RP_HPLC法测定人血浆中盐酸多柔比星的浓度

1、598China Pharmac y 2008Vol 119No 18中国药房2008年第19卷第8期*硕士研究生。研究方向:临床药学。电话:0830-*。E -mail :liuer 2161631com#通讯作者:主任药师,硕士研究生导师。研究方向:临床药学。电话:0830-*。E -mail :y e y un 8622 R P -HPL C 法测定人血浆中盐酸多柔比星的浓度刘一*,边原,叶云#(泸州医学院附属医院药剂科,泸州市646000中图分类号R 96911文献标识码A 文章编号1001-0408(200808-0598-03摘要目的:建立反相高效液相色谱法测定人血浆中盐酸多柔比星

2、浓度的方法。方法:色谱柱为Tianhe Kromasil C 18,流动相为甲醇-0101mol L -1磷酸二氢铵溶液-冰醋酸(3020011,检测波长为233nm ,流速为110mL min -1,进样量为20L ,柱温为35,内标为柔红霉素。结果:盐酸多柔比星血药浓度在012520116g mL -1范围内与峰面积呈良好的线性关系(r =019996;平均方法回收率为96145%(RS D =2116%。结论:本方法简便可行、重现性好,结果准确可靠,可用于临床患者血药浓度监测。关键词反相高效液相色谱法;盐酸多柔比星;血药浓度Determination of Doxorubicin H y

3、 drochloride Concentration in Human Plasma b y RP -HPLCL IU Yi ,B IAN Yuan ,YE Yun (De p 1of Pharmac y ,The Affiliated Hos p ital of L uzhou Medical Colle g e ,L uzhou 646000,China ABSTRACT OBJ EC T IV E :To establish an RP-HPL C met hod for t he determination of doxorubicin h y drochloride concent

4、rationin human p lasma.M E THODS :Tianhe Kromasil C 18was used as column ,A solution of met henol -0101mol L -1ammonium di 2h y dro g en p hos p hate-acetic acid (30¬20¬011was used as t he mobile p hase at a flow rate of 110mL min -11The detection of wavelen g t h was set at 233nm 1The sam

5、 p le size was 20L and t he column tem p erat ure was 351The internal standard was daunorubicin 1R ESUL TS :The calibration curve was linear in t he ran g e f rom 012520116g mL -1(r =019996;t he avera g e met hodolo g ical recover y was 96145%(RS D =2116%1CONCL U SION S :The met hod is ra p id ,accu

6、rate ,re p roducible and eas y to use in clinical detection of blood concent ration 1KEY WO RDS R P-HPL C ;Doxorubicin h y drochlorid ;Blood concent ration盐酸多柔比星(Doxorubicin h y drochloride 是蒽环类抗生素,在临床治疗的药物浓度时,主要通过药物插入脱氧核糖核酸(DNA 引发拓扑异构酶裂解DNA ,从而破坏DNA 三级结构。作为细胞周期非特异性药物,细胞毒作用可发生于各期细胞,但S 期细胞对其最敏感。盐酸多柔比

7、星广泛用于治疗各种癌症,包括乳腺癌、卵巢癌、膀胱癌、甲状腺癌和非小细胞性肺癌等,可引起恶心、呕吐、脱发、高热、静脉炎以及骨髓抑制等不良反应1。笔者采用反相高效液相色谱(RP -HPL C 法测3讨论目前,国内报道盐酸西替利嗪的体内分析方法主要为HPL C 法1。本试验采用L C -MS 法测定人血浆中盐酸西替利嗪的浓度,定量下限仅为2150g L -1,比文献结果要低2。本试验采用乙酸乙酯-二氯甲烷作为提取溶剂,其中二氯甲烷可减小乙酸乙酯在水相的溶解度,使提取率明显提高。西替利嗪是一种具有羧基的弱碱性药物,本试验考察了在p H510和p H 610枸橼酸盐缓冲液中血浆样品的提取回收率,p H

8、510时约50%,p H 610时约80%以上,故本试验采用p H 610枸橼酸盐缓冲液处理血浆样品,保证较高的提取回收率。文献报道的有关试验中,使用的内标包括氯雷他啶3、普罗帕酮4、地西泮5。作者在摸索试验条件的过程中分别用地西泮、氯雷他啶、普罗帕酮和替米沙坦作内标。在内标峰的峰形、重现性、回收率、稳定性以及与西替利嗪的分离度等方面,替米沙坦均优于地西泮、氯雷他啶及普罗帕酮。参考文献1刘晓琰,孙黎,费艳秋,等1国产盐酸西替利嗪片的药代动力学研究J 1中国药房,2002,13(7:41512朱余兵,邹建军,钱薇1健康受试者口服西嗪伪麻缓释片后西替利嗪的药动学J 1中国新药与临床杂志,2006,

