动物细胞培养和核移植技术

1、动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术20102010年年1010月月2222日，日，SelinaSelina在上海拍摄新在上海拍摄新版电视剧版电视剧我和春天有个约会我和春天有个约会时意外时意外受伤，其背部和四肢被诊断为受伤，其背部和四肢被诊断为54%54%三度三度灼伤。灼伤。SelinaSelina出院，短发亮相的她增胖出院，短发亮相的她增胖5 5公斤已做公斤已做3 3次植皮手术。次植皮手术。 新闻播报：新闻播报：动物细胞培养和核移植技术2.2.12.2.1动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术一一. .动物细胞培养动物细胞培养 从动物机体中取出从

2、动物机体中取出相关相关组织组织，将它们分散成，将它们分散成单个细单个细胞胞，然后放在适宜的，然后放在适宜的培养基培养基中，让这些细胞中，让这些细胞生长和增殖生长和增殖。( (一一) )概念：概念：（二）原理：（二）原理：（三）过程：如何进行细胞培养（三）过程：如何进行细胞培养? ?细胞增殖细胞增殖（有丝分裂）（有丝分裂）动物细胞培养和核移植技术请同学们结合图请同学们结合图2-162-16，阅读课本后，简述动物细胞培养的基本，阅读课本后，简述动物细胞培养的基本过程？过程？动物细胞培养和核移植技术定义：定义：人们通常将人们通常将动物组织动物组织消化后消化后的的初次培养初次培养称为原代称为原代培养。

3、培养。胰蛋白酶处理胰蛋白酶处理取出组织取出组织胚胎或幼龄动物器官、组织胚胎或幼龄动物器官、组织剪碎剪碎单个细胞单个细胞细胞悬液细胞悬液转入培养瓶内培养转入培养瓶内培养原代培养原代培养 细胞贴壁、接触抑制细胞贴壁、接触抑制原代培养的特点：原代培养的特点： 使细胞与培养液充分接触使细胞与培养液充分接触动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术 定义：定义： 贴满瓶壁的细胞用贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶胰蛋白酶处理处理, ,然后分瓶然后分瓶继续培养，让细胞继续继续培养，让细胞继续增殖，这个过程称增殖，这个过程称传代传代培养培养. .（分瓶培养的过程分瓶培养的过程）传代培养传

4、代培养结果：结果：（动物细胞培养不能最（动物细胞培养不能最终培养成生物体）终培养成生物体）细胞群，细胞产物细胞群，细胞产物动物细胞培养和核移植技术Q1Q1、为什么传代培养的细胞一般传至、为什么传代培养的细胞一般传至1010代后就不易传代后就不易传下去？下去？细胞会随着分裂次数的增多，而逐步衰老、死亡。细胞会随着分裂次数的增多，而逐步衰老、死亡。细胞一般传至细胞一般传至1010代代左右就会左右就会衰老死亡衰老死亡细胞传至细胞传至10105050代，部分细胞的代，部分细胞的，有少部分还发生突变向癌细胞方向发展。，有少部分还发生突变向癌细胞方向发展。Q2Q2、有无、有无5050代后继续增殖的可能？代

5、后继续增殖的可能？一般使用或冷冻保存的正常细胞都是一般使用或冷冻保存的正常细胞都是（因为细胞内保持了正常的（因为细胞内保持了正常的二倍体核型二倍体核型）Q3Q3、人们通常保存哪种类型的细胞？、人们通常保存哪种类型的细胞？动物细胞培养和核移植技术小结：动物细胞培养过程：小结：动物细胞培养过程：动物组织块（幼龄动物）动物组织块（幼龄动物）细胞悬液细胞悬液胰蛋白酶胰蛋白酶原代培养原代培养单个细胞单个细胞加培养液加培养液原理：原理：细胞增殖（有丝分裂）细胞增殖（有丝分裂）结果：结果：细胞群，细胞产物细胞群，细胞产物剪碎剪碎传代培养传代培养部分细胞无限传代部分细胞无限传代分瓶培养分瓶培养加加（动物细胞培

6、养不能最（动物细胞培养不能最终培养成生物体）终培养成生物体）动物细胞培养和核移植技术 多细胞动物和人体的细胞都多细胞动物和人体的细胞都生活在生活在中，根据你所学的中，根据你所学的知识，认为体培养细胞应该模拟知识，认为体培养细胞应该模拟内环境的哪些内容呢？内环境的哪些内容呢？动物细胞培养和核移植技术（四）动物细胞培养需要的条件：（四）动物细胞培养需要的条件：1 1、无菌、无毒、无菌、无毒 2 2、全部的营养物质、全部的营养物质 3 3、适宜的温度和、适宜的温度和PHPH值值 4 4、必要的气体条件、必要的气体条件36.536.50.50.5度度, , 7.2-7.47.2-7.41)1)无菌处理

