专题实验报告书写案例

1、P3 专 题 设 计方 案 （范本）论文页面设置上边距：2.8cm左边距：2.5cm左装订线：0.5cm右边距：2.5cm下边距：2.5cm页脚：1.5cm页码居中行间距：22磅连 云 港 中 医 药 高 等 职 业 技 术 学 校高职学生专题实验设计（宋体小二号粗） 大黄中有效成分的提取（黑体小初） （黑三号） 系部： 中医药系 （经典楷体小三号加粗） 专业： 中药制药技术 年级： 组号： 执笔： 大黄中有效成分的提取（黑体小初）王小明 ××× ××× ××× ××× &#

2、215;×× ×××（楷体_GB2312小五粗）摘要（黑体小三号）大黄中所含的羟基蒽醌类化合物种类很多，其中较为重要的是五种羟基蒽醌类，根据大黄中的蒽醌苷性质与酸水解成游离蒽醌苷元,易溶于苯、乙醚、氯仿等亲脂性有机溶剂。本次实验采用酸水解乙醚提取的原理，提取总蒽醌类成分，又利用大黄中游离蒽醌的酸性大小不同，采用PH梯度萃取法进行分离，得到大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚与大黄素甲醚。同时乙酸镁或苛性碱的理化、薄层鉴别。（楷体_GB2312小四）关键词 大黄 蒽醌类 酸性 PH梯度萃取法 （楷体_GB2312小四）来源（黑体小三号）（正文宋体小

3、四） （Time New Roman）中药正品大黄为蓼科植物掌叶大黄(北大黄)、唐古特大黄或药用大黄(南大黄)的干燥根及根茎。 原植物形态（宋体小四粗） 多年生草本，高可达2米。根及根状茎粗壮，肥厚，稍木质，外皮暗褐色，断面深黄色，根状茎横切面外围有排列紧密的环星点。茎直立，粗壮，无毛。基生叶和下部叶具粗壮的长叶柄；叶片宽卵形或近圆形，长达35厘米，掌状浅裂至半裂，基部浅心形，裂片呈狭三角形，先端尖锐，两面疏生乳头状小突起和白色短刺毛；茎生叶较小。花序圆锥状，顶生，长1020厘米。花小，淡红紫色，数朵簇生；花被片6，排成2轮；雄蕊9，稍露出花被；小坚果长方状椭圆形，长约10毫米，宽78毫米，具

4、3棱，沿棱生翅，顶端微凹，基部近心形，棕色。花期6月，果期78月。药材外观性状 类圆柱形、圆锥形、卵圆形或不规则块状，长317厘米，直径3一10厘米。除尽外皮者表面黄棕色至红棕色，有的可见类白色网状纹理及星点(异型维管束)散在；未除去外皮者表面棕褐色，有横皱纹及纵沟，顶端有茎叶残基。切开面多凹凸不平。质坚实，有的中心稍松软，不易折断，折断面淡红棕色或黄棕色，颗粒性。根茎横切面髓部较宽，其中可见星点，排列成环或散在；根部横切面则无星点，木质部发达，具放射状纹理，形成层环明显。气清香，昧苦微涩，嚼之黏牙，有沙粒感。功效（黑体小三号）大黄味苦，性寒。泻下导滞，泻火凉血，行瘀破积，清热解毒。主治肠胃实

5、热便秘，积滞腹痛，湿热下痢，黄疸，水肿，牙痛，血热吐衄，目赤咽痛，血瘀经闭，症瘕积聚，跌打损伤，肠痈腹痛，痈疮肿毒，烫火伤。结构与性质（黑体小三号）性质（宋体小四粗）大黄中的主要成分为蒽醌类化合物,含量为35,大部分与葡萄糖结合苷；此外还含鞣质、游离蒽醌主要有大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚。游离羟基蒽醌都为亲脂性成分，难溶于水，易溶于苯、乙醚、氯仿等亲脂性有机溶剂，有升华性，且都有蒽醌的显色反应。结构式（宋体小四粗） R1 R2 大黄酚 -CH3 - H 大黄素甲醚 -CH3 - OCH3 大黄素 -CH3 - OH 芦荟大黄素 - CH2OH - H 大黄酸 - COOH -

