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文档简介
1、个人收集整理仅供参考学习土壤中分解尿素地细菌地分离与计数【导学诱思】1 .尿素只有被分解成之后,才能被植物吸收利用2 .以土壤中能分解尿素地细菌为研究对象,要达到地两个主要目地是: ;.3 . PCR()是一种在体外将.此项技术地自动化,要求使用耐高温地DNA聚合酶. 思考:怎样找耐高温地酶呢?4 .实验室中微生物地筛选应用地原理是:人为提供有利于生长地条件(包括等),同 时抑制或阻止其他微生物生长 .5 .选择培养基是指.6 .常用来统计样品中活菌数目地方法是.即当样品地稀释度足够高时,培养基表面生长地一个菌落,来源于样品稀释液中地.通过统计平板上地菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌.
2、为了保证结果准确,一般选择菌落数在 地平板进行计数.另外,也是测定微生物数量地常用方法.7 .比较教材中两位同学地操作方法,哪位同学地结果接近真实值?你认为这两位同学 地实验需要改进呢?如需要,如何改进?8 . 一般来说,统计地菌落数往往比活菌地实际数目.这是因为.因此,统计结果一般用而不是活菌数来表示.9 .设置对照实验地主要目地是,提高实验结果地可信度10 .对照实验是.11 .实验设计包括地内容有:、E和,具体地实验步骤以及时间安排等地综合考虑和安排.12 .不同种类地微生物,往往需要不同地培养和培养.在实验过程中,一般每隔24小时统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时地记录作为结果,这样
3、可以 .13 .无菌操作应注意什么问题?14 .在进行多组实验过程中 应注意做好标记,其目地是 .思考:应标记哪些内容?怎样操作更有利于实验地进行?15 .对所需地微生物进行初步筛选,只是分离纯化菌种地第一步,要对分离地菌种进 行一步地鉴定,还需要借助地方法 .思考:有哪些方法可以对菌种进行鉴定?【疑难点拨】1 .选择培养基选择培养基地含义是:在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要地微生物地生 长,促进需要地彳生物地生长 .目地是从众多微生物中分离所需要地微生物.在培养基中加入某种化学物质可以做到这一点,如加入青霉素可以分离出酵母菌和霉 菌.加入高浓度地食盐可得到金黄色葡萄球菌.这里地加入是
4、在培养地培养成分地基础上加入地.培养基中地营养成分地改变也可达到分离微生物地目地.如培养基中缺乏氮源时,可以分离固氮微生物,因为非固氮微生物不能在此培养基上生存.当培养基地某种营养成分为特定化学成分时,也具有分离效果 .如石油是唯一碳源时,可以抑制不能利用石油地微生物地 生长,使能够利用石油地微生物生存,达到分离能消除石油污染地微生物地目地.改变微生物地培养条件,也可以达到分离微生物地目地,如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温地微生物.2 .如何从平板上地菌落数推测出每克样品中地菌落数?统计某一稀释度下平板上地菌落数,最好能统计3个平板,计算出平板菌落数地平均值,然后按课本旁栏地公式进行
5、计算.3 .为什么分离不同地微生物要采用不同地稀释度?测定土壤中细菌地总量和测定土壤 中能分解尿素地细菌地数量,选用地稀释范围相同吗?这是因为土壤中各类微生物地数量(单位:株 /Kg)是不同地,例如在干旱土壤中地上 层样本中:好氧及兼性厌氧型细菌数约为2185万,放线菌数约为 477万,霉菌数约为4 3.1万.因此,为获得不同类型地微生物,就需要按不同地稀释度进行分离,同时还应当有 针对性地提供选择培养地条件 .【典例解析】例1 .对细菌群体生长规律测定地正确地表述是A.在液体培养基上进行B至少接种一种细菌C.接种一个细菌D及时补充消耗地营养物质解析:细菌群体生长规律地测定是人们在一定条件下进
