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文档简介

RACE 引物设计技巧很多同学做RACE 时经常扩增不到特异性目的条带,很有可能是引物设计有问题,RACE引物设计技巧 ,本人进行过大量 RACE 实验,90%以上可以成功 ,如下是使用 Primer Premier5 进行 RACE 引物设计的方法流程:1.将序列导入Primer Premier52.使用 Search 模式,下一步修改必要参数RACE 引物设计技巧3.设置基本参数如下4.引物长度设置5.选择人工设置参数RACE 引物设计技巧6.具体参数RACE 引物设计技巧7.运行程序,查询引物5RACE3RACE最后先点 Tm 再点 Rating ,前面得分高的一般就没问题了程序前两步按标准程序走,最后一步就按自己的引物的Tm走就行了RACE 引物设计技巧一般选预计长度200 以上的,跑胶比较好看退火温度就是按这个软件的减 5 就差不多了, 有时候增加特异性就按他的数据也行, 做不出来就减一下温度,向第一个一般63 度就没问题RACE 引物设计技巧, 本人进行过大量 RACE 实验, 90% 以上可以成功, 一般一个基因进行 RACE PCR 时,至少要设计两对引物,同时进行试验

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