6、 H 实验材料（黑体小三号）(一)药材: 大黄100克（中药化学实验室提供） （宋体小四）(二)仪器：中药化学实验室提供设备名称型号规格单位数量厂 家性 能粉碎机C-100台1上海中药机械厂好电子天平YP2001台1上海（宋体五）水浴锅台1上海真空泵台1上海铁架台附铁圈个1烧瓶、万能、十字夹套1烧 杯50、100、300ml各个3江苏泰兴玻璃厂烧 杯500、800 ml各个2江苏泰兴玻璃厂量 筒10、100ml 各个1江苏泰兴玻璃厂球形烧瓶1000 ml个1江苏泰兴玻璃厂分液漏斗500ml球形个1江苏泰兴玻璃厂冷凝管五球40cm个1江苏泰兴玻璃厂抽滤瓶500ml个1江苏泰兴玻璃厂色谱缸12&#

7、215;5×10mm个1江苏泰兴玻璃厂玻璃漏斗9cm个1江苏泰兴玻璃厂玻璃棒30cm江苏泰兴玻璃厂喷 瓶江苏泰兴玻璃厂毛细管自制乳胶管江苏泰兴玻璃厂薄层板5×15cm块3自制(三)试剂：中药化学实验室提供试剂名称级 别单位数量批 号厂 家乙 醚AR×500ml毫升60020030917北京精细化学品公司硫 酸AR×500ml毫升24盐 酸AR×500ml毫升300080130081上海建信化工试剂厂碳酸氢钠AR×500g克1520071008上海中秦化学试剂厂碳酸钠AR×500g克1520000101合肥工大化学试剂厂氢氧化

8、钠AR×500g克1.520060725天津福晨化学试剂厂石油醚AR×500g毫升1020070302天津福晨化学试剂厂乙酸乙酯AR×500ml毫升2020070812天津福晨化学试剂厂无水乙醇AR×500ml毫升3000051008上海建信试剂厂醋酸镁甲醇试剂1%×自配毫升30氢氧化钠试剂10%×自配毫升30提取工艺流程：（黑体小三号）注：（流程图用化学结构式绘制软件做）操作步骤1药材处理：用电子天平称取大于100g后,用粉碎机粉碎20目粗粉,称取粉末100g.，待用。2水解液的配制：(1)20%硫酸水溶液的配制：用量筒量取24ml

9、 99.8%的浓硫酸, 再量取蒸馏水116ml放入烧杯中，将浓硫酸缓缓倒入水中.反复冲洗量筒后得20%硫酸水备用，第一次80毫升，第二次40毫升。3提取溶剂的配制：第一次提取量取400ml乙醚溶剂，第二次量取200ml乙醚溶剂。4水浴加热回流装置提取：准备水浴加热回流装置仪器一套。 水浴锅放在实验台的中间位置加一定量的水。 在1000ml球型烧瓶中加上称取一定量的药材，再加入20%硫酸80毫升使药材湿润，再加入400ml乙醚溶剂。 把球形烧瓶套上水浴锅的盖圈，烧瓶颈用烧瓶夹固定，蝶形镙丝在右边，烧瓶夹尾部用十字夹固定，十字夹开口处向上在左边，十字夹的右边固定在水浴锅支杆上。 在球形冷凝管中间上

10、1-2cm用冷凝管夹轻轻固定，蝶形镙丝在右边，冷凝管夹尾部用十字夹固定，十字夹开口处向上在左边，十字夹的右边固定在水浴锅支杆上。 取一根乳胶管一端口接左边冷凝管下弯口作进水口，另一端接水龙头。取另一根乳胶管一端口接冷凝管上弯口作出水口，另一端用玻璃管插入放入水槽排水，同时把水龙头打开使冷凝管充滿水后关闭待用。 装置一切完毕后，将水浴锅插上电源开始工作。 加热至冷凝管中乙醚溶剂回滴开始计算时间提取1小时，放冷后滤出提取溶剂。 药渣再加入20%硫酸40毫升使药材湿润，再加入200ml乙醚溶剂，重复提取一次。 将二次提取液合并倒入分液漏斗中，去除多余的硫酸水。再水洗二次，每次40-50毫升。 将乙醚

