气相色谱法测定水体中有机氯农药残留量实验指导书

1、气相色谱法测定水体中有机氯农药残留量实验指导书1、 概述：中国是农药生产和使用的大国。农药广泛应用于农业、林业、畜牧业等，它可快速、高效、经济防治有害生物。以保证农业丰收，促进高产、优质、高效现代化农业的发展，满足人们对农副产品的需求。但是，绝大多数农药都是有毒的。残存在环境中和生物体内的微量农药，称作农药残留。它包括农药原体及其有毒代谢物、降解物和杂质。农药残留量与农药本身的理化性质、作物种类、施药因素、环境条件和气候等有关。农药污染农产品和环境，对人畜造成毒害，称作农药残毒。农药给人类和环境带来的危害问题，早已被世人瞩目。农药残留实验是为了研究农药在生物体内和环境中消解规律、各种因子与最终

2、农药残留量水平的相关性等而设计进行。本实验任务主要是对生活饮用水及其水源水中的有机氯农药残留进行相应的检测。有机氯农药(OrganicchLorine Pesticides，OCPs)是一种对环境构成严重威胁的有毒有机化合物，其对生态系统的危害以及给人类的经济活动带来的损失尤为严重。我国是二十世纪5O年代开始应用有机氯农药，在7O年代达到高峰，工业HCH和DDT曾是我国最主要的农药品种，在7O 8O年代有机氯农药生产量最大，1983年1月做出了停止生产HCH、DDT的决定。在3O年中，累计生产约490万吨HCH，为同期国际上的3倍多，DDT约4O多万吨，占国际用量的2O。目前，持久性有毒物质属

3、于有机氯农药的有艾氏剂、氯丹、滴滴涕(DDT)、狄氏剂、异狄氏剂、七氯、毒杀芬和六六六(HCH)共八种物质。因此了解水体情况，并就此开展有毒有害污染物的研究工作，是本实验检测的意义及目的所在。2、实验方法实验方法依据 GB/T 5750.9-2006生活饮用水标准检验方法 农药指标的样品前处理基本方法及采用AutoSystem XL 气相色谱仪(OV-17毛细管柱、63Ni-ECD 检测器)进行生活饮用水及其水源水的测定。3、实验设备与试剂3.1主要仪器AutoSystem XL 气相色谱仪； 63Ni-ECD 检测器；超声波清洗器（上海新苗医疗器械制造有限公司）；微量注射器（1L，上海高鸽工

4、贸有限公司）；旋转蒸发器（上海申生科技有限公司）；数显恒温水浴锅HH-8（江苏金坛市荣华仪器制造有限公司）；MTN-2800 W氮吹浓缩装置（天津奥特赛思仪器有限公司）；移液枪（100L1000L）；500毫升分液漏斗等。3.2 试剂石油醚：（AR，6090重蒸，上海试剂一厂）其具体提纯方式如下：在容量为1L圆底烧瓶中加LL石油醚，然后加1g氢氧化钠、0.5m1异辛烷和10g沸石，回流7-8h，冷却，过夜。第2天加新沸石，以1L/h的速率蒸馏，弃去第0.1L，收集后0.8L于干净容器中备用。无水硫酸钠：（AR，600灼烧4h，冷却后在干燥器中密闭保存）。硫酸钠溶液：称取4g无水硫酸钠溶于少量纯

5、水中，稀释至100mL刻线。异辛烷：（C8H18，上海三浦化工有限公司）；氢氧化钠：（NaOH,GR）；硫酸（H2SO4,GR）；分子筛：（钙5A型，球状，上海分子筛厂）；农药标准品：六六六（-BHC、-BHC、-BHC、-BHC）；滴滴伊PP-DDE；滴滴涕（O.P-DDT、P.P-DDT）；P.P-DDD；六氯苯（Hex）；七氯(Hep)，均由农业部环境保护科研监测所研制，浓度为100g/mL。4、实验准备4.1器皿的清洗:本实验的所有玻璃器皿均用铬酸洗液挂壁（大约2小时）后，用自来水清洗后再用高纯水洗三遍，烘干、备用。4.2 标准溶液的配制:农药标准中间溶液配制：本次实验所用的六六六（-

