《兽医微生物学教学》9.分枝杆菌

1、 第15章 分枝杆菌属 (Mycobacterium) 本属菌均为细长略弯曲的杆菌，因有本属菌均为细长略弯曲的杆菌，因有分枝生长分枝生长的的趋势而得名。主要特点是细胞壁含有大量趋势而得名。主要特点是细胞壁含有大量糖脂糖脂，革兰氏染色不易着色。抗酸性染色成红色，非抗革兰氏染色不易着色。抗酸性染色成红色，非抗酸菌呈蓝色。对人和动物有致病性的主要是酸菌呈蓝色。对人和动物有致病性的主要是结核结核分枝杆菌、牛分枝杆菌分枝杆菌、牛分枝杆菌、禽分枝杆菌和副结核分、禽分枝杆菌和副结核分枝杆菌，引起人畜和禽类慢性传染病。枝杆菌，引起人畜和禽类慢性传染病。整理课件 又称抗酸杆菌又称抗酸杆菌 本菌属种类较多，可分为

2、本菌属种类较多，可分为3组组：结核分枝杆菌结核分枝杆菌(模式种模式种)；非结核分枝杆菌；非结核分枝杆菌；麻风分枝杆菌。麻风分枝杆菌。 结核分枝杆菌结核分枝杆菌（M. tuberculosis ） 形态与染色形态与染色l细长、微弯的杆菌，无芽孢和鞭细长、微弯的杆菌，无芽孢和鞭毛。毛。l革兰氏阳性菌，细胞壁有特殊的革兰氏阳性菌，细胞壁有特殊的糖脂。不易着色，而糖脂。不易着色，而抗酸染色为抗酸染色为红色红色。l糖脂成份有效地刺激哺乳动物的糖脂成份有效地刺激哺乳动物的免疫系统，分枝杆菌因此被制成免疫系统，分枝杆菌因此被制成免疫佐剂免疫佐剂得到普遍应用。得到普遍应用。 整理课件抗酸染色抗酸染色l由于细菌

3、细胞壁中含大量脂质，一般由于细菌细胞壁中含大量脂质，一般不易着色，若经加温或延长染色时间不易着色，若经加温或延长染色时间而着色后又能抵抗强脱色剂盐酸酒精而着色后又能抵抗强脱色剂盐酸酒精的脱色，故又称抗酸杆菌的脱色，故又称抗酸杆菌(acid-fast bacilli)l抗酸染色法抗酸染色法(acid-fast stain) ：以：以5石炭酸复红石炭酸复红加温染色，再用加温染色，再用3盐酸盐酸酒精脱色，然后用酒精脱色，然后用美蓝美蓝复染，则复染，则分枝分枝杆菌呈红色杆菌呈红色(+)，其他细菌和背景物质其他细菌和背景物质为蓝色为蓝色(-)。整理课件培养特性培养特性 专性需氧菌，对营养要求严格专性需氧

4、菌，对营养要求严格挑挑-营养要求较高，必须在含血清、卵黄、马铃薯、甘油营养要求较高，必须在含血清、卵黄、马铃薯、甘油以及含某些无机盐类的特殊培养基（罗氏）上才能生长良好。以及含某些无机盐类的特殊培养基（罗氏）上才能生长良好。懒懒-生长缓慢，生长缓慢，1418h分裂分裂1次，在固体培养基上次，在固体培养基上25w才出现肉眼可见的菌落。才出现肉眼可见的菌落。丑丑-典型菌落为粗糙型，表面干燥呈颗粒状，不透明，乳典型菌落为粗糙型，表面干燥呈颗粒状，不透明，乳白色或淡黄色，如菜花样白色或淡黄色，如菜花样。整理课件l菌落粗糙，呈颗粒、结节或花菜样，乳白色或米黄色。菌落粗糙，呈颗粒、结节或花菜样，乳白色或米

