核苷酸酶的检测和临床意义

1、.l 5-核苷酸酶全称5-核糖核苷酸磷酸水解酶（5-Nucleoticlase, 5-NU或5-NT）。5-核苷酸酶(5-NT)是一种对底物特异性不高的水解酶，可作用于多种核苷酸。主要参与核酸的分解代谢。能特异性的催化核苷5-核苷酸酶和次黄嘌呤核苷酸。.l 5-NT在人体的运动，细胞生长发育，纤维蛋白合成，提高表皮或内皮屏障功能，神经传递及淋巴细胞的再循环及黏附，免疫应答等方面均发挥重要的作用。.l广泛分布在肝、胆、胰、肠、心、脑、肺、肾、垂体、甲状腺、前列腺、睾丸等脏器和组织中，定位在细胞膜上，肝胆系统是血清中5-核苷酸酶的主要来源。在肝内主要存在于胆小管和窦状间隙内。.l5-NT要释放入血

2、必须要经肝胆系统内的高浓度胆汁酸去垢处理.l钼蓝比色法钼蓝比色法 l化学发光法化学发光法 l酶法酶法l偶联速率法偶联速率法.l5-5-核苷酸酶（核苷酸酶（5-NT5-NT）催化）催化5-5-次黄次黄嘌呤核苷酸水解生成次黄苷和氨，次黄嘌呤核苷酸水解生成次黄苷和氨，次黄苷在嘌呤核苷磷酸化酶（苷在嘌呤核苷磷酸化酶（PNPPNP）作用下生）作用下生成次黄嘌呤，次黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶成次黄嘌呤，次黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶（XODXOD）作用下生成尿酸和过氧化氢）作用下生成尿酸和过氧化氢（H2O2H2O2），），H2O2H2O2与与4-4-氨基安替比林（氨基安替比林（4-4-AAAA）和）和TOOSTOOS在

3、过氧化物酶（在过氧化物酶（PODPOD）作用下）作用下生成醌亚氨化合物，通过测定相应波长生成醌亚氨化合物，通过测定相应波长处吸光度变化值得出样本中处吸光度变化值得出样本中5-NT5-NT活性活性。.l1 1细胞培养物：离心后收集上清液，并细胞培养物：离心后收集上清液，并将标本保存于将标本保存于-20-20。2 2血清：室温放置血清：室温放置2 2小时内或小时内或2 - 8 2 - 8 24H24H，1000 x g1000 x g离心离心2020分钟。分钟。3 3血浆：可用血浆：可用EDTAEDTA或肝素作为抗凝剂，或肝素作为抗凝剂，标本采集后标本采集后3030分钟内于分钟内于1000 x g

4、1000 x g离心离心1515分钟。分钟。l4.2 - 8 4.2 - 8 可放置可放置2424小时，小时， -20-20可放可放置一星期，但应避免反复冻融。置一星期，但应避免反复冻融。l标本溶血会影响最后检测结果，因此溶标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。血标本不宜进行此项检测。.l速率法：正常成人血清速率法：正常成人血清5-NT5-NT酶活性为酶活性为：0-11 U/L0-11 U/Ll钼蓝双色法：健康成年人钼蓝双色法：健康成年人5-NT5-NT活性为活性为2-17 U/L2-17 U/L，儿童稍低。，儿童稍低。6060岁以上老人的岁以上老人的均值约为青壮年的均值约

5、为青壮年的2 2倍。倍。 . 5-NT 5-NT活性增高常见于原发性和转移性活性增高常见于原发性和转移性肝癌、胆道癌、胰腺癌、胆道阻塞、胆肝癌、胆道癌、胰腺癌、胆道阻塞、胆管炎、急、慢性肝炎、肝硬化、药物性管炎、急、慢性肝炎、肝硬化、药物性肝损伤。其活性增高可达肝损伤。其活性增高可达2 26 6倍，且与倍，且与病情严重程度呈正相关。病情严重程度呈正相关。 5-NT5-NT是诊断肝肿瘤非常灵敏的酶学指是诊断肝肿瘤非常灵敏的酶学指标。在病变早期，当肝功能、肝扫描和标。在病变早期，当肝功能、肝扫描和有关肝病检查阴性时本酶活性已明显增有关肝病检查阴性时本酶活性已明显增高。对于高。对于AFPAFP阴性病例，其与阴性病例，其与AFPAFP互补诊互补诊断肝癌的阳性率可达断肝癌的阳性率可达9494。ll.l 特异性高，能协助判断碱性磷酸酶（特异性高，能协助判断碱性磷酸酶（ALPALP）增设是肝胆系统疾病，还是骨髓系）增设是肝胆系统疾病，还是骨髓系统疾病（如骨癌、骨肉瘤、骨转移癌、统疾病（如骨癌、骨肉瘤、骨转移癌、佝偻病等）。佝偻病等）。ALPALP在肝胆系统疾病和骨骼在肝胆系统疾病和骨骼系统疾病时均可增高。除系统疾病时均可增高。除5-NT