第十章液相色谱分析法ppt课件

1、第十章第十章液相色谱分析法液相色谱分析法一、影响分别的要素一、影响分别的要素factors influenced factors influenced separationseparation二、分别类型的选择二、分别类型的选择choice of separation choice of separation typestypes三、液相色谱的运用三、液相色谱的运用application of HPLCapplication of HPLC四、液相制备色谱四、液相制备色谱preparative liquid preparative liquid chromatographychromatogr

2、aphy第四节第四节影响分别的要素与操影响分别的要素与操作条件的选择作条件的选择high performance liquid chromatograph factors influenced separation and choice of operation condition一、影响分别的要素一、影响分别的要素 factors influenced separation factors influenced separation1. 1. 影响分别的要素与提高柱效的途径影响分别的要素与提高柱效的途径 在高效液相色谱中在高效液相色谱中, , 液体的分散系数液体的分散系数仅为气体的万分之一，

3、那么速率方程中的分仅为气体的万分之一，那么速率方程中的分子分散项子分散项B/UB/U较小，可以忽略不计，即：较小，可以忽略不计，即： H = A + C u H = A + C u 故液相色谱故液相色谱H-uH-u曲线与气相色谱的外形不曲线与气相色谱的外形不同，如下图。同，如下图。 液体的黏度比气体大一百倍，密度为气体的一千倍，故降低传质阻力是提高柱效主要途径。 由速率方程，降低固定相粒度可提高柱效。 液相色谱中，不能够经过添加柱温来改善传质。恒温 改动淋洗液组成、极性是改善分别的最直接的要素。 2. 2.流速流速 流速大于0.5 cm/s时, Hu曲线是一段斜率不大的直线。降低流速，柱效提高

4、不是很大。但在实践操作中，流量仍是一个调整分别度和出峰时间的重要可选择参数。 3.固定相及分别柱固定相及分别柱 气相色谱中的固定液原那么上都可以用于液相色谱，气相色谱中的固定液原那么上都可以用于液相色谱，其选用原那么与气相色谱一样。但在高效液相色谱中，分其选用原那么与气相色谱一样。但在高效液相色谱中，分别柱的制备是一项技术要求非常高的任务，普通很少自行别柱的制备是一项技术要求非常高的任务，普通很少自行制备。制备。二、分别类型选择二、分别类型选择 choice of separation types三、三、 HPLC的运用的运用 application of HPLC 1. 环境中有机氯农药残留

5、量分析环境中有机氯农药残留量分析 固定相：薄壳型硅胶固定相：薄壳型硅胶(37 50m) 流动相：正己烷流动相：正己烷 流流 速：速：1.5 mL/min 色谱柱：色谱柱：50cm2.5mm(内径内径) 检测器：差示折光检测器检测器：差示折光检测器 可对水果、蔬菜中的农药残留量进展分析。2. 2. 稠环芳烃的分析稠环芳烃的分析 稠环芳烃多为致癌物质。稠环芳烃多为致癌物质。 固定相：十八烷基硅烷化键合相固定相：十八烷基硅烷化键合相 流动相：流动相：20%甲醇甲醇-水水 100%甲醇甲醇 线性梯度淋洗，线性梯度淋洗，2%/min 流流 速：速：1mL/min 柱柱 温：温：50 C 柱柱 压：压：7

6、0 104 Pa 检测器：紫外检测器检测器：紫外检测器四、制备型液相色谱四、制备型液相色谱 preparative liquid chromatography 获得高纯物质色谱纯的有效方法。获得高纯物质色谱纯的有效方法。 半制备柱内径半制备柱内径8mm，长度，长度15 30cm，一次制备量，一次制备量.1mg；1.1.色谱柱的柱容量柱负荷色谱柱的柱容量柱负荷 对分析柱：不影响柱效时的最大进样量；对分析柱：不影响柱效时的最大进样量； 对制备柱：不影响搜集物纯度时的最大进样对制备柱：不影响搜集物纯度时的最大进样量；量； 超载：进样量超越柱容量。柱效迅速下降，超载：进样量超越柱容量。柱效迅速下降，峰

7、变宽。峰变宽。 超载可提高制备效率，以柱效下降一半或容超载可提高制备效率，以柱效下降一半或容量因子量因子k k降低降低10%10%为宜。为宜。2. 2. 液相制备色谱的方法液相制备色谱的方法搜集组分时，通常有以下情况： 1可获得良好分别，主峰 运用制备柱，超载提高效率； 2两主成分之间的小组分； 超载，分别切分使待分别组分成为主成分富集后，再次分别制备。 3. 3. 制备型液相色谱制备型液相色谱 制备型液相色谱：构造与分析型一样，但泵流量大、进样量大、采用制备柱；柱后馏分搜集器。 制备柱：内径2050mm，柱长50cm。请选择内容请选择内容第一节第一节 高效液相色谱的特点与仪器高效液相色谱的特

8、点与仪器feature and instrument of HPLCfeature and instrument of HPLC第二节第二节 根本原理与主要分别类型根本原理与主要分别类型basic principle and main separating basic principle and main separating typestypes第三节第三节 固定相与流动相固定相与流动相stationary phase and mobile phase stationary phase and mobile phase 第四节第四节 影响分别的要素与操作条件选择影响分别的要素与操作条件选择factors influenced separation and factors influenced separation and choice of operation conditionchoice of operation condition第五节第五节 离子