5、黄色。l液体培养基中易形成菌膜浮于液面。液体培养基中易形成菌膜浮于液面。整理课件菌体的化学成分：菌体的化学成分：结核杆菌细胞壁含有脂质、多糖和蛋白质复合物结核杆菌细胞壁含有脂质、多糖和蛋白质复合物（1）脂质：结核杆菌含大量脂质，主要有磷脂、脂肪酸和蜡质，）脂质：结核杆菌含大量脂质，主要有磷脂、脂肪酸和蜡质，三种成分都与蛋白质、多糖形成复合物。三种成分都与蛋白质、多糖形成复合物。（2）蛋白质：结核杆菌含有多种蛋白质成分。）蛋白质：结核杆菌含有多种蛋白质成分。结核菌素结核菌素就是其中就是其中之一。之一。 （3）多糖）多糖运用：弗氏佐剂、结核菌素试验运用：弗氏佐剂、结核菌素试验整理课件致病因子致病因

6、子类脂类脂索状因子（破坏线粒体膜，抑制白细胞游走，索状因子（破坏线粒体膜，抑制白细胞游走， 引起肉芽肿，佐剂）引起肉芽肿，佐剂）磷脂（刺激单核细胞增生磷脂（刺激单核细胞增生 ，形成结核结节），形成结核结节）硫酸脑苷脂（抑制吞噬体与溶酶体结合）硫酸脑苷脂（抑制吞噬体与溶酶体结合）蜡质蜡质D（引起迟发性过敏反应）（引起迟发性过敏反应）蛋白质蛋白质引起迟发性过敏反应引起迟发性过敏反应分枝菌酸（胞内繁殖、抗酸性染色特性）分枝菌酸（胞内繁殖、抗酸性染色特性）整理课件抵抗力抵抗力l四不怕四不怕l干燥干燥l酸（酸（3% HCl3% HCl或或6% H6% H2 2SOSO4 4) ) 或碱或碱（4% NaO

7、H) 4% NaOH) 有抵抗力有抵抗力l碱性染料碱性染料l磺胺类、青霉素等抗生素磺胺类、青霉素等抗生素l四怕四怕l乙醇乙醇l湿热湿热l紫外线紫外线l抗痨药物（链霉素、异烟抗痨药物（链霉素、异烟肼、利福平等）肼、利福平等）整理课件变异性变异性l形态结构变异：形态结构变异：l异烟肼诱导产生结核杆菌的异烟肼诱导产生结核杆菌的L型：胞壁消失，呈型：胞壁消失，呈多型性。多型性。l毒力变异：毒力变异：l卡介苗卡介苗(BCG)：Calmette和和Gurin将将牛分枝杆菌牛分枝杆菌经经13年年230次传代而获得的次传代而获得的减毒活疫苗株减毒活疫苗株l耐药性变异：耐药性变异：l耐异烟肼及其他抗结核药物的结

8、核菌株日益增多耐异烟肼及其他抗结核药物的结核菌株日益增多整理课件致病性致病性致病特点：致病特点：细胞内寄生细胞内寄生和和形成局部病灶形成局部病灶细菌主要通过呼吸道侵入机体细菌主要通过呼吸道侵入机体肺泡肺泡，被巨噬细胞吞，被巨噬细胞吞噬但不被消化降解，并在其内噬但不被消化降解，并在其内繁殖形成病灶繁殖形成病灶，产生，产生干酪样坏死。坏死灶被吞噬细胞、干酪样坏死。坏死灶被吞噬细胞、T细胞和细胞和B细胞等细胞等包围形成包围形成结核结节结核结节。免疫力低下免疫力低下者此局限性病灶可者此局限性病灶可能能破溃破溃，菌体排入支气管，随痰咳出体外；或病灶，菌体排入支气管，随痰咳出体外；或病灶液化液化，扩散扩散

9、进入血流及其他器官，造成机体死亡。进入血流及其他器官，造成机体死亡。对于免疫正常者，局限性病灶在活化的巨噬细胞作对于免疫正常者，局限性病灶在活化的巨噬细胞作用下其内细菌停止生长，用下其内细菌停止生长，病灶钙化病灶钙化而痊愈。而痊愈。人感染个体中人感染个体中90%以上表现为潜伏性感染，不到以上表现为潜伏性感染，不到10%发展为发展为活动性结核病。活动性结核病。整理课件整理课件 结核病的的疫情与现状WHO2009WHO2009年全球结核病控制报告显示，全球现有结年全球结核病控制报告显示，全球现有结核病患者核病患者13701370万万，每年发病人数为，每年发病人数为927927万，每年死万，每年死亡

