院感采样方法

1、院感米样方法测采样及检查原则：采样应具有一定数量和代表 性，采样后必须尽快对样品按要求指标进行检 测，送检时间不得6小时，若样品保存在冰箱 内送检时间不24小时。一、空气监测：1、采样时间：消毒处理后，操作前2、采样方法：平板沉降法(1) 布点方法：室内面积 3内2,设内、中、 外对角线3点，两端距墙1米；室内面积30 m 2设东、西、南、北4角及中央5点，其中 东、西、南、北均距墙1米。洁净手术室9个点。(2) 采样方法：将直径为9cm普通营养琼脂平 板在室内各采样点处，采样高度为距地面 0.8-1.5米，采样时将平板盖打开，扣放于平板 旁，暴露5-15-30分钟，盖好立即送检。(3) 注意

2、事项：采样前，关好门、窗，在无人走 动的情况下，静止10min进行采样。表4:洁净手术室静态(空态)时 空气采样方法(沉降法)空气洁净细菌最大平均浓度等 级度级另布点要求手术区周 边手 术周 边区区区100级1000级AAI 0.20.4n1000级10000级 h 0.751.5出10000级100000级 Jh24辅出100000级5(5)质控标准:I类区域（洁净手术室）：细菌总数詔cfu/m3（30 分钟9cm平皿）, 新风机组2d清洁一次，初效 过滤器1-2月更换，中效每周检查3个月更换， 高效每年更换，末端高效每年检查3年更换。回 风口每周清洁一次、每年更换一次。U类区域：细菌总数E

3、lcfu/m3（15min9cm平皿）， 皿类区域：细菌总数«4cfu/m3（5min9cm平皿），二、医务人员手的监测：1、米样时间：在接触病人和从事医疗活动前 进行采样或消毒后立即采样。2、采样面积及方法：放被检人（五指并拢）， 用浸有无菌盐水的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦各2次（双手涂擦面积约60平 方厘米），并随之转动采样棉拭子，剪去操作者 手接触部位，将棉拭子投入 5ml无菌盐水试管 内，立即送检。3、质控标准：工作人员手卫生：细菌总数 < 10cfu/cm2。 外科手卫生：细菌总数 < 5cfu/cm2 。三、物体表面监测1、采样时间：在消毒处理后4

4、小时内进行采样。2、.采样方法：用5cmX5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有无菌盐水的棉拭子1支,在规格板内横竖往返均匀涂擦各 5次，并随 之转棉拭子，连续采样4个，采样面积100cm2 剪去手接触部位后，将棉拭子投入5ml含无菌盐 水试管内，立即送检。门把手等不规则物体表面 用棉拭子直接涂擦采样3结果判定：I、U类区域：细菌总数 < 5cfu/cm2皿类区域细菌：总数 < 10cfu/cm24注意事项：采集样本要有足够的数量且具有代表性，如层 流洁净手术室，选择具有代表性采样地点（如手 术台、治疗车、无影灯把手等）；采样时，棉拭子处于湿润状态，如处于饱和状 态可将多

5、余的采样液在采样管壁上挤压去除。禁 止使用干棉拭子采样。四、消毒液的监测1、常用消毒液有效成分含量测定2、使用中消毒液细菌监测：1ml使用中消毒液+9ml中和剂3、结果判定：使用中的火菌用消毒液、无细菌 生长。使用中皮肤粘膜消毒液 < lOcfumi其他使 用中的消毒液细菌总数 10cfu/m五、压力蒸汽灭菌效果监测方法：压力蒸汽灭菌效果监测是一组综合措施，包括工 艺监测、化学监测、生物监测，各个环节缺一不 可。1、物理监测（又称程序监测）每锅进行，并详细记录，包括灭菌设备故障检查， 灭菌温度（波动+3度内）、压力、时间（最低要 求）等灭菌参数。灭菌物品包装、大小摆放正确 等。2、化学监

6、测法：（1）包内化学指示卡监测：1）化学指示卡（管）监测方法：将既能指示蒸汽温 度，又能指示温度持续时间的化学指示管（卡）放 入大包和难以消毒部位的物品包中央， 经一个灭 菌周期后，取出指示管（卡），根据其颜色及性状 的改变判断是否达到灭菌条件。2）结果判定：检测时，所放置的指示管（卡）性 状或颜色均变至规定的条件，判为灭菌合格；若 其中之一未达到规定的条件，则灭菌过程不合格。（2）包外化学指示胶带监测1）监测方法：将化学指示胶带粘贴于每一待灭 菌物品包外，经一个灭菌周期后，观察其颜色的 改变，以指示是否经过灭菌处理，而不能作为灭 菌效果判定指标。2）结果判定：检测时，所放置的指示管（卡）、胶