9、25(2:8413史爱欣,孙春华,李可欣1盐酸西替利嗪胶囊的人体生物利用度研究J 1中国临床药理学杂志,1999,15(5:35714孙黎,刘晓琰,费艳秋1国产与进口西替利嗪的生物利用度测定J 1医药导报,2003,22(1:1515Macek J ,Ptacek P ,Klima J 1Determination of cetirizine in human p lasma b y hi g h -p erformance li q uid chro 2mato g ra p h y J 1Ch rom ato g r B ,1999,736(2:231(收稿日期:2007-04-16修回日

10、期:2007-08-17 中国药房2008年第19卷第8期China Pharmac y 2008Vol 119No 18599定人血浆中盐酸多柔比星的血药浓度,方法简便可行,重现性好,结果准确可靠,可用于临床患者血药浓度监测。1仪器与试药111仪器J L 99-030A 型高效液相色谱仪,包括K ont ron 522B 泵、K ont ron 540二极管阵列检测器、Kromas y stem 2000工作站、7725i 进样阀(意大利Bio -Tek 公司;B 600型低速自动平衡离心机(河北白洋离心机厂;T G L -16B 型电动离心机(上海安亭科学仪器厂。112试药盐酸多柔比星对照

11、品(批号:130509-200301、柔红霉素(批号:130559-200501均为中国药品生物制品检定所提供;甲醇为色谱纯,磷酸二氢铵和冰醋酸为分析纯,水为双重蒸馏水。2方法与结果211色谱条件色谱柱:Tianhe Kromasil C 18(150mm ×416mm ,5m ;流动相:甲醇-0101mol L -1磷酸二氢铵溶液-冰醋酸(3020011;检测波长:233nm ;流速:110mL min -1;进样量:20L ;柱温:35;内标:柔红霉素。212样品预处理将待测血浆400L 置于10mL 试管中,加入内标溶液(含柔红霉素5g mL -140L ,加入乙酸乙酯2mL

12、,涡旋混合5min ,3000r min -1离心15min ,取乙酸乙酯层置于离心管。继续往剩余残渣中加入乙酸乙酯2mL ,同法提取1次,将2次所取的乙酸乙酯溶液混合,于40水浴下空气吹干,残渣用60L 流动相溶解,取20L 上清液进样。213专属性考察血浆样品经“212”项方法处理后,在“211”项色谱条件下进行测定,盐酸多柔比星与柔红霉素的保留时间分别为617、1215min ,二者可达到完全分离,血浆中内源性成分对测定无干扰。色谱详见图1。214标准曲线的绘制取空白血浆400L ,加入系列盐酸多柔比星标准贮备液,使血浆中盐酸多柔比星的浓度分别为0125、01504、11008、215、

13、5104、10108、15100、20116g mL -1,加"212"项内标溶液40L ,经“212”项方法处理后,在“211”项色谱条件下进行测定。以盐酸多柔比星峰面积与内标峰面积的比值(Y 为纵坐标,盐酸多柔比星浓度(X 为横坐标进行线性回归处理,得回归方程为Y =010724X -010304(r =019996。结果表明,盐酸多柔比星血药浓度在012520116g mL -1范围内与峰面积呈良好的线性关系。215精密度试验取空白血浆400L ,按“214”项方法配制低、中、高(215、5104、10108g mL -13种浓度的样品,分别测定日内精密度和日间精密度

14、(n =5。结果见表1。表1精密度试验结果T ab 1Results of p recisions实际浓度/g mL -1RS D /%日内日间215412021660510411512147610108419631475216方法回收率试验取空白血浆,加入一定量的盐酸多柔比星标准贮备液,分别配制低、中、高(11008、5104、20116g mL -13种浓度的样品,经“212”项方法处理后测定,按回归方程计算测得量,计算方法回收率,结果详见表2。表2方法回收率试验结果T ab 2Results of recover y实际浓度/g mL -1测得浓度/g mL -1方法回收率/%x /%R