10、人数亡人数177177万。结核病仍为单一病原菌引起疾病死万。结核病仍为单一病原菌引起疾病死因的第一位。因的第一位。目前全球有目前全球有1/31/3人口人口即即1717亿人感染了结核病亿人感染了结核病, ,每每1 1秒秒钟就有钟就有1 1人受感染。人受感染。发病人数占前五位的国家分别为印度、中国、印度发病人数占前五位的国家分别为印度、中国、印度尼西亚、尼日利亚、南非。尼西亚、尼日利亚、南非。整理课件l中国形势（七中国形势（七“多多”）l感染人数多：全国结核分枝杆菌感染率感染人数多：全国结核分枝杆菌感染率44.5%,受结核菌感染人数约受结核菌感染人数约5.5亿，明显高出全球平均感染水平。亿，明显高

11、出全球平均感染水平。l患病人数多：全国活动性肺结核、传染性肺结核患病率分别为患病人数多：全国活动性肺结核、传染性肺结核患病率分别为367/10万万和和122/10万，有活动性肺结核患者约万，有活动性肺结核患者约450万，其中传染性肺结核患者约万，其中传染性肺结核患者约150万。万。l新发患者多：全国每年新发生活动性肺结核患者约新发患者多：全国每年新发生活动性肺结核患者约145万，其中传染性万，其中传染性肺结核患者约肺结核患者约65万。万。l死亡人数多：全国每年约有死亡人数多：全国每年约有13万人死于结核病。万人死于结核病。l青壮年患病和死亡多：活动性和涂阳患者分别占病人总数的青壮年患病和死亡多

12、：活动性和涂阳患者分别占病人总数的53%和和61.6%，占结核病死亡总人数的，占结核病死亡总人数的48%。l农村患者多：全国约农村患者多：全国约80%的结核病患者在农村，而且主要在经济不发达的结核病患者在农村，而且主要在经济不发达的中西部地区。的中西部地区。l耐药患者多：全国结核病耐药率高达耐药患者多：全国结核病耐药率高达28%。 结核病的的疫情与现状结核病的的疫情与现状整理课件艾滋病毒和结核艾滋病毒和结核艾滋病毒和结核并存是致命的，各自会加速对方艾滋病毒和结核并存是致命的，各自会加速对方的发展。的发展。耐药结核耐药结核现在，在调查的每一个国家中都记载了对单一药物具有耐现在，在调查的每一个国家

13、中都记载了对单一药物具有耐药性的菌株；甚至已出现了对所有主要的抗结核药物具有药性的菌株；甚至已出现了对所有主要的抗结核药物具有耐药性的结核菌株。耐药结核是由于不能坚持治疗或只做耐药性的结核菌株。耐药结核是由于不能坚持治疗或只做部分治疗引起的。部分治疗引起的。整理课件免疫性免疫性 1. 1.带菌免疫（传染性免疫）带菌免疫（传染性免疫）: :细菌在机体消失或死亡后，细菌在机体消失或死亡后，其免疫也终止。其免疫也终止。 2.2.细胞免疫（细胞免疫（主要作用主要作用）与体液免疫分离）与体液免疫分离: :细胞免疫随细胞免疫随病情加重而减弱，体液免疫则相反。病情加重而减弱，体液免疫则相反。 3. 3. 机

14、体免疫（核蛋白体机体免疫（核蛋白体RNARNA）与迟发性变态反应）与迟发性变态反应( (结核菌结核菌素素) )：不同不同T T细胞介导。细胞介导。整理课件结核菌素试验（结核菌素试验（tuberculin testtuberculin test） 结核菌素（结核菌素（OTOT或或PPDPPD）注入皮内后如受试者已感染结核，则结核）注入皮内后如受试者已感染结核，则结核菌素与致敏淋巴细胞特异性结合，在局部释放淋巴因子，形成迟发菌素与致敏淋巴细胞特异性结合，在局部释放淋巴因子，形成迟发型超敏反应性炎症，若受试者未感染过结核则无反应。型超敏反应性炎症，若受试者未感染过结核则无反应。2.2.方法方法 牛颈

