序程序 - 材料和表面抛光的检查材料和表面抛光的检查 - 组件结构的检查组件结构的检查 - 死角的确认死角的确认 - 焊接文件焊接文件 - 排放能力的确认排放能力的确认 - 水压测试的确认水压测试的确认 - 脱脂钝化的确认脱脂钝化的确认 - 公用设施的确认公用设施的确认 - 控制系统硬件组件的检查控制系统硬件组件的检查 - 控制系统软件配置的检查控制系统软件配置的检查 - 偏差报告偏差报告20 工艺用水系

14、统的验证工艺用水系统的验证 程序程序 第1阶段：2-4周 - 每个制水工序点和使用点每天取样，连续进行24周 -运行参数的确认 -系统清洁和消毒程序和周期的确认 第2阶段：2-4周 -每个制水工序点和使用点每天取样，连续进行24周 第3阶段：1年 -每天至少1个使用点取样，每周所有使用点轮换取样21 工艺用水系统验证工艺用水系统验证施行施行制定验证方案制定验证方案验证方案是企业重要技术标准。是进行验证的依据，应包括以下验证方案是企业重要技术标准。是进行验证的依据，应包括以下内容：内容：-项目名称方案名称）项目名称方案名称）-方案编号方案编号-方案制定人、制定日期方案制定人、制定日期-方案审核人

15、、审核日期方案审核人、审核日期-方案批准人、批准日期方案批准人、批准日期-项目概述项目概述-验证目的验证目的-验证方法验证方法-采用文件采用文件-控制标准控制标准-验证步骤验证步骤-验证周期验证周期-验证记录验证记录22工艺用水系统验证工艺用水系统验证施行施行 批准验证方案批准验证方案 验证方案应经验证项目负责人批准后生效验证方案应经验证项目负责人批准后生效. 组织实施组织实施 由验证项目负责人组织验证小组成员由验证项目负责人组织验证小组成员. 根据验证方案所规定的方法、步骤、根据验证方案所规定的方法、步骤、 标准具体实施标准具体实施. 23工艺用水系统验证工艺用水系统验证施行施行 提出验证报

16、告提出验证报告 验证工作结束后，验证人员应及时汇总验证结果，验证工作结束后，验证人员应及时汇总验证结果， 编制验证报告编制验证报告- 验证报告内容应包括：验证报告内容应包括： 验证项目名称验证项目名称 验证日期验证日期 验证人员验证人员 验证结果验证结果 偏差处理偏差处理 最终结论最终结论 报告起草人签名报告起草人签名 证小组组长审核签名证小组组长审核签名 提交企业验证工作负责人提交企业验证工作负责人24工艺用水系统验证工艺用水系统验证施行施行批准验证报告批准验证报告 由企业验证工作负责人批由企业验证工作负责人批 准准建立验证档案建立验证档案 应建立完整的验证档案，将每项验证工作的有关文件归档

17、。应建立完整的验证档案，将每项验证工作的有关文件归档。25制药工艺用水的污染制药工艺用水的污染 水是一种良好的溶剂，能溶解各种固态、液态和气态的物质;含有各种盐类和化合物，溶有CO2。胶体和大量的非溶解性物质如腐殖质胶体、 黏土、沙石、 微生物、浮游生物等。 排放的废水、废气和废渣等有害物质。 因而，自然界的水是不纯水，必须要经过复杂的处理程序才 能用于制药生产中。 26制药用水系统的污染制药用水系统的污染 大体上可分为外源性污染和内源性污染两种。大体上可分为外源性污染和内源性污染两种。 外源性污染外源性污染 内源性污染内源性污染27 原水的污染是制药用水原水的污染是制药用水最主要的外源性污染

18、源。最主要的外源性污染源。 美国药典、欧洲药典美国药典、欧洲药典及中国药典均明确要求及中国药典均明确要求制药用水的原制药用水的原 水至少要达到饮用水水至少要达到饮用水的质量标准。的质量标准。 饮用的水质与其水饮用的水质与其水源的污染相关。源的污染相关。 随季节的变化而变随季节的变化而变化。化。 水系统的外源性污染水系统的外源性污染28 水系统的外源性污染水系统的外源性污染 贮罐的排气口无保护措施或使贮罐的排气口无保护措施或使用了劣质气体过滤器、用了劣质气体过滤器、 用于混和混床中阴阳离子树用于混和混床中阴阳离子树脂的压缩空气中存在污染菌。脂的压缩空气中存在污染菌。 水从污染了的出口倒流。水从污