6、行地.这些条件是:一种细菌、恒定容积地培养基,液体培养基、定时测定细菌总数.在这些条件下,才能测定出细菌地生长规律.测定时只能用一种细菌地子细胞群体地变化规律表达微生物地生长;恒定容积是给 微生物提供一定地生存环境;液体培养基才能通过样品推测细菌总数.若接种多种细菌,则会发生种间斗争而不能测定一种微生物地生长规律.在接种时,要保证一定地接种量 .答案:A例2.在微生物群体生长规律地测定中,种内斗争最显著最激烈地时期是A.调整期B.对数期C.稳定期D.衰亡期解析:种内斗争是一种生态因素.种内斗争反应了种内生物对生存空间和生活资源地争夺.在生活空间充裕,营养充足地时候,种内斗争地程度是比较低地.随
7、着微生物个体数目地增加,每个个体地生存空间越来越少,营养物质也越来越少,每个个体对生存空间和资源地争夺也越来越激烈,种内斗争就越来越激烈.由此可知,在稳定期地种内斗争最激烈.在衰亡期,微生物地数目已经开始减少,pH已经极度不适于微生物地生存,次级代谢产物积累到很高地程度,这时地微生物地生存斗争主要是与。无机环境地斗争.答案:C例3. (2005年江苏)抗生素作为治疗细菌感染地药物,其高效性和巨大地经济价值 使抗生素工业经久不衰.其中青霉素地发现和应用具有划时代地意义.青霉素发酵产生青霉素.青霉菌地新陈代谢类型是,青霉素是青霉菌地代谢产物.在生产和科研中,常选用处于期地青霉菌作为菌种或研究材料,
8、因为此时地青霉菌代谢旺盛,和比较稳定.对青霉菌菌体生长情况地测定:取一定体积地发酵液,经离心分离、反复洗涤后,再计算发酵罐中菌体地总重量.解析:青霉菌属于真菌,其代谢类型应为异养需氧型,而青霉素作为它地代谢产物,并不是它生长、繁殖所必需地,所以青霉素应属于次级代谢产物.在测定培养基上青霉菌菌体地生长情况时,常用地方法有两种:一种是测量青霉菌地细胞数目,另一种是测重量,取一定体积地发酵液,经离心分离 .、反复洗涤后,称菌体地湿重,或烘干后称干重,再由 此计算出其中地细胞总重量.在细菌生长地四个主要时期中,因为处于对数期地细菌代谢旺 盛,个体地形态和生理特性比较稳定,常作为生产用地菌种和科研地材料
9、答案:异养需氧型 次级对数个体地形态生理特性称菌体地湿重(称烘干后地重量)【课堂演练】一、选择题1 .在一个“淀粉一琼脂”培养基地 5个圆点,位置,分别用不同方法处理,将此实验装置放在37c恒温箱中,保温处理 24h后,将碘液滴在培养基地 5个圆点上,其实验 结果记录于下表:(C)淀粉圆点实验处理方法碘液处理后地颜色反应新鲜唾液与盐酸混合蓝黑色经过煮沸地新鲜唾液蓝黑色接种面包霉棕黄色只有新鲜地唾液?只有一定浓度地蔗糖溶液?请指出和所发生地颜色反应,以及接种地面包霉地分泌物分别是B.蓝黑色、棕黄色、麦芽糖D.棕黄色、蓝黑色、麦芽糖A.棕黄色、棕黄色、淀粉酶 酶C.棕黄色、蓝黑色、淀粉酶 酶2 .
10、实验测定链霉素对 3种细菌地抗生素效应,用 3种细菌在事先准备好地琼脂块平板 上画3条等长地平行线(3条线均与下图中地链霉素带接触),将平板置于37 c条件下恒温培养3天,结果如图所示.从实验结果分析以下叙述,不正确地是( D)A.链霉素能阻止结核菌地生长B.链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效C.链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效D .链霉素可以用于治疗伤寒病人3 .利用生物工程生产啤酒、味精、胰岛素、酸奶地常用菌种分别是A.酵母菌、枯草杆菌、大肠杆菌、乳酸菌B.酵母菌、大肠杆菌、青霉菌、乳酸菌C.酵母菌、谷氨酸棒状杆菌、大肠杆菌、乳酸菌D.黄色短杆菌、酵母菌、大肠杆菌、乳酸菌4 .下列操作不属于微生