15、部皮内注射牛颈部皮内注射0.1 ml（1万万IU）,72小时后观察局部炎症反应小时后观察局部炎症反应 （1 1）阳性）阳性 皮肿胀厚度差皮肿胀厚度差4mm （2 2）疑似）疑似 皮肿胀厚度差皮肿胀厚度差2-4 mm；30d30d后复检后复检 （3 3）阴性）阴性 皮肿胀厚度差小于皮肿胀厚度差小于2mm。 （1 1）选择）选择BCGBCG接种对象及测定接种效果，结核菌素反应阴性者应接种接种对象及测定接种效果，结核菌素反应阴性者应接种BCGBCG；（2 2）结核菌素试验对幼畜可做诊断结核病之用；（）结核菌素试验对幼畜可做诊断结核病之用；（3 3）可在未接种）可在未接种BCGBCG的动物中的动物中作

16、结核分枝杆菌感染的流行病学调查。作结核分枝杆菌感染的流行病学调查。 5. 缺点缺点: 无法证明目前是否为活动性感染无法证明目前是否为活动性感染整理课件整理课件细菌的分离培养鉴定：细菌的分离培养鉴定： ：抗酸染色红色抗酸染色红色.分离培养分离培养 ：强酸或强碱处理后接种罗杰二氏培养基：强酸或强碱处理后接种罗杰二氏培养基 .细菌鉴定：培养特性、生化特性细菌鉴定：培养特性、生化特性动物接种动物接种用于细菌的分离和毒力测定。常用的动物为豚鼠和兔。用于细菌的分离和毒力测定。常用的动物为豚鼠和兔。免疫学诊断免疫学诊断1.1.结核菌素试验；结核菌素试验；2.2.检测抗体，阳性意味着病情恶化。检测抗体，阳性意

17、味着病情恶化。 检测抗检测抗PPDPPD的的IgGIgG，肺结核病人的阳性率为，肺结核病人的阳性率为80-9080-90。PCR 运用于分离菌株及结核病人的临床样本（痰液）的检测。运用于分离菌株及结核病人的临床样本（痰液）的检测。整理课件预防接种预防接种 卡介苗（卡介苗（BCGBCG）接种，免疫期：）接种，免疫期：4-54-5年。对动物一般不接种疫苗。年。对动物一般不接种疫苗。治疗治疗 第一线抗结核药物包括异烟肼、利福平、利福定、乙胺丁第一线抗结核药物包括异烟肼、利福平、利福定、乙胺丁醇醇 和链霉素。和链霉素。 第二线抗结核药物有对氨水杨酸、吡嗪酰胺、乙硫异烟胺第二线抗结核药物有对氨水杨酸、吡

18、嗪酰胺、乙硫异烟胺和环丝氨酸等。和环丝氨酸等。 结核分枝杆菌耐药株的增多使结核病成为人类健康的一个新结核分枝杆菌耐药株的增多使结核病成为人类健康的一个新的严峻事实，对动物不提倡用药物治疗，定期监测及淘汰。的严峻事实，对动物不提倡用药物治疗，定期监测及淘汰。 整理课件麻风分枝杆菌麻风分枝杆菌 ( (Mycobacterium. .leprae) ) 俗称麻风杆菌，引起麻风，俗称麻风杆菌，引起麻风， 是一种慢性传染病是一种慢性传染病 流行广泛，主要分布在亚、非和拉丁美洲流行广泛，主要分布在亚、非和拉丁美洲整理课件生物学性状生物学性状l形态、染色与结核分枝形态、染色与结核分枝杆菌相似杆菌相似l麻风分

19、枝杆菌是一种典麻风分枝杆菌是一种典型型胞内菌胞内菌l麻风细胞麻风细胞l体外人工培养至今仍未体外人工培养至今仍未成功成功犰犰 狳狳整理课件致病性与免疫性致病性与免疫性l传播方式传播方式l呼吸道呼吸道l也可通过接触传染也可通过接触传染l发病慢发病慢, 病程长病程长l麻风的免疫主要是靠细胞免疫麻风的免疫主要是靠细胞免疫l细菌主要侵犯神经、皮肤细菌主要侵犯神经、皮肤整理课件整理课件第第16章章 螺旋体（螺旋体（SpirochaetaSpirochaeta） 螺旋体是一类菌体细长、柔软、弯曲呈螺旋状、能螺旋体是一类菌体细长、柔软、弯曲呈螺旋状、能活泼活泼运动运动的的原核单细胞原核单细胞微生物。它的基本结