15、S D /%110080194894100961452116510441942981052011619162097131217临床病例血药浓度测定11名恶性淋巴瘤患者(依次编号为1、2、311,血常规、心电图、肝肾功能正常,4周内未接受化疗和放疗,化疗方案为环磷酰胺+长春新碱+盐酸多柔比星。盐酸多柔比星剂量为50m g m -2,于10min 内由一侧前臂静脉缓慢推注。给药后于0、5、15、55、150min 时取对侧肘静脉血112mL ,测定血药浓度,结果见表3。表3临床病例血药浓度(n g mL -1T ab 3Plasma conentration of cl inioal cases

16、(n g mL -1病例时间/min051555150171322139115911281112212120118301370132012831016911710140013001274717611790138013401325717411600151014101386131461134019301580133714143118711050186013989180113701750140013291116511931101015201351010183216411080186015411141043172111701930147x ±s10190±21552102±

17、;01680184±01390162±0 1320143±0124600China Pharmac y 2008Vol 119No 18中国药房2008年第19卷第8期*副主任药师。研究方向:临床药学。电话:023-*盐酸氟西汀口腔崩解片人体生物等效性研究金梅*(重庆市第二人民医院,永川市402160中图分类号R 96911文献标识码A 文章编号1001-0408(200808-0600-03摘要目的:研究盐酸氟西汀口腔崩解片在健康人体内的药动学及相对生物利用度。方法:18名健康志愿者分别单剂量交叉口服盐酸氟西汀口腔崩解片(受试制剂和盐酸氟西汀胶囊(参比制剂40m

18、 g ,用高效液相色谱法测定血药浓度,以3p 97程序计算药动学参数并进行生物等效性评价。结果:受试制剂与参比制剂在体内血药浓度药-时曲线呈一室模型,t m ax 分别为(5117±1110、(5111±1102h ,C m ax 分别为(76124±38142、(77192±34197n g mL -1,AU C 0150分别为(3216121±899169、(3220162±1275157n g h mL -1,AU C 0分别为(3570160±1299129、(3662149±1444169n g h mL

19、 -1。经组间t 检验,受试制剂与参比制剂药动学参数无显著性差异(P >0105,受试制剂的相对生物利用度为(96147±10143%。结论:盐酸氟西汀口腔崩解片与盐酸氟西汀胶囊具有生物等效性。关键词盐酸氟西汀;口腔崩解片;生物等效性;药动学;高效液相色谱Bioe q uivalence of Fluoxetine H y drochloride Orall y Disinte g ratin g T ablets in H ealth y Volunteers J IN Mei (Chon gq in g Second Peo p le s Hos p ital ,Y on

20、g chuan 402160,China ABSTRACTOBJ EC T IV E :To st ud y t he p harmacokinetics and t he relative bioavailabilit y of fluoxetine h y drochloride orall y disinte g ratin g tablet s in healt h y volunteers 1M E THODS :A sin g le oral dose of 40m g fluoxetine h y drochloride orall y inte g ratin g tablet

21、 s (test p re p aration and 40m g fluoxetine h y drochloride ca p sules (reference were g iven to 18healt h y volunteers b y a randomized crossover wa y 1The concent rations of fluoxetine h y drochloride in p lasma were determined b y HPL C ;t he p harma 2cokinetic p arameters were calculated wit h

22、3p 97p harmacokinetic p ro g ram and bioe q uivalence was evaluated 1R ESUL TS :The time -concent ration curves of test and reference p re p arations of fluoxetine h y drochloride fitted two com p art ment model wit h t he main p harmacokinetic p arameters stated as follows :t m ax were (5117±1

23、110h and (5111±1102h ;C m ax were (76124±38142n g mL -1and (77192±34197n g mL -1;AU C 0150were (3216121±899169n g h mL -1and (3220162±1275157n g h mL-1,and AU C 0were (3570160±1299129n g h mL-1and (3662149±1444169n g h mL-1,res p ectivel y 1The t test result s show

24、ed t hat t he two p re p arations had no si g nificant difference in p harmacokinetic p arameters (P >01051The relative bioavailabilit y of t he test p re p aration was (96147±10143%1CONCL U SION :The result demonst rated t hat t he two formulations were bioe q uivalent 1KEY WO RDSFluoxetine h y drochloride ;Orall y disinte g ratin g tablet s ;Bioe q uivalence ;Pharmacokinetics ;HP