枯草芽孢杆菌生产工艺_第1页
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文档简介

1、枯草芽抱杆菌生产工艺-实验室操作1.培养基1.1种子培养基蛋白月东1 %，酵母浸出物0. 5 %，氯化钠1 %，自然pH。1.2基础发酵培养基蔗糖1 %，蛋白月东1 %，磷酸氢二钠0. 2 % ,磷酸二氢钠0. 2 %, pH 7. 0。1.3主要试剂蔗糖、葡萄糖、淀粉、玉米淀粉、麦芽糖、酵母浸出物、胰蛋白月东、牛肉膏、尿 素、氯化铉、硫酸铤、硫酸镁、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、硫酸业铁、氯化钠和 氯化钙。1.4仪器设备控温摇床、高压蒸气灭菌锅、电子天平、pH测定仪、无菌操作台和紫外分光光度计。2.方法2. 1培养方法2. 1. 1菌种活化将保存的菌种转接到斜面培养基，37席养24 h,备用。2.

2、 1.2种子液的制备取一环活化的菌种，接入装量为50 mL种子培养基的250mL三角瓶中,37Q 180 r/min培养18 h。2.1. 3摇瓶培养分别取1 mL种子液， 接入盛有50 mL发酵培养基的200 mL三角瓶中 （接种量 为2% ,V/V）。置摇床中,30密荡培养12 h,转速为160 r/ min3.培养条件3.1碳源以葡萄糖、蔗糖和麦芽糖为碳源时枯草芽抱杆菌的生长明显优于可溶性淀粉 和玉米淀粉。最佳碳源是葡萄糖，其次是蔗糖。3.2氮源氮源为有机氮源时枯草芽抱杆菌的生长明显优于无机氮源。最适氮源是酵母浸出物，从发酵成本考虑，酵母浸出物、胰蛋白月东及氯化铉组成的复合氮源较合4.发

3、酵条件4.1生长曲线接种12 h后细菌数量开始减少，枯草芽抱杆菌进入生长衰亡期。因此，采 用812 h时的菌液作为菌种较合适，此时枯草芽抱杆菌为对数生长末期， 既可 保持高的细胞活力，乂可获得尽可能多的细胞数。4.2初始PH在初始pH 5. 58范围内枯草芽抱杆菌均可良好生长，pH为6. 0时生长最 好，说明枯草芽抱杆菌对pH的适应性较宽，但随pH的增大，活菌数呈下降趋 势。4.3温度枯草芽抱杆菌在2540C均可良好生长，其生长的最适温度为35 C04.4装液量及接种量枯草芽抱杆菌为需养菌，在生长过程中需要大量的氧气，装液量不可过多， 培养液与容器体积比可设定为2:25;接种量3 % (V/ V)较适合其生长。5.干燥方式采用喷雾十燥和低温冷冻十燥。 低温冷冻十燥更利于芽抱的形成， 但其操作

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