19、染了的出口倒流。 地漏的缺陷以及更换活性炭地漏的缺陷以及更换活性炭和去离子树脂带来的外源和去离子树脂带来的外源 性污染。性污染。29 水系统的内源性污染水系统的内源性污染内源性污染的影响因素内源性污染的影响因素 制水系统的设计制水系统的设计 选材选材 运行运行 维护维护 贮存贮存 使用使用 以上因素与水系统的内源性污染密切相关，它与污染也以上因素与水系统的内源性污染密切相关，它与污染也有十分密切的相关性。如饮用水系统的微生物污染有可有十分密切的相关性。如饮用水系统的微生物污染有可能导致细菌内毒素的增加，使制药用水的质量发生变化。能导致细菌内毒素的增加，使制药用水的质量发生变化。30 水系统的内

20、源性污染水系统的内源性污染 水系统的组成单元均可能成为微生物内源性污染源。 原水中的微生物被吸附于活性炭、去离子树脂、过滤膜或其它设备 的表面上，可形成生物膜。 生物膜中的微生物受到生物膜的保护，增强了抵抗力如对消毒剂有 一定的抵抗力。如果其中某些微生物从生物膜脱落并被冲往水系统其它区域时，微生物可吸附于悬浮粒子上，生长繁殖,成为纯化水设备和分配系统的污染源。31 细菌内毒素细菌内毒素 热原 药学上通常是指那些能致热的微生物代谢产物。 大多数细菌和许多霉菌都能产生热原。 革兰阴性杆菌的代谢产物，致热能力强是造成热原反应的最主要因素。 内毒素的危害性-除了引起高烧外，还有凝血、 致代谢紊乱、血小

21、板积聚、骨髓坏死等毒副作用，这是各国重视控制细菌内毒素污染的重要原因。32 我国现行饮用水质量标准我国现行饮用水质量标准 GB5749-2019替代了替代了GB5749-1985标标准准,微生物检查指标由微生物检查指标由2项增项增 至至 6项项; 增加了大肠埃希菌、耐热大增加了大肠埃希菌、耐热大肠菌群、贾第鞭毛虫和隐孢子肠菌群、贾第鞭毛虫和隐孢子 虫检查虫检查,修修 订了大肠菌群的检验方法。订了大肠菌群的检验方法。 标标 准准 指指 标标 限限 值值 大肠菌群大肠菌群 MPN 100ml或或cfu 100ml 不得检出不得检出 耐热大肠菌群耐热大肠菌群 MPN 100ml或或cfu 100ml

22、 不得检出不得检出 大肠埃希菌大肠埃希菌 MPN 100ml或或cfu 100ml 不得检出不得检出 菌落总数菌落总数 cfu ml 100 贾第鞭毛虫贾第鞭毛虫 10L 1个个 隐孢子虫隐孢子虫 10L 1个个 注注 大肠菌群大肠菌群MPN表示最可能数。表示最可能数。 当水样检出总大肠菌群时当水样检出总大肠菌群时,应进一步应进一步检验大肠埃希菌或耐热大检验大肠埃希菌或耐热大 肠菌群。肠菌群。 CFU表示菌落形成单位。表示菌落形成单位。33 饮用水管理饮用水管理饮用水的标准饮用水的标准 储水池定期清洗，清洗要有卫生防疫部门的认可，储水池储水池定期清洗，清洗要有卫生防疫部门的认可，储水池要有二次

