实验三血糖测定ppt课件

1、 目的要求目的要求掌握邻甲苯胺法测定血糖的原理和方法掌握邻甲苯胺法测定血糖的原理和方法 血液中所含的葡萄糖，称为血糖。它是糖在体内的血液中所含的葡萄糖，称为血糖。它是糖在体内的运输方式。运输方式。 目前国内医院多采用葡萄糖氧化酶法和邻甲苯胺法目前国内医院多采用葡萄糖氧化酶法和邻甲苯胺法测定血糖。前者特异性强、价廉、方法简单测定血糖。前者特异性强、价廉、方法简单, ,其正常其正常值：空腹全血为值：空腹全血为3.63.65.35.3毫摩尔毫摩尔/ /升升65659595毫克毫克/ /分升，血浆为分升，血浆为3.93.96.16.1毫摩尔毫摩尔/ /升。后者由于血中升。后者由于血中绝大部分非糖物质及

2、抗凝剂中的氧化物同时被沉淀下绝大部分非糖物质及抗凝剂中的氧化物同时被沉淀下来，因此不易出现假性过高或过低来，因此不易出现假性过高或过低, , 结果较可靠结果较可靠, , 其其正常值：空腹全血为正常值：空腹全血为3.33.35.65.6毫摩尔毫摩尔/ /升升6060100100毫克毫克/ /分升，血浆为分升，血浆为3.93.96.46.4毫摩尔毫摩尔/ /升升7070115115毫克毫克/ /分升。分升。 本实验采用邻甲苯胺法测定血糖。其原本实验采用邻甲苯胺法测定血糖。其原理是葡萄糖在酸性介质中加热脱水反响理是葡萄糖在酸性介质中加热脱水反响生成生成5 5羟甲基羟甲基2 2呋喃甲醛，分子中呋喃甲醛

3、，分子中的醛基与邻甲苯胺缩合成青色蓝绿色的醛基与邻甲苯胺缩合成青色蓝绿色的薛夫氏碱，经过比色可以定量。的薛夫氏碱，经过比色可以定量。基基 本本 原原 理理 CH2OH CH2OH CHOHCHOH4 4 CHO CHOHOH2CCHO O+ 3H2OH+HOH2CCHO ONH2CH3+HOH2CCH = ONCH3葡萄糖葡萄糖羟甲基糠醛羟甲基糠醛邻甲苯胺邻甲苯胺Schiff Schiff 碱碱操操 作作 方方 法法1、规范曲线的制造、规范曲线的制造2、血糖浓度测定、血糖浓度测定取枯燥试管取枯燥试管7 7支，编号后，按下表顺序参与试剂支，编号后，按下表顺序参与试剂 管号管号1 12 23 34

4、 45 5测定测定空白空白标准葡萄糖液标准葡萄糖液( (ml)ml) 0.0.25250.0.5 51.01.01.51.52.02.0 血清（血清（mlml） 0.0.0505蒸馏水蒸馏水( (ml)ml)1.751.751.51.51.01.00.0.5 5 1.951.952.02.0邻甲苯胺试剂邻甲苯胺试剂( (ml)ml) 5.05.05.05.05.05.05.05.05.05.05.05.05.05.0 A A630630试剂试剂加毕，混匀，于沸水浴中煮沸加毕，混匀，于沸水浴中煮沸10min10min取下，流水冷却，取下，流水冷却，在在630nm630nm波长下，以空白管调零，测

5、定各管的波长下，以空白管调零，测定各管的A A值，值，并作好记录。并作好记录。规范葡萄糖运用液浓度为：规范葡萄糖运用液浓度为：5.56mmol/L5.56mmol/L 即即1mg/ml1mg/ml结果处置结果处置1、规范曲线的绘制以、规范曲线的绘制以15管绘制规范曲管绘制规范曲线线0.02 0.04 0.06 0.08 0.10 x，ymg0.10.40.30.20.52、计算结果、计算结果1从规范曲线上读取测定管的血糖浓度，从规范曲线上读取测定管的血糖浓度， 并求出并求出1L血清中葡萄糖的含量。血清中葡萄糖的含量。2选取一管光密度与测定管接近的规范管选取一管光密度与测定管接近的规范管 计算计算1L血清中葡萄糖的含量。结果与血清中葡萄糖的含量。结果与 规范曲线上查找的结果进展比较。规范曲线上查找的结果进展比较。邻苯甲胺法测定血糖具有操作简单邻苯甲胺法测定血糖具有操作简单, ,特异性较高特异性较高的优点的优点, , 试剂本钱也较低试剂本钱也较低, ,。但该法普通在浓酸高。但该法普通在浓酸高温条件下发生反响温条件下发生反响, , 因此在