7、 带的性状或颜色均变至规定的条件，判为灭菌合 格；若其中之一未达到规定的条件，则灭菌过程 不合格。（3）B-D试验：用于预真空（包括脉动真空） 压力蒸汽灭菌器冷空气排放效果的检测，冷空气 是造成预真空（包括脉动真空）压力蒸汽灭菌失 败的主要因素之一。对预真空和脉动真空压力蒸 汽灭菌，每日进行一次 B-D试验。新安装、移 位后连续三次生物监测、B-D试验。1）检测方法：B-D试验要求做前预热、空载监 测每天一次，将B-D试纸放入标准测试包，中 间包好，水平放入灭菌柜内灭菌车的前底层， 靠 近柜门与排气口底前方（上方）灭菌柜内除测试 包无任何物品。2）结果判定：经134C, 3.54分钟后，取出B

8、-D 测试纸观察颜色变化。若变色均匀一致，说明冷 空气排放效果良好，灭菌器可以使用。（4）化学检测注意事项：监测所用化学指示物 须经卫生部批准，并在有效期内使用。3、生物监测法1）指示菌株：指示菌株为耐热的嗜热脂肪杆菌 芽胞（ATCC 7953 或 SSIK 31 株），在 121 C ±0.5 C条件下，D值为1.3 min1.9min，杀灭 时间（KT 值）< 19min存活时间（ST值）为 > 3.9min（2）检测方法：将压力蒸汽灭菌生物培养指示 剂放于标准测试包（由16条41cm .66cm的全棉 手术巾制成）中，按照国家规范，分别将测试包 放于锅内不同位置，灭

9、菌完毕，取出该生物指示 剂送检。3）结果判定：每个指示剂接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基都不变色，判定为灭菌合格；指示菌 片之一接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基，由紫色变为黄色时，则灭菌过程不合格。4）注意事项：监测所用菌片须经卫生部认可，并在有效期内使用。生物指示物监测应每周1次。4、质控标准：1） 工艺监测应每锅进行。2）化学监测：应每包内放置化学指示卡，包 外贴化学指示胶带，监测合格方可使用。预真空 和脉动真空压力蒸汽锅每日做 BD试验合格后 方可使用。3）生物监测应每周一次，无菌生长。六、紫外线消毒效果的监测1、检测方法：开启紫外线灯5min后，将指示卡 置紫外灯下垂直距离1m处，有图案一面朝

10、上， 照射1min （紫外线照射后，图案正中光敏色块 由乳白色变成不同程度的淡紫色），观察指示卡 色块的颜色，将其与标准色块比较，读出照射强 度。2、结果判定：普通30w直管型紫外线灯，使用 中紫外线灯辐照强度 70卩W/cm2为合格。3、注意事项：1）因指示卡光敏色块会随时间发生变化，放置 时间过久，指示卡会变淡，应及时记录判断结果。2）指示卡应用黑色纸包装，置 4 C冰箱内储存， 以免光敏色块遇日光照射不稳定变色， 而影响监 测结果。3）指示卡应获得卫生部的卫生许可批件，并在 有效期内使用。七、使用中消毒剂与无菌物品保存液监测 用试纸或指示卡检测化学消毒剂含量是近年来 化学消毒剂浓度简易测

11、定方法的新发展，它解决 了医院进行消毒剂使用过程的浓度监测。1、化学监测：（1）G-I型消毒剂浓度试纸：1）适用于过氧乙酸及其他含氯消毒剂和含次 氯酸钠的清洗消毒剂等的监测。2）使用方法：取试纸条于消毒剂溶液中，片 刻取出。半分钟内，在自然光下与标准色块比较， 直接读出溶液所含有效成分浓度值，时间超过 1 分钟，着色逐渐消退。（2）戊二醛浓度测试卡使用办法：从瓶中取出 一条测试卡，并旋紧瓶盖，将指标色块完全浸没 于待测消毒液中，沾下瓶盖上的纸垫，去除多余 的液体，横置于瓶盖上等候 58分钟（不要将 色块面朝下，以免受到污染），观察色块着色变 化，若指示色块变成均匀黄色，表示溶液浓度 2.0%，

12、若色块全部或仍有部分白色，表示溶液 浓度 2.0%;2、生物监测：1） 采样时间：采取更换前使用中的消毒液与无菌器械保存液。2） 采样量及方法：用无菌注射器吸取2毫升被检液。（加入9毫升稀释液中混匀送检。不同 的消毒剂加入相应的中和剂，对于醇类与酚类消 毒液，稀释液用普通营养肉汤即可，对于含氯消 毒液、含碘消毒液、过氧化物消毒液，需在肉汤 中加入中和剂0.1%硫代硫酸钠；对于氯己定（洗 必泰）、季胺盐类消毒液，许在肉汤中加入3%（w/v）吐温80和0.3%卵磷脂；对于醛类消毒 液，需在肉汤中加入0.3%甘氨酸；对于含有表 面活性剂的各种复方消毒液，需在肉汤中加入 3%（w/v）吐温80,以中和