23、供水证书，储水池的人孔、维修孔必须密闭并且要有二次供水证书，储水池的人孔、维修孔必须密闭并且加锁加氯杀菌国标总氯加锁加氯杀菌国标总氯0.05)自来水泵定期切换。自来水泵定期切换。 34 制药用水的质量标准 1、纯化水ChP2019BP2019/EP6.2USP2009ChP2019酸碱度酸碱度酸碱度酸碱度氯化物氯化物硫酸盐硫酸盐钙盐钙盐硝酸盐硝酸盐(60ppb)硝酸盐硝酸盐(2ppm)硝酸盐硝酸盐(60ppb)亚硝酸盐亚硝酸盐(20ppb)亚硝酸盐亚硝酸盐(20ppb)氨氨(0.3ppm)氨氨(0.3ppm)电导率电导率电导率电导率电导率电导率易氧化物易氧化物TOC或易氧化物或易氧化物TOCT

24、OC或易氧化物或易氧化物不挥发物不挥发物(1mg/100ml)不挥发物不挥发物(1mg/100ml)重金属重金属(0.3ppm)重金属重金属(0.1ppm)重金属重金属(0.1ppm)铝盐铝盐(10ppb)微生物总数不得过微生物总数不得过100个个/1ml微生物总数不得过微生物总数不得过100个个/1ml微生物总数不得过微生物总数不得过100个个/1ml35 制药用水的质量标准2、注射用水ChP2019BP2019/EP6.2USP2009ChP2019pH5.0-7.0pH5.0-7.0(加KCL)氨(0.2ppm)氯化物、硫酸盐、氯化物、硫酸盐、钙盐、硝酸盐、亚钙盐、硝酸盐、亚硝酸盐、二氧

25、化碳、硝酸盐、二氧化碳、易氧化物、不挥发易氧化物、不挥发物与重金属均同纯物与重金属均同纯化水化水硝酸盐硝酸盐(2ppm)铝盐铝盐(10ppb)、电导率、电导率硝酸盐，亚硝酸盐，总有硝酸盐，亚硝酸盐，总有机碳、电导率、不挥发物机碳、电导率、不挥发物与重金属均同纯化水。与重金属均同纯化水。细菌内毒素细菌内毒素(0.25Eu/ml)细菌内毒素细菌内毒素(0.25Eu/ml)细菌内毒素细菌内毒素(0.25Eu/ml)微生物总数不得过微生物总数不得过10个个/1ml微生物总数不得过微生物总数不得过10个个/1ml微生物总数不得过微生物总数不得过10个个/1ml36 制药用水的质量标准制药用水的质量标准3

26、、灭菌注射用水、灭菌注射用水ChP2019BP2019/EP6.2USP2009ChP2019pH5.0-7.0酸碱度酸碱度pH5.0-7.0(加加KCL)pH5.0-7.0(加加KCL)氯化物氯化物氯化物氯化物氯化物氯化物氯化物氯化物硫酸盐硫酸盐硫酸盐硫酸盐硫酸盐硫酸盐硫酸盐硫酸盐钙盐钙盐钙盐和镁盐钙盐和镁盐钙盐钙盐钙盐钙盐硝酸盐硝酸盐(60ppb)硝酸盐硝酸盐(2ppm)硝酸盐硝酸盐(60ppb)亚硝酸盐亚硝酸盐(20ppb)亚硝酸盐亚硝酸盐(20ppb)氨氨(0.2ppm)氨氨(0.2ppm)氨氨(0.2ppm)氨氨(0.2ppm)二氧化碳二氧化碳二氧化碳二氧化碳二氧化碳二氧化碳易氧化物

27、易氧化物易氧化物易氧化物易氧化物易氧化物易氧化物易氧化物不挥发物不挥发物(1mg/100ml)不挥发物不挥发物(1mg/100ml)不挥发物不挥发物(1mg/100ml)重金属重金属(0.3ppm)重金属重金属(0.1ppm)重金属重金属(0.1ppm)细菌内毒素细菌内毒素(0.25Eu/ml)细菌内毒素细菌内毒素(0.25Eu/ml)细菌内毒素细菌内毒素(0.25Eu/ml)细菌内毒素细菌内毒素(0.25Eu/ml)电导率电导率电导率电导率无菌，可见异物，无菌，可见异物，不溶性微粒不溶性微粒无菌，可见异物无菌，可见异物无菌，可见异物无菌，可见异物无菌，可见异物，无菌，可见异物，不溶性微粒不溶

