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1、自体血清关节腔内注射对软骨细胞凋亡的实验研究上海交通大学附属第六人民医院麻醉科 200233马柯 徐永明 周瑾 杜冬萍摘 要目的：骨性关节炎（OA）机制复杂、治疗效果差、疗程长，是重要的公共健康问题，也是麻醉科疼痛专业所面临的顽疾之一。自体血清体外实验能够减少软骨细胞凋亡，但是关节腔内应用对于软骨细胞凋亡的影响未见报道，本研究即针对此进行探讨。方法：取成年雄性犬共22只，静脉麻醉下行前交叉韧带手术建立双侧膝关节OA模型模型后，随机分为两组（n=11）：生理盐水对照组(左膝)vs自体血清组(右膝)；自体血清组(左膝)vs透明质酸钠组(右膝)。其中，生理盐水对照组为0.1%布比卡因0.5 ml腔内

2、注射，自体血清组去除血清中蛋白、灭活后即刻关节腔内注射（自体血清0.4 ml加入0.1%布比卡因共0.5ml）。透明质酸钠组为透明质酸钠0.4ml加入0.1%布比卡因共0.5ml关节腔内注射。每周一次，共5次为一个治疗疗程。疗程结束后分别于第4w、8w、12w、16w进行关节软骨相关指标测定：组织染色光镜观察（HE和甲苯胺蓝染色）、软骨细胞凋亡观察（TUNEL末端荧光标记法）以及ELISA法关节腔内炎性因子测定（IL-1、IL-6、TNF-）。结果：光镜结果 关节腔内注射后8周关节软骨（HE染色和甲苯胺蓝染色）：自体血清组 透明质酸对照组 关节腔内注射后16周关节软骨（其余时点略）：自体血清组

3、 透明质酸对照组 图解：8周、16周，自体血清组的透明软骨细胞的修复和生长均好于生理盐水组（图片略）和透明质酸对照组，软骨基质的修复也优于两组对照组。软骨细胞凋亡：自体血清组治疗后4w、8w、12w的软骨细胞凋亡率明显低于两对照组，差异有显著性（P0.050.01），虽然至16周差异没有显著性，但自体血清组仍然表现较低的细胞凋亡率。炎性因子：自体血清组和透明质酸组在治疗后各时点相比差异没有显著性（P0.05），和治疗前相比均可以有效抑制腔内炎性反应。两组和生理盐水对照组相比差异有显著性（P0.050.01）。结论：自体血清相比小牛血清等更加容易保持人类软骨细胞增殖和减少细胞凋亡。即使和增加了其他生长因子的培养基质相比较，自体血清在体外软骨细胞培养中也表现了良好的作用。和玻璃酸钠组相比，同样也可以减少关节腔内的炎性因子的水平，有效降低OA的炎性反应。可能和自体血清含有丰富的缓冲系统，并且含有生长因子以及补充关节腔内的粘弹性有关。自体血清可以减少OA关节软

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