抑菌试验方法_第1页
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文档简介

1、抑菌圈测量是微生物分析的经典方法。它是利用抑菌物质在 涂布特定试验菌的琼脂培养基内成球形立体状扩散,抑制试验菌 的繁殖,在抑菌物质的周围形成透明圈,即抑菌圈。管碟法测定生物效价:利用抗生素在琼脂培养基内的扩 散作用,采用量反应平行线原理的设计,比较标准品与供试品两 者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小,以测定供试品效价的一种 方法。制药企业,药检所常常进行抗生素的效价测定,最普遍 的方式就是管碟法测定生物效价。管碟法测定生物效价实验中存 在大量抑菌圈测量工作,常规都是用游标卡尺手工测量抑菌圈的 直径,如今可以用仪器自动进行分析,提高检测精度,减少测量迅数-自动抑菌圈测量系统是通过 CCD采集数字图

2、像 后,进行自适应差分滤波预处理,采用改进的四叉树交叉熵分割 算法进行准确快速的分析,精确检测出抑菌圈直径数据,最后对 数据建模统计,自动得到分析结果。所有分析过程只要一秒就可 以完成。手动测量存在的问题有:1. 重现性差,准确性不够:同一培养皿,不同的人测量结果有差异;2. 当抑菌圈呈卵原形、边缘模糊 或出现双层圈 时,边界确定的人为误差大;3. 一个培养皿内有大量 抑菌圈时,如做菌种筛选时,无法 人工测量;自动抑菌圈测量的好处在于:快速、精度高、重现性好、 操作简单。示意;将试样剪成直径为2-3公分的园片,紧紧平贴在已接 种试验菌种的FDA琼脂培养基表面上,经37 C 24小时培养,培养

3、基表面上长出密密麻麻的菌落,?而试样周围有一个不长菌落的"晕 圈".测量晕圈环的宽度,用毫米表示.(如果没有晕圈?,应揭开试样, 检查样品复盖若无菌落可视为样品具有非溶出性抗菌作用.应进 一步用摇晃烧瓶?-菌落数测定法评价效将细菌植入或嫁接入营养 琼脂培养基的表面,通过在营养琼脂培养基上形成的抑制圈来评 估其抗菌效果。目前普遍采用该方法来观测抗菌素的抗菌效果。图1描述了抑菌圈测试方法。图1:涂层后基于抑菌圈的抗菌测试 日本工业标准(JIS)Z2801:20009和ASTME2180-0110是目前 使用最广泛的测试评估方法。使用 JISZ2801方法,在涂层表面 接种细菌细胞悬液并通过无菌聚丙烯膜或无菌载玻片使其紧密接 触一定时间,通常为24h。只要求(但不限于)测试两种菌株:金黄 色葡萄球菌(ATCC#6538)和大肠杆菌(ATCC#11229)。抗菌活性 值由抗菌产品和未经处理产品在 24小时接触后的

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