T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1与胃癌细胞侵袭移行能力的关系

1、T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1与胃癌细胞侵袭移行才能的关系毕业论文 朱金明 余佩武 李翠芳 吴淼【摘要】 目的 检测胃癌细胞中T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(T lymphoma invasion and metastasis inducing factor 1，Tiam5)，且Tiam1表达与胃癌细胞体外侵袭、移行才能呈正相关(r=0.997和1.000)；同时与M0、ML相比，MH胞体伸展，外表突起增多，片状伪足宽厚，丝状伪足细长而密集，异型性明显，且细胞骨架构造较紊乱，斑点状肌动蛋白小体增多。但M0、ML细胞间差异无统计学意义(P0.05)。结论 Tiam1表达程度升高可能促进胃癌细胞侵袭、移行

2、。这或许是通过调整胃癌细胞骨架构造重组，增强其变形、游走才能而实现的。【关键词】 胃癌； T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1； 侵袭； 移行； 形态学Correlation between invasion and migration ability of gastric cancer cells and Tiam 1【Abstract】 Objective To investigate the expression of T lymphoma invasion and metastasis inducing factor 1 (Tiam1) in gastric cancer cells and i

3、ts relationship with the invasion and migration ability of gastric cancer cells, and observe the morphological changes of gastric cancer cells. Methods High adhesive subgroups (MH) and low adhesive subgroups (ML) were separated from MKN45 cell strain (M0) by laminin adhesion method in vitro. The exp

4、ressions of Tiam1 in M0, ML and MH cells were detected by flow cytometry, the invasion and migration ability of M0, ML and MH cells in vitro by Boyden chamber. The correlation between invasion and migration ability of M0, ML, MH cells and expression of Tiam1 in M0, ML, MH cells was analyzed. The mor

5、phological differences among M0, ML and MH cells were observed by hematoxylin eosin stain, cytoskeletal protein stain and scanning electronic microscope. Results The invasion and migration ability and the expression of Tiam1 in MH cells were higher than those in M0 and ML cells (P0.05). Conclusions

6、The high expression level of Tiam1 may promote the invasion and migration of gastric cancer cells through adjusting the cytoskeletal reconstruction and enhancing the deforming and migration ability of gastric cancer cells.【Key words】 Gastric cancer; T lymphoma invasion and metastasis inducing factor

7、 1; Invasion; Migration; Morphology肿瘤细胞的侵袭转移与其运动才能密不可分，而有效迁移行为的达成又来源于细胞内、 外调节因子对细胞骨架动力装置所赋予的驱动力以及细胞骨架成分介导黏附所提供锚定力间的协调运作。T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(T lymphoma invasion and metastasis inducing factor 1，Tiam1)正是作为重要的细胞骨架构造调节因子， 而与肿瘤侵袭转移亲密相关1-3。本实验通过检测Tiam1蛋白在具有不同侵袭、 移行才能胃癌细胞中的表达， 初步讨论了Tiam1表达与胃癌细胞侵袭、移行的关系，并对其细胞形态学构

8、造根底进展了简要分析。1 材料与方法11 主要试剂13 胃癌细胞中Tiam1蛋白检测14 胃癌细胞体外侵袭、移行才能检测15 胃癌细胞形态学观察取对数生长期经胰蛋白酶消化的M0、ML和MH细胞，接种于预置有消毒盖玻片的6孔培养板中，待细胞贴壁生长至玻片面积的60%80%时，取出盖玻片，分别进展HE染色、细胞骨架染色5和扫描电镜观察。16 统计学分析应用SPSS 10.0统计软件，计量资料采用单因素方差分析，均数间差异多重比较的LSD检验，相关分析采用双变量间的Pearson检验。P0.05为差异有统计学意义。2 结果21 Tiam1在M0、ML、MH中的表达情况22 M0、ML、MH体外侵袭、

9、移行才能比较MH细胞跨越Boyden小室滤膜网孔的体外移行才能及穿透包被有Matrigel基质的Boyden小室滤膜网孔的体外侵袭才能均高于M0、ML细胞，差异有统计学意义(P0.05)；但在M0和ML细胞间其体外移行及侵袭才能差异无统计学意义(P0.05)，见表1。表1 胃癌细胞体外侵袭移行才能比较(略)23 Tiam1蛋白表达与胃癌细胞体外侵袭、移行才能的相关性相关分析结果显示，Tiam1蛋白表达强度与胃癌细胞M0、ML和MH的体外移行及体外侵袭才能均呈正相关(相关系数分别为r=0.997和1.000)。24 M0、ML、MH的形态学差异3 讨论5)，但在M0、ML细胞间差异无统计学意义(

10、P0.05)。经流式细胞仪检测发现，Tiam1蛋白在MH细胞中的表达也强于其在M0、ML细胞中的表达(P0.05)，但在M0、ML细胞间差异无统计学意义(P0.05)。进1步的相关分析显示，Tiam1 蛋白表达程度与M0、ML、MH细胞的体外侵袭、移行才能成正相关。上述结果提示，Tiam1表达程度升高可能促进胃癌细胞侵袭、移行。肿瘤细胞中常发生微管解聚、微丝束及其末端的膜黏着斑破坏，应力纤维网架构造紊乱，肌动蛋白聚集、重排，出现大量点状或短树根样的肌动蛋白小体，使胞体刚性降低，顺应性增强，易于在组织中变形、游走，且在高侵袭转移细胞的膜外表突起和伪足较多，更利于其运动与侵袭8-9。本实验中HE染色显示，MH细胞较M0、ML细胞异型性大，形态不规那么更加明显。在扫描电镜下观察可见，MH细胞形体延展性好，胞膜外表突起或皱褶增多，片状伪足宽厚，丝状伪足长且密集。进1步经细胞骨架染色显示，MH细胞骨架构造较M0、ML细胞略显紊乱，肌动蛋白小体增多，使其形体顺应性增强，从而易于在组织中变形和游走。总之，所有这些胃癌细胞形态构造上的差异可能恰好反映了其侵袭、移行等生物学行为的不同。【