11、提取溶剂倒入球形烧瓶中，用回收溶剂装置浓缩至药材的2倍量（200毫升），得总蒽醌乙醚提取溶剂。5.PH梯度萃取法分离：萃取溶液的配制：A5%碳酸氢钠溶液：用电子天平精密称取15g碳酸氢钠加入300ml蒸馏水，搅拌溶解得5%碳酸氢钠溶液，即可待用。B5%碳酸钠溶液：用电子天平精密称取15g碳酸钠加入300ml蒸馏水，搅拌溶解得5%碳酸钠溶液，即可待用。C0.5%氢氧化钠溶液：用电子天平精密称取1.5g氢氧化钠加入300ml蒸馏水，搅拌溶解得0.5%氢氧化钠溶液，即可待用。PH梯度萃取：A用500毫升的分液漏斗倒入200ml乙醚总蒽醌提取溶剂，加入5%碳酸氢钠30-50ml溶液萃取多次至碱液无红色

12、反应为止。合并碱水萃取液，加盐酸至酸性(PH2-3)，静置、析晶、抽滤得大黄酸粗品(浅黄色沉淀)。干燥，计算得率为0.34g。 B.上述5%碳酸氢钠溶液提取过的乙醚溶剂，再以5%碳酸钠溶液30-50ml溶液萃取多次至碱液无红色反应为止。合并碱水萃取液加盐酸至酸性(PH2-3)，静置、析晶、抽滤得大黄素粗品(深黄色沉淀)。干燥，计算得率为1.90g。C.上述5%碳酸钠溶液提取过的乙醚溶剂，再以0.5%氢氧化钠溶液30-50ml溶液萃取多次至碱液无红色反应为止。合并碱水萃取液加盐酸至酸性(PH2-3)，静置、析晶、抽滤得芦荟大黄素粗品(黄色沉淀)。干燥，计算得率为0.30g。D.将上述碱萃取后的乙

13、醚提取溶剂，用回收装置回收乙醚溶剂得大黄酚、大黄素甲醚混合物0.22g，可以将柱色谱方法分离。产品总得率：大黄中游离蒽醌的总得率是：（大黄酸+大黄素+芦荟大黄素+大黄酚、大黄素甲醚）/大黄总质量=0.34g+1.90g+0.30g+0.22g ×100%=2.76% 100g成分的检识（一）理化检识1.苛性碱反应：取大黄素少许分别放入两个试管中加2mlEtOH溶液溶解，其中一支加10%NaOH试剂12滴，溶液即显紫红色。 结论：含有羟基蒽醌类成分2.醋酸镁反应：取大黄素少许分别放入两个试管加2mlEtOH溶液溶解，其中一支加数滴醋酸镁试剂，溶液即显樱红色络和物。 结论：含有羟基蒽醌类

14、成分（二）薄层色谱检识吸附剂：硅胶CMC板2.5×7cm样 品：自制品1%大黄素醇溶液对照品：标准品1%大黄素醇溶液展示剂：苯：乙酸乙脂 8：2显色剂：自然光下观察在用氨气熏后观察操作步骤：1取一块2.5×7cm硅胶薄层色谱板，在一端1.5cm处用铅笔轻轻划一道起始线,待用。2在起始线根据样品、对照品，二个点可分为三个等分，分别做上不同的标志。3将样品 、对照品分别点样，点样直径控制在3mm内，点样干燥待用。4将色谱缸中配入展示剂5将点样过的薄层色谱板慢慢放入色谱缸中进行展开展开剂蒸汽饱和一定时间。6将饱和过薄层色谱板慢慢放入展开剂中。7待展开剂上行到一定的高度去出，取出在

15、展开剂前沿划一道终止线。8用冷风将色谱吹干，在展开的范围内，氨熏后观察斑点颜色。9计算Rf值 Rf1=3.4/7.3=0.46 Rf2=2.7/7.3=0.37实验分析本次专题实验中存在下列错误与不足，具体如下：（1）在配制稀硫酸时,错误地将浓硫酸加入水中。应先加水后,再缓缓加入浓硫酸。（2）使用乙醚溶剂提取时,未能及时通风；正确操作应将窗户打开,或排风设备，保持通风。（3）在提取完成后，直接关闭水源，缷下装置，存在错误；正确地操作应等乙醚溶剂的烧瓶冷却后，关闭水源，缷下装置。 实验小结从这次专题报告实验中,我们学到了很多,大家互相团结,互相配合,互相帮助,从而完成了这次实验。在整个实验过程中,每一步都要认真、细心。通过这次课题的操作，本小组成员获得的最大收获是，学会了团结合作的精神，锻炼了我们独立思考、分析问题和解决问题的能力，最终独立完成专题报告任务。同时也学会了怎