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1、综合实验二综合实验二 激动素对叶片的保绿效应激动素对叶片的保绿效应及对离体叶片中及对离体叶片中SOD活性的影响活性的影响实验原理实验原理v植物衰老机理假说植物衰老机理假说:基因调控假说、激素平衡基因调控假说、激素平衡假说、氧自在基损伤假说和营养胁迫假说假说、氧自在基损伤假说和营养胁迫假说. v植物体中超氧化物歧化酶植物体中超氧化物歧化酶superoxide dismutase ECl.15.1.1简称简称SOD. 细胞分裂素 延缓叶片的衰老延缓叶片的衰老 SOD等消除了活性氧的毒害作用维持SOD酶活 + H2O2+O2 2H2O2 2H2O+O2 核黄素 复原的核黄素 硝基四唑蓝(NBT) +

2、 甲腙光光氧氧过氧化氢酶过氧化氢酶 SODSOD植物资料植物资料 小麦叶片小麦叶片 实验步骤实验步骤1.1.酶的提取：酶的提取：将处置过的叶片吸干外表水分，分别称取将处置过的叶片吸干外表水分，分别称取0.5g0.5g，置预冷的研钵中，参与置预冷的研钵中，参与5mL5mL预冷的提取介质预冷的提取介质( (分几次参与分几次参与) )，研磨成匀浆，研磨成匀浆，415000415000g g离离心心10min10min，上清液即是酶提取液。将上清液倒，上清液即是酶提取液。将上清液倒入另一试管中，冰浴保管备用。入另一试管中，冰浴保管备用。 2.酶活性测定酶活性测定 3.结果计算和分析 AN60 酶活力=

3、- AOWT0.0150% 酶活力单位U：每h每g鲜重的酶活单位数；一个酶活单位定义为将硝基四唑蓝的复原抑制到对照一半50%时所需的酶量。 vAo：5号试管溶液在号试管溶液在560nm处的吸光度处的吸光度; vA：5号试管溶液在号试管溶液在560nm处的吸光度值与参与酶处的吸光度值与参与酶液的液的 反响液在反响液在560nm处的吸光值的差；处的吸光值的差；vN：提取酶液的总体积：提取酶液的总体积ml；vW：植物资料的鲜重：植物资料的鲜重g；vT：照光时间：照光时间10min；v0.01：参与酶液的体积：参与酶液的体积(ml)；v60：60min要计算要计算1h的酶活力。的酶活力。思索题思索题v实验资料可以用大豆叶片吗实验资料可以用大豆叶片吗?v在细胞衰老过程中细胞构造和代谢上会发生在细胞衰老过程中细胞构造和代谢上会发生哪些变化哪些变化?v激动素延缓衰老的能够机理是什么激动素延缓衰老的能够机理是什

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