7、；无菌处理；2)2)添加抗生素；添加抗生素；3)3)更换培养液，清除代谢产物更换培养液，清除代谢产物 液体合成培养基：（液体合成培养基：（糖、氨基酸）、促生长因子、糖、氨基酸）、促生长因子、（水、无机盐、微量元素）（水、无机盐、微量元素）等；通常还需加入等；通常还需加入血浆、血血浆、血清等清等天然成分。天然成分。O O2 2、COCO2 2（9595空气空气+5+5COCO2 2）O O2 2是细胞代谢必须的；是细胞代谢必须的；COCO2 2维持培养液的维持培养液的PHPH。动物细胞培养和核移植技术（五）动物细胞培养技术的应用（五）动物细胞培养技术的应用大规模的生产有重要价值的生物制品大规模的

8、生产有重要价值的生物制品 如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体为基因工程技术提供受体细胞为基因工程技术提供受体细胞 培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植有毒物质的检测有毒物质的检测细胞的生理、药理、病理研究细胞的生理、药理、病理研究 如用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防癌症如用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防癌症及其他疾病提供依据及其他疾病提供依据动物细胞培养和核移植技术获得细胞获得细胞细胞的全能性细胞的全能性细胞或细胞产品细胞或细胞产品新的个体或新的个体或细胞产品细胞产品培养结果培养结果或细胞产物或细胞产物快速繁殖、培育快速繁殖、培育无病毒植株

9、等无病毒植株等培养目的培养目的营养物质、营养物质、动物血清动物血清营养物质、营养物质、植物激素植物激素培养基特有成分培养基特有成分液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基培养基性质培养基性质细胞增殖细胞增殖原原 理理动物细胞培养动物细胞培养植物组织培养植物组织培养比较项目比较项目植物细胞和动物细胞培养的比较植物细胞和动物细胞培养的比较动物细胞培养和核移植技术原理：原理：动物细胞核的全能性动物细胞核的全能性动物细胞培养和核移植技术 有人说它三个母有人说它三个母亲，对吗？亲，对吗？1010代以内的细代以内的细胞一般能保持胞一般能保持正常的二倍体正常的二倍体核型核型动物细胞培养和核移植技术动物细胞培

10、养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术2.2.12.2.1动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术一、动物细胞培养一、动物细胞培养概念、原理、过程、应用概念、原理、过程、应用二、动物细胞核移植技术二、动物细胞核移植技术概念、原理、过程、应用概念、原理、过程、应用动物细胞培养和核移植技术1.1.下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是A.A.培养基成分不同培养基成分不同B.B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C.C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能动物细胞可以传代培养，而植

11、物细胞不能D.D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株2.2.在克隆多利羊的过程中，下列哪项技术没有运用到在克隆多利羊的过程中，下列哪项技术没有运用到A.A.细胞培养技术细胞培养技术B.B.细胞核移植细胞核移植C.C.胚胎移植技术胚胎移植技术D.D.基因工程技术基因工程技术A D 动物细胞培养和核移植技术08年宁夏卷年宁夏卷回答下列有关动物细胞培养的问题：回答下列有关动物细胞培养的问题： 在动物细胞培养的过程中，当贴壁细胞分裂生在动物细胞培养的过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面长到细胞表面 时，细胞会停止分裂增殖，时，细胞会停止分裂增殖

12、，这种现象称为细胞的这种现象称为细胞的 。此时，瓶壁上形成。此时，瓶壁上形成的细胞层数是的细胞层数是 ，要使贴壁的细胞从瓶壁上分离，要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的是下来，需要用酶处理，可用的是 。 随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现进而出现 的现象；但极少数细胞可以的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成成 细胞，该种细胞的黏着细胞，该种细胞的黏着性性 ，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量量 。相互接触相

13、互接触单层单层胰蛋白酶胰蛋白酶衰老甚至死亡衰老甚至死亡接触抑制接触抑制不死性不死性降低降低减少减少动物细胞培养和核移植技术检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到用细胞分裂到 期的细胞用显微镜进行观察。期的细胞用显微镜进行观察。在细胞培养过程中，通常在在细胞培养过程中，通常在 条件下保存细胞，条件下保存细胞，因为在这种条件下，细胞中因为在这种条件下，细胞中 的活性降低，细胞的的活性降低，细胞的 速率降低。速率降低。给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作 进行攻击。进行攻击。中中冷冻冷冻酶酶新陈代谢新陈代谢抗原抗原 动物细胞培养和核移植技术二、动物细胞核移植技术和克隆动物二、动物细胞核移植技术和克隆动物1 1、离体的、离体的植物组织或细胞植物组织或细胞完整的植株完整的植株 技术技术植物组织培养植物组织培养原理：原理：植物细胞的全能性植物细胞的全能性2 2、离体的、离体的动物组织或细胞动物组织或细胞完整的动物体完整的动物体 技术技术核移植核移植原理：原理：动物