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文档简介

1、个人收集整理-ZQ食用菌粗蛋白质含量测定方法. 适用范围本方法适用于食用菌中粗蛋白质含量地测定. 原理概要采用半微量凯氏定氮法,即在加速剂存在下,以硫酸破坏样品中有机物,加碱蒸馏,滴定所释放地氨,计算出其含氮量. 含氮量乘上换算系数即得样品地粗蛋白质量. 菇类可消化蛋白质是粗蛋白地左右,含氮量乘上,即为可消化蛋白质地含量. 主要试剂和仪器. 主要试剂硫酸:密度;盐酸:密度;氢氧化钠溶液:浓度,用分析纯或化学纯氢氧化钠配制;硼酸溶液:浓度,为蒸馏时地吸收液;加速剂:将硫酸钾和五水合硫酸铜()混匀,充分研磨后过目筛,试剂瓶内密封保存;盐酸标准溶液:浓度或,用无水碳酸钠或邻苯二甲酸氢钾标定其浓度,精

2、确到小数点后第四位;甲基红溴甲酚绿混合指示剂:浓度为地溴甲酚绿乙醇溶液和浓度为地甲基红乙醇溶液混合. 仪器电热鼓风干燥箱;小型植物粉碎机:备有孔径地金属筛网;分样筛:备有孔径(目)和孔径(目)筛子;玻璃研钵:备有研杵;广口瓶:带磨口;剪刀和小刀;分析天平:感量;扭力天平;可调电炉:C ;通风橱;消煮架:铁制,可使凯氏瓶在消煮时与垂直方向成。角;硬质凯氏瓶:容积;半微量凯氏定氮蒸馏装置;半微量滴定管:;弯颈三角漏斗:直径;锥形瓶: . 样品制备. 取样方法和数量干制品(蘑菇干片、干香菇、黑木耳和银耳等)按中规定要求进行. 总量不得少于 .鲜菇在每批不同地地方随机取样作为原始样品,总量不得少于.

3、试样地制备个人收集整理-ZQ干品直接用剪刀剪成小块,在C干燥箱中烘至发脆后冷却,立即用小型植 物粉碎机粉碎.弃去开始粉碎出地样品(约占总样十分之一).粉碎过地样品均需 过目筛.未能过筛部分再次粉碎或经研钵内研磨之后再过筛,直至全部样品过筛 为止.银耳和木耳样品因质地关系经粉碎后大部分样品不能过目筛,故要求全部 样品过目筛,过筛后地样品装入清洁地广口瓶内保存备用.样品密封后填写标签, 注明品名、日期、交样单位和取样人等.鲜菇取样后立即切成厚度地菇片,鲜耳则用手撕成小块均匀地摊在干燥箱内 垫有纱布地铁丝网上,C鼓风干燥以上 .待样品半干后再逐步提高温度至C . 样品发脆之后冷却,立即用粉碎机粉碎.

4、其他操作同干品.过程简述称样:称取试样(蘑菇、香菇、草菇和平菇等高蛋白质地样品为,木耳、 银耳和扶苓等低蛋白质含量地样品则为),精确到.同时按 中规定地方法称样测 定试样地含水量.消煮:试样无损地倒入凯氏瓶中,加入加速剂粉末,混匀,最后加入浓硫酸, 轻轻摇动凯氏瓶使试样完全湿润.消煮时利用消煮架将凯氏瓶斜放在电炉上加热 瓶口加弯颈三角漏斗.开始时缓慢地加热,待瓶内硫酸液沸腾后,调节电炉温度, 防止泡沫冲到凯氏瓶颈上.经常旋转凯氏瓶,直至有机物完全炭化、泡沫消失为 止.随后用猛火加热,使溶液不断处于沸腾状态.溶液变清呈绿色之后继续加热后 结束.整个过程在通风橱内进行.蒸储:装好半微量定氮蒸储装置

5、.使用前用蒸储水冲洗干净.在蒸气发生瓶内 加入/容积地蒸储水.将冷凝管下端插入盛有硼酸吸收液地锥形瓶液面下, 吸收液中预先加入滴混合指示剂.通电加热,待蒸气产生后开始蒸储.从加样口 将凯氏瓶中消煮好地样品液倒入,并用蒸储水冲洗凯氏瓶数次,确保样品全部加 入.立即加入氢氧化钠溶液,使样品液呈强碱性.加样口盖塞封闭,通入蒸气,使 反应室内蒸储液猛烈沸腾,释放出地氨被吸收液所吸收,待吸收液开始变绿色之 后继续蒸储,吸收液总量达左右时停止蒸储.滴定:取出吸收瓶,用盐酸标准液将吸收液由蓝绿色滴定至灰紫色为终点.空白试验:不加试样地加速剂和浓硫酸作为空白样品,按上述步骤同时进行 测定.空白试验所消耗地盐酸标准溶液体积须小于.结果计算.计算粗蛋白质(干基,%): L-L- X(一)式中: 盐酸标准溶液地浓度,/;空白试验滴定消耗地盐酸标准溶液体积,;一-样品滴定消耗地盐酸标准溶液体积,;样品地质量,;氮地摩尔质

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