13、被检液的残效作用。）3）注意事项：（1）不同消毒剂使用不同的中和剂中和。（2）采集消毒液样品时应在消毒液内没有物 品或防入物品消毒作用到规定时间之后进行采 样。4）质控标准：（1）、使用中消毒液每季度监测一次，细菌菌落 总数应 100cfu/ml不得检出致病微生物。（2）使用中灭菌剂每月监测一次，应无菌生长。（3）无菌器械保存液必须无菌生长。四、血液透析液监测1、标本米集：透析液的米集应米进入透析器的透析液和离开透析器的透析液2、监测时间：每月对出入透析器的透析液送检。 疑有透析液污染或发生严重感染病时，应增加采 样点，如原水口，反渗水出口，储水罐出口，透 析液配比机，浓缩透析液等。怀疑或确定

14、病人在透析中热源反应和菌血症时， 应随时监测。3、控标准：透析器入口液细菌菌落总数必须< 200cfu/ml出口液细菌菌落总数必须< 200Ocfu/m并不得检出致病微生物。五、内镜的消毒灭菌效果监测1、化学监测：含氯消毒剂、2%戊二醛浓度等应 每日监测，监测方法使用中化学消毒剂监测的化 学监测部分。1、生物监测：采样部位为内镜的内腔面采样方法：用无菌注射器抽取 10毫升含相应中 和剂的缓冲液，从待检内镜活检口注入，用 15 毫升无菌试管从活检口收集，及时送检，2小时 内检测同时做致病菌监测。2、质控标准：（1）消毒剂浓度监测每日定时监测并做好记 录，保证消毒效果。消毒剂使用时间不

15、得超过产 品说明书规定的使用期限。（2）消毒后内镜（如胃镜、肠镜、喉镜、气管 镜、鼻窦镜等）应每季度进行生物学监测并做好 监测记录，其合格标准为细菌总数 20cfu/件, 不得检出致病菌。判断结果：菌落数/镜=2个平皿菌落数平均 值x20（3）灭菌后内镜（如腹腔镜、关节镜、胆道镜、 膀胱镜、胸腔镜、脑室镜等）应每月进行生物学 监测并做好记录。判断结果：合格标准为无菌生长第一部分卫生标准1、各类环境空气、物体表面、医护人员手卫生 标准2.1、 细菌菌落总数允许检出值见表1表1各类环境空气、物体表面、医护人员手细菌 菌落总数卫生标准标准范围物 空体 气 表面cfu/m3cfu/m3cfu/II类层

16、流洁净手术室、层流洁 净病房普通手术室，产房、婴儿 室、早产儿室、普通保护 性隔离室、供应室无菌 区、烧伤病房、重症监护 病房儿科病房、妇产科检查 室、注射室、换药室、治 疗室、供应室、清洁区、 急诊室、化验室、各类普1020050010IV类通病房和房间传染病科及病房1.2致病性微生物不得检出乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及 其他致病性微生物。在可疑污染情况下进行相应 指标的检测。母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿及儿科病 房的物体表面和医护人员手上，不得检出沙门氏 菌。2、医疗用品卫生标准2.1进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、 粘膜的医疗用品必须无菌。2.2接触粘膜的医疗用品细菌菌

17、落总数应w 20cfu/g或100cm2:致病性微 生物不得检出。3、使用中消毒剂与无菌器械保存液卫生标准3.1使用中消毒剂细菌菌落总数应w 100cfu/ml，致病性微生物不 得检出。3.2、无菌器械保存液必须无菌4、污物处理卫生标准污染物品无论是回收再使用的物品， 或是废弃的 物品，必须进行无害化处理。不得检出致病性微 生物。在可疑污染情况下，进行相应指标的检测。第二部分采样方法4、采样及检查原则采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测，送 检时间不得超过6h。若样品保存04°C条件时， 送检时间不得超过24h。5、空气采样方法2.1采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样

18、。2.2采样高度与地面垂直高度 80 150cm2.3布点方法室内面积w 3om，设一条对角线上取3点，既中 心一点、两端各距墙1m处各取一点：室内面积> 30吊，设东、西、南、北、中 5点，其中东、 西、南、北点均距墙1m。百级层流13个点，万 级层流9个点。2.4采样方法用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min、15min、30min 后送检培养。6、物体表面采样方法3.1采样时间选择消毒处理后4h内进行采样。3.2采样面积被采表面v 100cm2，取全部表面：被采表面100cm2，取 100cm23.3采样方法用5X 5cm2的标准灭菌规格板，放在被检物体表 面，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭纸1支,在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉 拭纸，连续采样14个规格板面积，剪去手接 触部分，将棉拭纸放入装10ml采样液的试管中 送检。门把手