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文档简介

1、菌落总数测试片验证一一国标法1样品的前处理：（建议使用蔬菜瓜果、自来水及标准细菌作为样品）（1）蔬菜瓜果：称取25g样品切成lcm左右的碎片，置盛有225mL磷酸盐缓 冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000r/min-1 OOOOr/min均质lmin2min制成 1:10的样品匀液。（2）自来水：以无菌直接吸吸取ImL自来水进行检测。（3）标准细菌：挑取平板上标准细菌的单菌落，于盛有5mLLB液体培养基的 试管中，37°C培养过夜，以此作为菌原液。用ImL无菌吸管或微量移液器吸ImL 菌原液于盛有9mL的稀释液的无菌试管中，制成1:10的样品匀液。2. 样本稀释倍数：用ImL无菌吸

2、管或微量移液器吸取1:10样品匀液ImL,沿管壁缓慢注于盛有 9mL的稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸管尖端不要触及稀释液面），振荡 试管或换用一只无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1:100的样品匀液。按此 操作程序，制备10倍系列稀释样品匀液，每递增稀释液必要时用lmol/L氢氧化 钠（NaOH）或 1 mol/L 盐酸（HC1）调节 pH 至 7.07.2。（1）蔬菜样品的稀释倍数：取10°、IO"两个稀释度进行接种验证。（2）河水样品的稀释倍数：取10"、10-2两个稀释度进行接种验证。（3）大肠菌群标准菌的稀释倍数：取IOS IO*两个进行接种验证。（4

3、）自来水的稀释倍数：直接取自来水接种进行验证。3. 接种：3选取12个适宜的连续稀释度，每个稀释度接种2个无菌平皿，每皿ImLo 同时取ImL生理盐水加入无菌平皿作空白对照。3.2及时将15mL20mL冷却至46°C的平板汁数琼脂培养基倾注平皿，并转动平 皿使其混合均与。3.3琼脂凝固后，将平板翻转，置于36°C±1°C培养48h左右。4. 计数：选取菌落数在30CFU300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数，低 于30CFU的平板记录具体菌落数，大于300CFU的可记录为多不可计。每个稀 释度的菌落数应采用两个平板的平均数。注：平板琼脂计数培养基胰蛋白丿冻 酵母浸有 葡萄糖 琼脂蒸懈水成分:5.0g2.5gl.Og15.0glOOOmLpH7O7.2制法：将

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