6、BHC、-BHC、-BHC、-BHC）；滴滴伊P.P-DDE；滴滴涕（O.P-DDT、P.P-DDT）；P.P-DDD；六氯苯（Hex）；七氯(Hep)，均由农业部环境保护科研监测所研制，浓度为100g/mL。确定十种混合标准溶液的体积比V-BHCV-BHCV-BHCV-BHCV P.P-DDEV O.P-DDT V P.P-DDT V Hex V Hep，并配制不同浓度水平的混合标准溶液。5、实验步骤5.1水样采集与保存方法用磨口玻璃瓶采集样品，采集后的样品于4冰箱内保存。可用超纯水做为空白水样。5.2水样预处理5.2.1洁清的水样：取水样500mL置于1000mL分液漏斗中，用70mL石油

7、醚或环己烷分三次萃取（30mL、20mL、20mL），每次充分振荡3min，静置分层，合并石油醚萃取液经无水硫酸钠脱水后，浓缩至10mL，供测定用。5.2.2污染较重的水样：取水样500mL置于1000mL分液漏斗中，用70mL石油醚或环己烷分三次萃取（30mL、20mL、20mL），每次充分振荡3min，静置分层，合并石油醚萃取液经无水硫酸钠脱水后，浓缩至10mL，加入2mL硫酸，轻轻振荡数次，静置分层，弃去硫酸相，加入10mL硫酸钠溶液，振荡，静置分层后，弃去水相，石油醚萃取液经无水硫酸钠脱水后，供测定用。上述水样预处理也可按实验优化后的水样预处理方法进行。5.3标样的气相色谱测定5.3.

8、1色谱条件:色谱柱：0.32mm×30m毛细柱（OV-17）；载气：（高纯N2：99.999）1.49mL/min（柱压15psi，恒压方式）；尾吹：（高纯N2）56mL/min；进样分流比：125；进样量：1L；进样口温度：250；检测器温度：320；柱温：225 。5.3.2定性和定量: 本实验采用的是外标标准曲线法，这是一种在一定操作条件下，用纯样品配置成不同含量的标准样品，定量进样，然后绘制相应信号对含量的标准曲线，分析样品时，加入与标准样品与标准样品相同体积的分析样品，然后从色谱图上测得相应信号，就可在标准曲线上查出对应的组分及其含量。5.3.3确定单一标样的保留时间分别将

9、标准样品六六六（-BHC、-BHC、-BHC、-BHC）；滴滴伊P.P-DDE；滴滴涕（O.P-DDT、P.P-DDT）；P.P-DDD；六氯苯（Hex）；七氯(Hep)十种标准样品，在确定的色谱条件下进样1uL，获取保留值。 表1 各组分保留时间农药名称保留时间（min）-BHC六氯苯（Hex）-BHC-BHC-BHC七氯(Hep)P.P-DDEP.P-DDDO.P-DDTP.P-DDT5.3.4确定线性范围、标准曲线对标准溶液分别测定其线性范围，测定数值填写下表：表2 线性范围农药名称线性范围-BHC六氯苯（Hex）-BHC-BHC-BHC七氯(Hep)P.P-DDEP.P-DDDO.P-

10、DDTP.P-DDT 绘制标准曲线具体方法：用石油醚将农药标准品配制成不同浓度的标准溶液在所确定的色谱条件下进行测定。从低浓度到高浓度依次进样。以十种有机氯农药的浓度对标准品峰面积做线性回归分析，其线性方程和相关系数记录下表3。表3 标准曲线方程及相关系数 农药名称 标准曲线方程 相关系数-BHC六氯苯（Hex）-BHC-BHC-BHC七氯(Hep)P.P-DDEP.P-DDDO.P-DDTP.P-DDT5.3.5检测方法的精确度（变异系数）用一种检测方法对同一组试样进行多次重复测定，其测定结果之间的偏差程度即为方法的精密度或精确度，是衡量测定值重现性的重要指标。偏差程度与测定次数、平均测定值有关，以变异系数表示，公式如下： 变异系数（CV）偏差程度还与试样中农药残留量有关，含量越高则偏差越小，要求变异系数越小。反之，试样中农药残留含量越低，偏差则越大，要求变异系数越大。本实验，将用于精确度测定的混合标样在色谱操作条件：检测器温度320、进样器温度250、柱温225、载气压力15psi、分流比为125、尾吹气流速56mL/min下，进混合标样1L，连续测定该混合标样8次，收集测定数据记录表5、计算RSD值并确定精确度范围。表5 方法精确度测定数据收集及变异系数计算值农药项目RSD（%）-BHC六氯苯（Hex）-BHC-