28、性微粒37 我国制药用水的质量标准概况我国制药用水的质量标准概况 2019版版关于制药用水的质量标，除适当减少关于制药用水的质量标，除适当减少 了某些化学检查项外，主要是增加两项检查：了某些化学检查项外，主要是增加两项检查： 电导率检查：用于控制各种阴阳离子的污染程度。电导率检查：用于控制各种阴阳离子的污染程度。 总有机碳检查：控制有机污染有机小分子上述两项的总有机碳检查：控制有机污染有机小分子上述两项的 在线检测可对制水系统进行实时流程监控。在线检测可对制水系统进行实时流程监控。38我国制药用水质量标准概况我国制药用水质量标准概况1980 年年 电子工业的高纯水试行标准电子工业的高纯水试行标

29、准 。1994 年年 电子机械工业部制定了高纯水电子机械工业部制定了高纯水JB/T7621-1994 行业标准。行业标准。 制药行业参照电子机械工业部行业标准的个别项目。制药行业参照电子机械工业部行业标准的个别项目。2000 版版收载了纯化水和注射用水的标准并规定了使收载了纯化水和注射用水的标准并规定了使 用范围。用范围。2019 版版在纯化水和注射用水项下增加了微生物限度在纯化水和注射用水项下增加了微生物限度 标准和检验方法。标准和检验方法。 以上发展可以看出我国对制药用水的质量规定在不断加强以上发展可以看出我国对制药用水的质量规定在不断加强 , GMP对制药企业制水系统的要求也逐渐加强。对

30、制药企业制水系统的要求也逐渐加强。2019 版版中国药典中国药典39我国现行制药用水微生物质量标准及检验方法我国现行制药用水微生物质量标准及检验方法 纯化水纯化水 标标 准准 微生物限度微生物限度 细菌、霉菌和酵母菌总数每细菌、霉菌和酵母菌总数每1ml不不 得过得过100 个。个。 检验方法检验方法 取本品，采用薄膜过滤法处理后，依法检查。取本品，采用薄膜过滤法处理后，依法检查。 注射用水注射用水 标标 准准 细菌、霉菌和酵母菌总数每细菌、霉菌和酵母菌总数每100ml不得过不得过10个。个。 检验方法检验方法 取本品至少取本品至少200ml，采用薄膜过滤法处理后，采用薄膜过滤法处理后,依依 法

31、检查。法检查。 灭菌注射用水灭菌注射用水 标标 准准 无菌应符合规定。无菌应符合规定。 检验方法检验方法 照照2019版版附录无菌检查法检查。附录无菌检查法检查。40 检验方法总大肠菌群检验意义总大肠菌群检验意义大肠菌群基本上包括了正常人畜肠道内的全部需氧的革兰阴大肠菌群基本上包括了正常人畜肠道内的全部需氧的革兰阴性杆菌，较大肠埃希菌代表范围更广性杆菌，较大肠埃希菌代表范围更广,以大肠菌群为指示菌以大肠菌群为指示菌,质质量控制更为严格。量控制更为严格。41 大肠菌群分类大肠菌群分类生化试验生化试验 大肠埃希菌属大肠埃希菌属 枸橼酸菌属枸橼酸菌属 克雷伯菌属克雷伯菌属 肠杆菌属肠杆菌属 靛基质试

32、验靛基质试验I） + - + - - + - + - - - +甲基红试验甲基红试验M) + + + + + + - - - - - -V P - - - - - - + + + + + +枸橼酸盐利枸橼酸盐利) - - - - + + + + - + + +用试验用试验(CH2S - - - - （+）（）（+） - - - - - -乳糖乳糖44.5） + - - + - - - - - + - -42 大肠菌群检验方法大肠菌群检验方法 我国GBT5749-2019收载的检验方法有三种;多管发酵法、滤膜法 (薄膜过滤法)及酶底物法,检验步骤如下; - 多管发酵法 - 滤膜法(薄膜过滤法) - 酶底物法43耐热大肠菌群检验方法耐热大肠菌群检验方法 是一群不仅能在是一群不仅能在3537 生长生长,在在44.5仍能生长的大肠菌仍能生长的大肠菌群称为耐热大肠菌群群称为耐热大肠菌群,