20、构与细菌类似，有微生物。它的基本结构与细菌类似，有细胞壁细胞壁、核质，以二分裂繁殖，广义上属于细菌。、核质，以二分裂繁殖，广义上属于细菌。 整理课件l螺旋体广泛存在于水生环境，也有许多分布螺旋体广泛存在于水生环境，也有许多分布在人和动物体内。大部分营自由的腐生或共在人和动物体内。大部分营自由的腐生或共生生活，无致病性，只有少部分可致人和动生生活，无致病性，只有少部分可致人和动物的疾病。物的疾病。 整理课件 （一）主要生物学特性（一）主要生物学特性1.1.形态：形态：螺旋状或波浪状圆柱形，具有多个螺旋。螺旋状或波浪状圆柱形，具有多个螺旋。 2.2.结构：结构：原生质柱原生质柱 、轴鞭毛（轴丝）、

21、轴鞭毛（轴丝） 、外鞘。、外鞘。 整理课件3.3.运动性：运动性：运动活跃。运动活跃。4.4.繁殖方式：繁殖方式：以二分裂法繁殖。以二分裂法繁殖。 5.5.染色：染色：革兰氏阴性，但大多数不易着色，常用姬姆萨革兰氏阴性，但大多数不易着色，常用姬姆萨染色。以相差显微镜或暗视野显微镜观察。染色。以相差显微镜或暗视野显微镜观察。 6.6.培养特性：培养特性：多数需厌氧培养，营养要求较高，多数需厌氧培养，营养要求较高， 有些不能用人工培养基培养。有些不能用人工培养基培养。 整理课件（二）分类（二）分类：螺旋体目螺旋体目（螺旋体科与钩端螺旋体科）（螺旋体科与钩端螺旋体科）与兽医有关的属有：与兽医有关的属

22、有：l疏螺旋体属疏螺旋体属(Borrelia) 3-103-10个稀疏而不规则的螺旋，呈波状。个稀疏而不规则的螺旋，呈波状。l密螺旋体属密螺旋体属(Treponema) 有细密而规则的螺旋，数目较多，两端尖有细密而规则的螺旋，数目较多，两端尖l蛇形螺旋体属蛇形螺旋体属(Serpulina) 猪痢疾蛇形螺旋体猪痢疾蛇形螺旋体()()l钩端螺旋体属钩端螺旋体属(Leptospira) 螺旋较密螺旋体更细密而规则，一端或两端弯曲螺旋较密螺旋体更细密而规则，一端或两端弯曲成钩状，故名。成钩状，故名。整理课件螺旋体科各属的特征及致病性螺旋体科各属的特征及致病性 属属 别别 一般特征一般特征 G+C%致病

23、性致病性 螺旋体属螺旋体属 自由生活，螺旋规则，自由生活，螺旋规则，2根轴根轴丝，厌氧丝，厌氧 56-67无无 脊螺旋体脊螺旋体属属 寄生于软体动物的消化管内，寄生于软体动物的消化管内，210圈疏松的螺旋体，圈疏松的螺旋体，有椭圆形的细胞内含物，有椭圆形的细胞内含物，有有100根以上的轴丝。根以上的轴丝。 无无 疏螺旋体疏螺旋体属属 粗大而不规则的螺旋，有粗大而不规则的螺旋，有1520根轴丝，厌氧。根轴丝，厌氧。 46引起禽类、牛和马引起禽类、牛和马的疏螺旋体病的疏螺旋体病 密螺旋体密螺旋体属属 较密而规则的螺旋，较密而规则的螺旋，37根轴根轴丝，厌氧丝，厌氧 38-41引起兔和猪等的螺引起兔和猪等的螺旋体病，旋体病， 人的梅毒和雅人的梅毒和雅司病等司病等 细螺旋体细螺旋体属属 密而规则的螺旋，末端弯曲或密而规则的螺旋，末端弯曲或有钩，有钩，12根轴丝，需氧。根轴丝，需氧。 35-39多种动物及人的细多种动物及人的细螺旋体病螺旋体病 整理课件 伯氏疏螺旋体（伯氏疏螺旋体（B. burgdorferiB. burgdorferi） 引起莱姆病（引起莱姆病（Lyme diseaseLyme disease）的病原体。莱姆）的病原体。莱姆病最早于病最早于19751