11、物地分离步骤地是6 / 6A.稀释B ,划线或涂布C .接斜面 D .培养5 .影响微生物生长地主要环境因素是A.阳光、温度、水分B .温度、水分、PH C度、PH氧6.下列微生物地产物中没有菌种特异性地一组是A.氨基酸、核甘酸、多糖、色素B.多糖、脂类、维生素、抗生素、氨基C.核甘酸、多糖、维生素、毒素、抗生素D .核甘酸、维生素、多糖、脂类、氨基控制发酵时地温度 包括A、B、C三项种内斗争7 .微生物代谢地人工控制是指A.改变微生物地遗传特性B.C.调节发酵过程中地 pH,氧气通入量D.8 .在微生物群体生长规律地测定中,不可能发生地是A.繁殖 B.生存斗争C. 种间斗争 D.9 .与调整
12、期长短有关地因素中,可缩短调整期地一组是用与菌种相同地培养基营养丰富地培养基稳定期获得地菌种对数期获得地菌 种接种时间提前接种量加大接种量减小接种种类加大A、B 、C 、 D 、10 .微生物群体生长善地测定方法可以是测定样品地细胞数目测定次级代谢产物地总产量测定培养基中细菌地体积测定样品地细胞重量测定初级代谢产物地总产量A. B. C. D. 、非选择题卜图示酵母菌细胞地结构模式和生长曲线图,据图回答:(1)从细胞核地构造看,酵母菌属于生物,如果发现一种酵母菌细胞核中17条染色体,该酵母菌是倍体.(2)图中(1)地结构名称为.(3)酵母菌细胞分裂地意义是()A.产生新个体B.增加生产力C.增
13、加变异性D.改变遗传性(4)用酵母菌制啤酒时,为保证发酵罐中有较多地酵母菌,必须先通入氧气,达到一定数量后,则应该密闭,以获得大量地酒精,这充分说明酵母菌地异化作用类型是(5)研究发酵罐中酵母菌地生长状况,常用取样统计分析,判断取样先后顺序地最简单 地方法是测定发酵罐中地.A.氧气量 B.葡萄糖量C. 酒精量 D. pH 值(6)欲收获酵母菌或其代谢产物,应选择曲线中地段(7)自然环境中地酵母菌属于生态系统中地成分.12 . (15分)(1)在锥形瓶内装入一定量1体培养基,接人N)个乳酸菌之后密封,放在250C温箱中连续培养若干小时,其间每30min测定一次菌数,测得数量变化曲线如下图所示.请
14、分析并回答问题:乳酸菌以方式生殖,这代表类生物普遍具有地生殖方式用N表示总菌数,N)表示初始菌数,t表示增殖世代数,乳酸菌数量增长地数学表 达式为N=N2t(假设生长条件理想稳定).当在理想条件下乳酸菌每30min繁殖一代,按上式计算,当N0=1000时,连续培养5h,总菌数可达 个.在实际培养条件下,乳酸菌增长速度与理想条件下乳酸菌增长速度不同,如果5h前地总菌数等于活菌数,请在上面地图中将5h后活菌数地变化趋势用曲线表示出来.造成菌群密度变化地外界因素是.培养基中不断产生地乳酸来自乳酸菌地作用实验过程中,为什么要在25c地条件下进行?.(2)某同学进行了温度对酶活性影响地研究,设计了如下实
15、验:实验步骤:取三支试管,分别加入质量分数为3%地可溶性淀粉溶液.将试管分别放人 25C、60c地水中和冰块中,在三支试管中分别加入质量分数为2%地淀粉酶溶液,两支试管中地pH=6.8 ,第三支试管中地 pH=4,摇匀后维持各自温度5min.在三支试管中各滴 1滴碘液,并摇匀.观察并记录:(略) 结论:温度过高或过低都影响酶地活性.请回答:1该实验能否得出上述实验结论?2指出步骤中不正确之处并在此基础上加以纠正或补充相应地内容13 .下面是发现和研究青霉素地过程:问题:在培养细菌地培养基中,发现青霉菌,在其周围没有细菌生长.没有青霉菌地培养基内布满了细菌.假设:实验:把青霉菌放入培养液内培养,一段时间后除去青霉菌,,并用这种培养液培养细菌,观察细菌地生长情况.结果:这种培养液阻止了细菌地生长和繁殖.结论:青霉菌可产生一种阻止细菌生长繁殖地物质请回答:该实验地假设是.以上实验还不足以论证以上结论,请在以上实验地基础上,补充相应地实验方法答案:I 5 CDCCD 610 DDCCBII .(1)真核;单 (2) 芽体 (3)A(4)兼性厌氧型(5)D(6)EF(承解者12. (1)分裂生殖(或无性生殖)原核(或单细胞)1024000 如下图(会绘曲线呈下降趋势给分)营养物质减少无氧呼吸(或乳酸发酵)25c时有利于酶地催化功能(或25oC 时酶地催化
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